培養(yǎng)條件
培養(yǎng)基:DMEM/F12+10%FBS
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%
溫度:37℃
細(xì)胞描述
名稱:人外周血自然殺傷細(xì)胞
數(shù)目:大于106 /管
活力:>90%
檢測(cè):細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
凍存:DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO
運(yùn)輸:干冰運(yùn)輸(1管)或者活細(xì)胞一瓶
用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
細(xì)胞傳代方法
細(xì)胞收集到離心管中進(jìn)行離心,1200轉(zhuǎn)/分,離心5分鐘后收集細(xì)胞,使用5ml自然殺傷細(xì)胞培養(yǎng)基懸浮,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)
調(diào)整細(xì)胞濃度為0.5-1x106/ml,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)
培養(yǎng)中使用的自然殺傷細(xì)胞培養(yǎng)基是我公司經(jīng)過優(yōu)化的產(chǎn)品
細(xì)胞復(fù)蘇方法
細(xì)胞在收到后,如果不是立刻進(jìn)行實(shí)驗(yàn),轉(zhuǎn)移到液氮中保存。如果立刻實(shí)驗(yàn),細(xì)胞在37℃水浴迅速解凍,在3分鐘內(nèi)完成。
超凈臺(tái)中準(zhǔn)備15ml離心管一支,裝入10ml培養(yǎng)基,然后用移液器將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中,輕輕吹打均勻。
1200轉(zhuǎn)/分,離心5分鐘后收集細(xì)胞,使用5ml自然殺傷細(xì)胞培養(yǎng)基懸浮,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)。
關(guān)鍵字: 人自然殺傷細(xì)胞-外周血
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