Serum-Free干細(xì)胞凍存液
產(chǎn)品基本信息
產(chǎn)品簡介
Serum-Free干細(xì)胞凍存液是埃澤思生物（Applied CellTM）自主開發(fā)的一款無血清、無需程序降溫的干細(xì)胞凍存液，適用于人多能干細(xì)胞（hES/hiPS）的凍存。本產(chǎn)品生產(chǎn)過程遵循ISO9001體系,并符合GMP指導(dǎo)原則。
產(chǎn)品特性
安全：無外源蛋白成分，大大降低各類病毒、霉菌和支原體等的污染風(fēng)險。
穩(wěn)定：全程無血清生產(chǎn)，批次間差異小。
高效：凍存細(xì)胞復(fù)蘇率高于90%。
簡單：即用型產(chǎn)品，且無需程序降溫可直接-80℃過夜后轉(zhuǎn)移至液氮中長期保存。
產(chǎn)品內(nèi)容
相關(guān)產(chǎn)品
人多能干細(xì)胞培養(yǎng)基（Applied CellTM: Cat. no.AC-1001000）
人多能干細(xì)胞消化液（Applied CellTM: Cat. no.AC-1001008）
Serum-free細(xì)胞凍存液（Applied CellTM: AC-1001005/1001006）
即用型基質(zhì)膠（Applied CellTM: Cat. no. AC-1001007）
人iPS細(xì)胞（Applied CellTM: Cat. no.AC-2001001）
人ES細(xì)胞（Applied CellTM: Cat. no.AC-2001002）
操作方法
細(xì)胞凍存
1.1 準(zhǔn)備對數(shù)期生長的干細(xì)胞，加入人多能干細(xì)胞消化液（AC-1001008）消化3~5 min，用2mL人多能干細(xì)胞培養(yǎng)基（AC-1001000）制備成細(xì)胞懸液；
1.2 1000rpm 3min離心，棄上清，用1.5-2mL Serum-Free干細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞，細(xì)胞密度1×106~1×107 /mL；
1.3 轉(zhuǎn)移至凍存管中，無需程序降溫，直接將待凍存細(xì)胞置于 -80℃過夜，后轉(zhuǎn)移至液氮中長期保存，凍存時注意直立放置凍存管；
細(xì)胞復(fù)蘇
2.1 基質(zhì)膠包被培養(yǎng)板：取出6孔板/12孔板，每孔內(nèi)加入1 mL/0.5 mL即用型基質(zhì)膠（AC-1001007），輕輕晃動6孔板/12孔板使基質(zhì)膠完全覆蓋皿底，置于37℃培養(yǎng)箱中孵育1h~2h，實驗前拿出并置于超凈工作臺/生物安全柜中室溫下平衡20min。如果暫時不用，可用Parafilm封口后2-8℃ 儲存，并于1周內(nèi)使用。
注意：①一支凍存的干細(xì)胞的數(shù)量在1×106cells/mL左右，對應(yīng)6孔板1孔；②即用型基質(zhì)膠對溫度敏感，即用即拿，用完后立即放回4℃冰箱保存，且勿用手直接觸碰基質(zhì)膠液面所及的瓶身，影響基質(zhì)膠質(zhì)量。
2.2 先將2~3mL的干細(xì)胞培養(yǎng)基加入15mL離心管中備用。
2.3 解凍：將從液氮中取出的凍存管快速浸入37℃溫水中，快速搖動，使其在1~2min內(nèi)快速解凍；
注意：細(xì)胞從液氮中拿出的速度要快，盡量減少其暴露在室溫中的時間。
2.4 離心：凍存管中的凍存液解凍后，將其逐滴加入含有干細(xì)胞培養(yǎng)基的15mL離心管中，將15mL離心管置于低速離心機(jī)中配比平衡后，1000rpm離心3min；
2.5 重懸：離心后棄上清加1mL人多能干細(xì)胞培養(yǎng)基對干細(xì)胞沉淀進(jìn)行吹吸混勻，吹吸3~5次左右。
2.6 接種：吹吸均勻后，將已經(jīng)平衡好的即用型基質(zhì)膠棄掉，將吹打均勻的干細(xì)胞懸液加入到已經(jīng)包被好的6孔板中，并補(bǔ)全每孔2mL培養(yǎng)體系。
2.7 培養(yǎng)：接種后的6孔板可以置于倒置相差顯微鏡下觀察接種的干細(xì)胞密度以及細(xì)胞團(tuán)塊大小，呈4個細(xì)胞以上的團(tuán)塊較合格，水平十字輕輕晃動6孔板/12孔板使細(xì)胞均勻分布。并置于37℃，5% CO2的恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，第2天觀察細(xì)胞貼壁情況；
質(zhì)量控制
關(guān)鍵字： 干細(xì)胞凍存液、無血清干細(xì)胞凍存液;
上海埃澤思生物科技有限公司（ Applied Cell?）專注于治療用及生產(chǎn)用細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品研發(fā)與生產(chǎn)，目前公司產(chǎn)品已經(jīng)涵蓋干細(xì)胞、免疫細(xì)胞培養(yǎng)，凍存以及分離等領(lǐng)域。為保證產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)化、一致性，我們對所有產(chǎn)品進(jìn)行嚴(yán)格的原料篩選及生產(chǎn)控制。目前，我公司已通過ISO9001：2015質(zhì)量管理體系認(rèn)證。除提供產(chǎn)品支持，本公司的技術(shù)團(tuán)隊還可為您提供及時有效的技術(shù)支持、技術(shù)咨詢，以及與您探討感興趣的科學(xué)問題和解決方案。最終我們希望通過高品質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)，不斷推動細(xì)胞治療、再生醫(yī)學(xué)以及藥物發(fā)展與創(chuàng)新，愿我們早日成為您在研發(fā)科研及應(yīng)用領(lǐng)域的忠誠合作伙伴。
公司愿景:
我們努力成為中國細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域最頂尖產(chǎn)品與服務(wù)提供商。
公司使命: