潮霉素B是aminoglycosidic的的抗生素,抑制原核生物和真核生物蛋白質(zhì)合成。它是用來選擇和保持穩(wěn)定轉(zhuǎn)染真核細胞E. 大腸桿菌潮霉素抗性基因(HYG或HPH)。
僅用于生命科學(xué)研究。
產(chǎn)品描述:
LD 50:
在小鼠6毫克/公斤(四)在豚鼠(IP)13毫克/公斤; 63毫克/公斤大鼠(IP)分子量:M R = 527.5 工作濃度: 50 - 1000微克/毫升細胞培養(yǎng)。哺乳動物細胞的選擇一個常用的濃度是200微克/毫升。然而,必須試驗確定濃度,因為它可能會有所不同細胞類型而定。
內(nèi)容:
解決方案,50毫克/毫升,在PBS(磷酸鹽緩沖液),通過0.2微米孔徑膜過濾
作用機理:
潮霉素B是由吸水鏈霉菌(Streptomyces hygroscopicus)產(chǎn)生的一種氨基糖苷類抗生素,通過抑制蛋白質(zhì)合成能殺死細菌、真菌和高等真核細胞,用于篩選和保持轉(zhuǎn)化(轉(zhuǎn)染)有潮霉素抗性基因的原核和真核細胞。
潮霉素B與大多數(shù)氨基糖苷類抗生素一樣,通過中斷易位并增加 80S 核糖體上的錯誤翻譯抑制蛋白質(zhì)的合成??梢苑€(wěn)定核糖體大亞基上的tRNA結(jié)合位點,導(dǎo)致空載tRNA不能脫離核糖體,抑制了翻譯的繼續(xù)進行,潮霉素的抑制作用對于原核細胞與真核細胞的核糖體都是有效的。
由于它所采用的作用模式與 Geneticin
、Blasticidin S 和 Zeocin
不同,因而十分適合與其它選擇試劑配合用于雙選擇實驗。
抗性基因:
潮霉素B磷酸轉(zhuǎn)移酶(Hph)提供對潮霉素的抗性。Hph催化環(huán)醇的4—OH基團,產(chǎn)生在體內(nèi)體外都失去活性的7"-O型磷酸化潮霉素B。
已經(jīng)有兩種編碼Hph的基因。種基因是從產(chǎn)生潮霉素B的Streptomyces hygroscopicus中分離出來。第二種基因是Escherichia coli 和Klebsiella pneumoniae中分離出來的一種質(zhì)粒傳染抗性基因。在基因轉(zhuǎn)染實驗中使用的大部分潮霉素B載體利用的是E. coli的hph基因。
理化性質(zhì):
溶解性:水溶性
樣品狀態(tài):溶液,50 mg/ml,緩沖液為PBS(phosphate-buffered saline),經(jīng)過0.2 µm孔徑濾膜過濾。
純度:>98% (HPLC)
LD50:小鼠(i.v.)6 mg/kg;天竺鼠(i.p.) 13 mg/kg; 大鼠 (i.p.) 63 mg/kg
工作濃度:細胞培養(yǎng)中為50 - 1,000 µg/ml。哺乳動物細胞培養(yǎng)通常使用的濃度為200 µg/ml。但是,最適濃度必須通過實驗確定,這需要根據(jù)細胞類型不同而改變。