培養(yǎng)條件
培養(yǎng)基:DMEM/F12+10%FBS
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%
溫度:37℃
細(xì)胞描述
名稱:臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞(人源)
數(shù)目: 106/管
活力:>90%
代數(shù):p1-p3代
凍存:DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO
運輸:干冰運輸(1管)或者活細(xì)胞T-25一瓶
用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
細(xì)胞傳代方法
顯微鏡下觀察細(xì)胞,當(dāng)覆蓋80%底面積時,進(jìn)行細(xì)胞傳代。注意不要等到細(xì)胞覆蓋100%的時候才傳代,那樣細(xì)胞容易老化。
在生物安全柜或者超凈臺中,將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基倒到廢液缸中
用PBS或者生理鹽水洗一遍
加入1.5ml 0.25%含有EDTA的胰酶,在37℃培養(yǎng)箱中消化3-5分鐘
后取出細(xì)胞,加入5ml培養(yǎng)基,吹打均勻后,轉(zhuǎn)移到15ml離心管中,1000rpm 離心5分鐘
離心后,去掉上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,按照1:3的比例進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞復(fù)蘇方法
取出凍存管后,投入37℃水浴中,震蕩解凍2 min
酒精消毒管壁外側(cè)后,將其轉(zhuǎn)入超凈臺中,將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至離心管中,加入9 ml 37℃預(yù)熱的內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基重懸,將離心管離心(1000rpm,5 min)
棄去上清,再加入5ml 內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)入T-25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
關(guān)鍵字: 臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞
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