"TT細胞：人甲狀腺髓樣癌細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

TT Cell

細胞形態(tài)特性：上皮樣

1134-47-0

細胞傳代培養(yǎng)(消化法)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程【原理】細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續(xù)生長，同時也將細胞數(shù)量擴大，就必須進行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經(jīng)過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經(jīng)消化后才能分瓶。【材料和試劑】1)無菌生理緩沖液(PBS)；2)胰酶-EDTA溶液(0.05%胰酶-0.53mM EDTA-4Na): 以10ml分裝于15 ml無菌離心管中，保存于–20℃，使用前放在37℃水槽回溫；3)新鮮培養(yǎng)基；4)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準(zhǔn)備操作】1)預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；2)用75％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；3)正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染；4)點燃酒精燈：注意火焰不能太小；5)準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶；6)取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi)；7)從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞；8)打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。

TT細胞：人甲狀腺髓樣癌細胞

細胞生長特性：貼壁生長

A-375細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：A375源自一位54歲女性，是Giard DJ等人建立的一系列細胞株中的一株。該細胞可在免疫抑制小鼠上成瘤，在瓊脂上形成克隆。

DITNC1細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：成纖維母細胞樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

SNU-719細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：胃癌；男性

CG4細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：半貼壁；細胞背景資料：少突膠質(zhì)前體細胞；SD大鼠

MBA-MD-231細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

接收細胞相關(guān)問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T25及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在37度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置1-2天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-80度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復(fù)蘇細胞。T25瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導(dǎo)致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T25瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(1200rpm，5min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(1000rpm，3min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。

NCI-295R細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

MIHA細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：肝

SW1116細胞系；細胞傳代方法：消化3-5分鐘。1：2。3天內(nèi)可長滿；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：CSAp陰性(CSAp-)。 結(jié)腸抗原3，陰性。 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。 癌基因c-myc, K-ras, H-ras, myb, sis 和fos的表達呈陽性。 未檢測到癌基因N-myc和N-ras的表達。 表達腫瘤特異的核基質(zhì)蛋白CC-4，CC-5和CC-６。

J774細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：巨噬細胞；BALB/c

YH-13細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

G422細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：實體瘤；細胞生長特性：體內(nèi)生長；細胞背景資料：1964年建株；甲基膽蒽植入Km小鼠腦內(nèi)誘發(fā)星形細胞瘤，傳至第120代后轉(zhuǎn)為膠質(zhì)細胞瘤；瘤細胞懸液同系小鼠皮下、肌肉、腦內(nèi)移植，成功率皆100%。肌肉及腦內(nèi)移植可形成較規(guī)律的移植性瘤株，存活時間腦內(nèi)型15.9±4.8天；肌肉型20.3±6.6天。

TT細胞：人甲狀腺髓樣癌細胞

細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系

細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以1：2或1：2以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用75% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預(yù)熱；③超凈臺臺面應(yīng)整潔，用75%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面20min左右，關(guān)閉紫外燈，打開風(fēng)機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復(fù)吹打消化好的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO2的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟7-9不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。

細胞背景資料：TT細胞由LeongSS等，自一位77歲白人女性甲狀腺髓樣癌患者的穿刺活檢樣本中建立。TT細胞持續(xù)產(chǎn)生高水平的降血素和CEA。更換培養(yǎng)基后24h和72h，在培養(yǎng)基中檢測到的免疫活性的降血素濃度分別為3900pg/106個細胞和7700pg/106個細胞。72小時后CEA積累濃度超過27ng/106個細胞；該細胞最初是在RPMI1640培養(yǎng)液中培養(yǎng)，可產(chǎn)生神經(jīng)肽，但還不知道在F12培養(yǎng)液中培養(yǎng)是否會產(chǎn)生。

TT細胞：人甲狀腺髓樣癌細胞

細胞傳代方法：1：3-1：4傳代，每周換液2次。

幾種實驗室細胞培養(yǎng)基成分的作用：1)NaHCO3的作用是什么？與CO2一起形成緩沖系統(tǒng)，保持培養(yǎng)基PH值穩(wěn)定；2)酸鈉的作用是什么？酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是如果沒有葡萄糖的話，細胞也可以代謝酸鈉。酸鈉的貯存液濃度一般為50mM，-20℃保存，培養(yǎng)基中的終濃度為1mM；3)加入HEPES有何好處？培養(yǎng)基中最常用的Buffer system是碳酸鹽，它可提供營養(yǎng)，但卻在生理PH值條件下會降低緩沖能力。而HEPES是一種很強的Buffer，加入HEPES能使細胞培養(yǎng)基在PH7.2-7.6條件下緩沖能力增強。Hepes的貯存液濃度一般為1M，常溫保存。培養(yǎng)基中的終濃度為25mM，即5ml 1M的Hepes加入到200ml完全培養(yǎng)基中；4)紅的作用是什么？紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值指示劑：中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色；5)谷酰胺的作用是什么？幾乎所有的細胞對谷酰胺都有膠高的要求。谷酰胺脫掉基后，可作為培養(yǎng)細胞的能量來源，參與蛋白質(zhì)的合成和能量代謝。在缺少谷酰胺時，細胞生長不良而死亡。所以，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應(yīng)置-20℃冰凍保存，用前加入培養(yǎng)基中。加有谷酰胺的液體培養(yǎng)基4度冰箱儲存兩周以上時，應(yīng)重新加入原來量的谷酰胺。試驗操作中常配制高濃度(100倍)的谷酰胺溶液(1ml/支)，分裝使用，-20℃保存。使用時，每支1ml的谷酰胺加入到99ml完全培養(yǎng)基中，使其終濃度為2mM培養(yǎng)基。

JM1細胞系；細胞傳代方法：換液2-3次一周；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞樣；細胞生長特性：懸浮生長 ；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

LAC細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：肺癌

SJCRH30[RC13]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

CAL27細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

HM1900細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：小膠質(zhì)細胞

38C13細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：半貼壁；細胞背景資料：B淋巴瘤；C3H/eB

HcerEpic細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：子宮頸；上皮細胞

TT細胞：人甲狀腺髓樣癌細胞

NCI-H1435[H1435]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

hESC細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：子宮內(nèi)膜；間質(zhì)細胞；女性

SNU-354細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

HA1800細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：星形膠質(zhì)細胞

MiaPaCa-2細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：胰腺導(dǎo)管癌；男性

NCI-H2227[H2227]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

TU177細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：喉鱗癌

PAXC-011細胞系；細胞傳代方法：1：3傳代，3-4天傳1次；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

SNU-886細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Colo738細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

ND7/23細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：神經(jīng)母細胞瘤

NCI-H847[H847]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

HSF細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

NCI-H1666[H-1666,H1666]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Hep-3B2.1-7細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

OCI-AML2細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：懸浮；細胞背景資料：急性髓系白血?。荒行?/div>