2×Taq PCR MasterMix
● 產(chǎn)品包裝:
目錄號
包裝
價格
2×MasterMix(不含染料)
RTC3103-02
500μl
60元
RTC3103-03
5×500μl
240元
2×MasterMix(含染料)
RTC3104-02
RTC3104-03
注:以50μl PCR反應體系為例,每次使用25μl 2×MasterMix,500μl可做20次 50μl PCR反應。
● 儲存條件: -20℃可長期保存;4℃穩(wěn)定貯存3個月。經(jīng)常使用時,一旦融化后請4℃貯存,盡量避免反復凍融。
● 產(chǎn)品簡介:
本產(chǎn)品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR反應的增強劑和優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑,濃度為2×。使用時,只需補加實驗所需的引物和模板后即可進行PCR反應,可限度的減少人為誤差,具有快速簡便、穩(wěn)定性好等優(yōu)點。適用于常規(guī)PCR反應、復雜模板(如GC含量高,有二級結構)的擴增以及大規(guī)模基因檢測。使用該產(chǎn)品得到的PCR擴增產(chǎn)物末端含有一個A堿基,可以直接用于TA克隆。
● 質量控制:
經(jīng)檢測無外源核酸酶活性;PCR方法檢測無宿主殘余基因組DNA;能有效地擴增人基因組中的單拷貝基因。
1. 冰浴中徹底融化2×MasterMix,混勻后Minispin將溶液收集到管底。
2. 按照下表在0.2ml PCR管中制備反應體系:
50μl反應體系
終濃度
2×MasterMix
25μl
1×
上游引物 10μM
1-5μl
0.2-0.8 μM
下游引物 10μM
模板
× μl
10pg-1μg
水
補至50μl
3. 快甩離心將反應液收集到管底。
4. PCR儀如果沒有熱蓋加熱的話,補加25μl礦物油。
5. PCR儀上執(zhí)行以下程序:
步驟
溫度
時間
循環(huán)數(shù)
初始變性
94℃
5 min
1
變性
30 sec
25-40*
退火
Tm-5℃*
延伸
72℃
1 min/kb
最后延伸
*注: PCR 反應條件視模板、引物等的結構條件不同而各異。在實際操作中需根據(jù)模板、目的片段的大小、堿基序列和引物的長短等具體情況,設定的反應條件(溫度、時間等)。
中科瑞泰(北京)生物科技有限公司
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