化學名

4-[4-[[4-chloro-3-(trifluoromethyl)phenyl]carbamoylamino]-3-fluorophenoxy]-N-methylpyridine-2-carboxamide

簡稱

Regorafenib

別名

4-(4-(3-(4-Chloro-3-(trifluoromethyl)phenyl)ureido)-3-fluorophenoxy)-N-methylpicolinamide, Regorafenibum, Stivarga, BAY 73-4506

中文名

瑞格非尼

化學式

C₂₁H₁₅ClF₄N₄O₃

分子量

482.82

CAS號

755037-03-7

純度

98%

溶劑/溶解度

Water<1mg/ml; DMSO97mg/ml; Ethanol<1mg/ml

溶液配制

5mg加入1.04ml DMSO，或者每4.83mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SF5296-10mM用DMSO配制。

產品描述

Regorafenib (BAY 73-4506)是一個多靶點抑制劑，作用于VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、PDGFR-β、Kit、RET和Raf-1，在無細胞試驗中IC50分別是13nM、4.2nM、46nM、22nM、7nM、1.5nM和2.5nM。

信號通路

Protein Tyrosine Kinase; Angiogenesis

靶點

RET

Raf-1

VEGFR2

Kit

VEGFR1

IC50

1.5nM

2.5nM

4.2nM

7nM

13nM

體外研究

在NIH-3T3細胞中Regorafenib強烈抑制VEGFR2的自磷酸化，IC50為3nM。在HAoSMCs中，Regorafenib抑制PDGFR-β經過PDGF-BB刺激后的自磷酸化，IC50為90nM。在MCF-7乳腺癌細胞中，Regorafenib也會抑制FGF10刺激后FGFR的信號傳導。Regorafenib非常有效的抑制KITK642E和RETC634W這兩個突變的受體，IC50分別是大約20nM和10nM。Regorafenib抑制經過VEGF165刺激后的HUVECs細胞的增值，IC50為大約3nM。Regorafenib抑制FGF2刺激后的HUVECs和PDGF-BB刺激后的HAoSMCs細胞的增殖，IC50分別是127nM和146nM。Regorafenib通過抑制酪氨酸激酶受體(VEGFR、KIT、RET、FGFR和PDGFR)和絲氨酸/蘇氨酸激酶受體(RAF和p38MAPK)來靶向作用于腫瘤細胞增殖和腫瘤脈管系統(tǒng)。Regorafenib以濃度依賴和時間依賴方式抑制人Hep3B、PLC/PRF/5和HepG2細胞的生長。

體內研究

在多種臨床前人類異種移植的小鼠模型上，Regorafenib有著很好的腫瘤生長抑制性，這種抑制具有劑量依賴特性，表現為在乳腺MDA-MB-231和腎臟786-O腫瘤模型中腫瘤減小，Regorafenib不僅阻止了同源主要的4T1乳腺腫瘤在脂肪墊中的原位生長，也抑制了腫瘤轉移到肺部。

臨床實驗

N/A

特征

Regorafenib是一個新的口服多激酶抑制劑。

酶活性檢測實驗

方法

體外激酶實驗用重組的VEGFR2(鼠源，aa785-aa1367)，VEGFR3(鼠源aa818-aa1363)，PDGFR-β(aa561-aa110^6)，RAF-1(aa305-aa648)和BRAFV600E(aa409-aa765)的激酶活性區(qū)域進行。初始的激酶抑制反應將Regorafenib的濃度固定為1μM。IC50的值根據選定的相應的激酶來測定，如VEGFR1和RET。TIE2的激酶抑制效果采用均相時間分辨熒光分析法測定，利用重組的TIE2細胞內區(qū)域的GST融合蛋白和生物素化的-Ahx-EPKDDAYPLYSDFG多肽作為底物。

細胞實驗

細胞系

GIST 882和TT細胞

濃度

5nM-10μM

處理時間

96小時

方法

為了分析細胞增殖情況，將GIST 882和TT細胞培養(yǎng)在含有L-glutamine谷氨酸的RPMI培養(yǎng)基中，MDA-MB-231，HepG2和A375細胞培養(yǎng)在含有10% hiFBS的DMEM培養(yǎng)基中。將細胞用胰酶消化，按5×10⁴個每孔接種在96孔板中并在含有10% FBS的完全培養(yǎng)基中37℃培養(yǎng)過夜。第二天，將對照和Regorafenib用培養(yǎng)基稀釋成從10μM到5nM的連續(xù)終濃度，加入0.2% DMSO，加入細胞培養(yǎng)基中并繼續(xù)培養(yǎng)96小時。將細胞增殖情況進行量化。

動物實驗

動物模型

攜帶Colo-205、MDA-MB-231細胞或者786-O腫瘤的雌性無胸腺NCr nu/nu小鼠

配制

聚乙二醇400/125mM甲磺酸水溶液(80/20)或者聚丙烯乙二醇/聚乙二醇400/Pluronic F68 (42.5/42.5/15+20%水溶液)

劑量

3mg/kg，10mg/kg，30mg/kg，100mg/kg

給藥方式

口服

產品編號

產品名稱

包裝

SF5296-10mM

Regorafenib (VEGFR抑制劑)

10mM×0.2ml

SF5296-5mg

Regorafenib (VEGFR抑制劑)

5mg

SF5296-25mg

Regorafenib (VEGFR抑制劑)

25mg

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說明書

1份