??????碧云天生產(chǎn)的SABC-AP Kit with Anti-Rabbit IgG (IHC&ICC)是基于Streptavidin-Biotin Complex (SABC)信號放大系統(tǒng)而研制的用于免疫組化(Immunohistochemistry, IHC)和免疫細(xì)胞化學(xué)(Immunocytochemistry, ICC)等基于生物素標(biāo)記的各種高靈敏度檢測。
??????本試劑盒檢測靈敏度高。與常規(guī)的檢測方法相比，由于本試劑盒采用了SABC信號放大系統(tǒng)，檢測靈敏度顯著提高，通常檢測靈敏度比常規(guī)方法可以提高約5-10倍。常規(guī)方法檢測信號過弱時(shí)，強(qiáng)烈推薦嘗試本試劑盒。
??????本試劑盒特異性強(qiáng)、背景低。本試劑盒采用了比Avidin特異性更強(qiáng)、背景更低、靈敏度更高的Streptavidin。Streptavidin (鏈霉親和素)是從Streptomyces adidinii?中純化獲得的一種分子量為66kD的四聚體蛋白，可以同時(shí)結(jié)合4個(gè)生物素分子，其對生物素的解離常數(shù)(Kd, dissociation constant)可達(dá)10-15M，比通?？乖贵w的親和力高約100萬倍，可以確保與生物素高度專一地結(jié)合。Streptavidin與雞蛋清來源的Avidin (親和素)在空間結(jié)構(gòu)以及與生物素的親和力方面具有高度的相似性，但Streptavidin等電點(diǎn)幾乎為中性(pI=6.0-6.5)，其在中性條件下幾乎不帶電荷。而Avidin的pI=10.5，在中性條件下帶正電荷。因此Streptavidin比Avidin的非特異性結(jié)合更低，檢測靈敏度更高。
??????檢測原理：參考圖1，組織、細(xì)胞、轉(zhuǎn)移到膜上的或者結(jié)合于多孔細(xì)胞培養(yǎng)板上的抗原先與一抗結(jié)合，后者再與生物素標(biāo)記的二抗結(jié)合；按照適當(dāng)比例將Streptavidin和生物素標(biāo)記的堿性磷酸酶(Biotin-labeled Alkaline Phosphatase, Biotin-AP)混合，形成網(wǎng)絡(luò)狀的SABC-AP (Streptavidin-Biotin Complex containing AP)復(fù)合物；接著二抗上標(biāo)記的生物素再與SABC-AP結(jié)合，加入AP底物進(jìn)行顯色即可檢測到相應(yīng)的信號。其中Streptavidin和Biotin-AP混合后形成網(wǎng)絡(luò)狀復(fù)合物是信號能被放大的關(guān)鍵，相當(dāng)于一個(gè)待檢測的生物素分子通過SABC-AP復(fù)合物的識別最終可以由很多個(gè)AP分子來顯示其信號，從而達(dá)到了信號放大的效果。

圖1. 本試劑盒的檢測原理圖。

??????本試劑盒用于IHC和ICC時(shí)，可以配制成50ml的生物素高效標(biāo)記二抗工作液和SABC工作液。按照IHC和ICC每個(gè)樣品需要使用100μl的生物素高效標(biāo)記二抗工作液和SABC工作液計(jì)算，本試劑盒可用于500個(gè)樣品的檢測。
包裝清單：

保存條件：
??????-20℃保存，一年有效。4℃保存，一個(gè)月有效。
注意事項(xiàng)：
??????本試劑盒使用過程中所需的溶液不能含有堿性磷酸酶抑制劑，同時(shí)切勿向本試劑盒溶劑中加入可能含有生物素的溶液，如常規(guī)血清、脫脂奶粉、培養(yǎng)基等，否則會(huì)降低本試劑盒的檢測靈敏度。
??????任何與液體孵育有關(guān)的步驟都需要確保液體能很好地覆蓋樣品。樣品沒有被液體充分覆蓋而最終出現(xiàn)發(fā)干的情況，會(huì)導(dǎo)致染色不能正常進(jìn)行。
??????實(shí)驗(yàn)所需緩沖液宜新鮮配制。長期放置的緩沖液可能會(huì)因?yàn)槲⑸镂廴?，而?dǎo)致檢測效果的下降。
??????為提高檢測靈敏度，推薦使用雙蒸水或三蒸水。低電導(dǎo)率的去離子水也可能含有微量過氧化物酶的抑制劑從而影響檢測靈敏度。
??????本試劑盒中的Streptavidin和Biotin-AP兩種試劑需配套使用，切勿與其它試劑混用。
??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。