過氧化物酶,通常來源于辣根(因此稱辣根過氧化物酶),是臨床檢驗試劑中的常用酶。該產(chǎn)品不但廣泛用于多個生化檢測項目,也廣泛運用于免疫類(ELISA)試劑盒。過氧化物酶作為多個試劑盒顯色體系的關(guān)鍵成分,對試劑盒的質(zhì)量有重要影響。
辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)比活性高,穩(wěn)定,分子量小,純酶容易制備,所以最常用。HRP廣泛分布于植物界,辣根中含量高,它是由無色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結(jié)合而成的糖蛋白,糖含量18%。HRP由多個同功酶組成,分子量為40,000,等電點為PH3~9,酶催化的最適PH因供氫體不同而稍有差異,但多在PH5左右。酶溶于水和58%以下飽和度硫酸銨溶液。HRP的輔基和酶蛋白吸收光譜分別為403nm和275nm,一般以O(shè)D403nm /OD275nm的比值RZ(德文Reinheit Zahl)表示酶的純度。高純度的酶RZ值應(yīng)在3.0左右(最高可達3.4)。RZ值越小,非酶蛋白就越多。
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