化學名

4-[6-methoxy-7-(3-piperidin-1-ylpropoxy)quinazolin-4-yl]-N-(4-propan-2-yloxyphenyl)piperazine-1-carboxamide

簡稱

Tandutinib

別名

MLN518, MLN-518, MLN 518, CT 53518, CT-53518, CT53518

中文名

坦度替尼

化學式

C₃₁H₄₂N₆O₄

分子量

562.7

CAS號

387867-13-2

純度

98%

溶劑/溶解度

Water<1mg/ml; DMSO25mg/ml warming; Ethanol6mg/ml

溶液配制

5mg加入0.89ml DMSO，或者每5.63mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SC1058-10mM用DMSO配制。

產品描述

Tandutinib (MLN518)是一種有效的FLT3拮抗劑，IC50為0.22μM，同時也抑制PDGFR和c-Kit，對FLT3作用效果比CSF-1R強15到20倍，比FGFR、EGFR和KDR等強100倍以上。Phase 2。

信號通路

Angiogenesis; Protein Tyrosine Kinase

靶點

c-Kit

PDGFRβ

FLT3

CSF-1R

Src

IC50

0.17μM

0.20μM

0.22μM

3.43μM

30μM

體外研究

與Staurosporin不同，Tandutinib有效抑制FLT3、βPDGF和c-Kit自磷酸化，IC50為0.17-0.22μM，而作用于EGFR、FGFR、KDR、InsR、Src、Abl、PKC、PKA和MAPKs幾乎沒有效果。Tandutinib抑制不依賴IL-3的細胞生長，也抑制FLT3-ITD自磷酸化，IC50為10-100nM。Tandutinib也抑制含F(xiàn)LT3-ITD突變的人白血病Ba/F3細胞增殖，IC50為10-30nM，抑制FLT3-ITD-陽性的Molm-13和Molm-14細胞時，IC50為10nM。Tandutinib作用于FLT3-ITD陽性Molm-14細胞而不是FLT3-ITD陰性THP-1細胞，因為特定抑制FLT3，處理24和96小時，分別引起顯著凋亡達51%和78%。與作用于患Aml的ITD陰性患者相比，Tandutinib優(yōu)先抑制患Aml的FLT3 ITD陽性患者體內爆發(fā)式集落生長，而不影響正常人祖細胞形成集落。加入低納摩爾Tandutinib顯著降低Cytarabine或Daunorubicin的量，而Cytarabine或Daunorubicin是獲得抗增殖效果所必需的，說明Tandutinib和Cytarabine/Daunorubicin聯(lián)用大大增強協(xié)同作用。

體內研究

Tandutinib按60mg/kg劑量口服處理，每天兩次，顯著提高攜帶表達W51 FLT3-ITD突變型Ba/F3細胞的小鼠壽命，而作用于小鼠骨髓移植模型，顯著降低死亡率。Tandutinib按180mg/kg劑量每天處理兩次，對正常造血功能產生輕微毒性，Tandutinib作用于小鼠，可以有效治療FLT3 ITD-陽性的白血病。

臨床實驗

N/A

特征

N/A

酶活性檢測實驗

方法

PDGFR家族激酶的自磷酸化實驗是基于細胞的酶聯(lián)免疫檢測實驗，使用表達野生型βPDGFR，嵌合蛋白βPDGFR/c-Kit和βPDGFR/Flt3的CHO細胞，含有βPDGFR的跨膜結構域及c-Kit和Flt-3的胞漿域。細胞在96孔板上匯合，培養(yǎng)在標準組織培養(yǎng)基中，然后血清饑餓處理16小時。使用濃度不斷增加的Tandutinib處理靜態(tài)細胞30分鐘，然后加入8nM PDGF-BB處理10分鐘。細胞溶解在100mM Tris，pH 7.5、 750mM NaCl、0.5% Triton X-100、10mM焦磷酸鈉、50mM NaF、10μg/ml抑肽酶、10μg/ml亮肽素、1mM苯甲基磺酰氟、1mM釩酸鈉，在15000g轉速下離心5分鐘，清除裂解液。澄清的裂解液轉移到第二個孔板上，孔中事先用500ng/孔1B5B11 anti-β PDGFR mAb包被，然后在室溫下溫育2小時。使用結合buffer(0.3%明膠、25mM HEPES，pH 7.5、100mM NaCl、0.01% Tween-20)沖洗三次后，然后加入250ng/ml兔單克隆抗磷酸抗體，實驗板在37℃下溫育60分鐘。隨后,每孔使用結合buffer沖洗三次，再與1μg/ml辣根過氧化物酶標記的抗兔抗體在37℃下溫育60分鐘。孔中沖洗后，加入2,2'-聯(lián)氮-雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)，在650nM處檢測底物形成率。

細胞實驗

細胞系

Ba/F3、Molm-13、Molm-14、HL60、Aml193、KG-1、KG-1a、THP-1和RS4;11

濃度

溶于DMSO，終濃度為~30μM

處理時間

~7天

方法

使用濃度不斷增高的Tandutinib(0.004-30μM)處理細胞。細胞在組織培養(yǎng)基中生長3-7天，使用臺酚藍染色排除法測定細胞，然后計數(shù)。收集細胞，沖洗，然后懸浮在100μl含10mM HEPES (pH 7.4)，140mM NaCl和2.5mM CaCl₂的結合buffer中，每天一次。在細胞懸液中加入膜聯(lián)蛋白V-FITC(100ng)和碘化丙啶(250ng)，然后在室溫下溫育15分鐘。在FACSort流式細胞儀上染色后，立刻進行流式細胞儀技術，然后在488nM處測定激發(fā)光。在515nM和585nM處分別測定膜聯(lián)蛋白V-FITC和DNA碘化丙啶染色的熒光值。

動物實驗

動物模型

注射表達W51 FLT3-ITD突變型的Ba/F3細胞的雌性無胸腺裸鼠

配制

懸浮在溶于水溶液的0.5%甲基纖維素(MC)上

劑量

40-120mg/kg/day

給藥方式

口服飼喂

產品編號

產品名稱

包裝

SC1058-10mM

Tandutinib (FLT3抑制劑)

10mM×0.2ml

SC1058-5mg

Tandutinib (FLT3抑制劑)

5mg

SC1058-25mg

Tandutinib (FLT3抑制劑)

25mg

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說明書

1份