"STO細(xì)胞：小鼠胚胎纖維細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

STO Cell

細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞樣

132907-72-3

我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽(tīng)說(shuō)，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來(lái)的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過(guò)的近300株細(xì)胞里面，還沒(méi)遇到這么怪異的。比如Caco2其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒(méi)養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒(méi)消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過(guò)程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來(lái)越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法5min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT15, LS411和KM12，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般100 mm dish，一次最多加入500ul，就足夠了，一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過(guò)5min，即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。

STO細(xì)胞：小鼠胚胎纖維細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

GC9811-P細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：胃癌

U343細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2傳代；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)?。患?xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

SO-RB50細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮；細(xì)胞背景資料：視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤；女性

NCI-N87 [N87]細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：胃癌；肝轉(zhuǎn)移；男性

SK-N-SH細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2傳代；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)；細(xì)胞背景資料：SK-N-SH細(xì)胞系由J.L.Bieder建系，它與SK-N-MC所不同的是倍增時(shí)間較長(zhǎng)且多巴胺-β-羥基酶水平較高。 SK-N-SH在細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性試驗(yàn)中用作靶細(xì)胞系。

解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專(zhuān)家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：1)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為1*10(6)至1*10(7)細(xì)胞/毫升；2)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-70℃至-80℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為1-5天，但這不是保存的方法。在37℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng)；3)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在24小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的條件在對(duì)數(shù)期；4)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

OKT 3細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

MRC-5細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：5傳代；每周1-2次；細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞樣；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)；細(xì)胞背景資料：MRC-5細(xì)胞系來(lái)自14周齡男性胎兒的正常肺組織，該細(xì)胞老化前能傳代42~46個(gè)倍增時(shí)間。

FL83B細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：肝；自發(fā)永生；C57BL/6J

NHLF細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：肺；成纖維細(xì)胞

hUC-MSC細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：臍帶；間充質(zhì)干細(xì)胞

A704細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：腎癌；男性

STO細(xì)胞：小鼠胚胎纖維細(xì)胞

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系

細(xì)胞傳代注意事項(xiàng)：①傳代培養(yǎng)時(shí)注意無(wú)菌操作并防止細(xì)胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。每種細(xì)胞使用一套器材；②每天觀察細(xì)胞形態(tài)，掌握好細(xì)胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn)：健康細(xì)胞的形態(tài)飽滿，折光性好，生長(zhǎng)致密時(shí)即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染跡象，應(yīng)立即采取措施，一般應(yīng)棄置污染的細(xì)胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細(xì)胞的建系和維持：細(xì)胞系的維持通過(guò)換液傳代再換液、再傳代和細(xì)胞種子凍存來(lái)實(shí)現(xiàn)。對(duì)每一個(gè)細(xì)胞系來(lái)說(shuō)都有其自身的特點(diǎn)，要做好建系的維持必須記錄好細(xì)胞檔案,換液傳代和做好細(xì)胞系的管理工作。培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中，儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。

細(xì)胞背景資料：STO是一株繼代生長(zhǎng)的胚成纖維細(xì)胞系，可用于制備飼養(yǎng)層細(xì)胞（feederlayers）和其他研究。

STO細(xì)胞：小鼠胚胎纖維細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：1：2傳代

動(dòng)物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器進(jìn)行簡(jiǎn)單介紹：1)CO2培養(yǎng)箱：CO2培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，它為細(xì)胞提供了一個(gè)體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染，因此，CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要；2)烘箱(干燥箱)：用于細(xì)胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用，玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時(shí)，烘箱內(nèi)溫度一般要達(dá)到160℃以上，通常使用鼓風(fēng)式烘箱。其優(yōu)點(diǎn)是溫度均勻、效果較好，缺點(diǎn)是升溫過(guò)程較慢。升溫時(shí)不能先升溫后鼓風(fēng)而應(yīng)鼓風(fēng)與升溫同時(shí)開(kāi)始，至100℃時(shí)，停止鼓風(fēng)。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦，燒焦的碎屑可影響細(xì)胞的生長(zhǎng)。消毒后不能立即打開(kāi)箱門(mén)，以免驟冷導(dǎo)致玻璃器皿破裂，應(yīng)等溫度自然下降至100℃以下后可開(kāi)門(mén)。3)超凈工作臺(tái)/生物安全柜：細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)無(wú)菌環(huán)境要求很高，在細(xì)胞操作時(shí)，一般需要在100級(jí)空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行，因此超凈工作臺(tái)或生物安全柜就必須配備。4)液氮罐：為了保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株，要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃，因此，需要液氮罐。在此環(huán)境中，一般細(xì)胞可以保存十年具有活性。5)超低溫冰箱：細(xì)胞的凍存過(guò)程需要一系列程序降溫，一般4℃下存放30min，轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour，再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過(guò)夜，之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃)，這時(shí)就必須配備一臺(tái)-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細(xì)胞可達(dá)數(shù)月，對(duì)于不需要長(zhǎng)期凍存的細(xì)胞，可暫時(shí)放于超低溫冰箱保存。6)恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾?xì)胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速?gòu)?fù)蘇之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴也是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器。7離心機(jī)：細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞，所以需要配置低速的常溫離心機(jī)，對(duì)于后期細(xì)胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機(jī)。除上述儀器外，移液器、高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡也是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機(jī)等也常常見(jiàn)于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室。

MMQ細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸??；細(xì)胞背景資料：垂體瘤

MLA-144細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

Jurkat,CloneE6-1細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2傳代；細(xì)胞形態(tài)特性：淋巴母細(xì)胞樣；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)；細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞是Jurkat-FHCRC細(xì)胞株(Jurkat細(xì)胞株的衍生)的一個(gè)克隆。Jurkat細(xì)胞株來(lái)源于一個(gè)14歲男孩的外周血；經(jīng)佛波酯和外源凝集素或抗T3單克隆抗體中的一種誘導(dǎo)后可產(chǎn)生大量IL-2(IL-2的產(chǎn)生需兩種類(lèi)型的誘導(dǎo)劑)；表達(dá)T細(xì)胞受體、CD3。

UMUC-14細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：腎癌；男性

MOLM-16細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸?。患?xì)胞背景資料：急性髓系白血?。慌?/div>