培養(yǎng)條件
培養(yǎng)基:內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%
溫度:37℃
細胞描述
本公司培養(yǎng)出品的小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞取自SPF 級的4-6周齡的C57小鼠大腦皮層,用內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基進行原代培養(yǎng)和傳代。
名稱:C57小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞
數(shù)目: 106/管
活力:>90%
代數(shù):p1-p3代
凍存:DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO
運輸:干冰運輸(1管)或者活細胞T-25一瓶
用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
細胞傳代方法
顯微鏡下觀察細胞,當覆蓋80%底面積時,進行細胞傳代。注意不要等到細胞覆蓋100%的時候才傳代,那樣細胞容易老化。
在生物安全柜或者超凈臺中,將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基倒到廢液缸中
用PBS或者生理鹽水洗一遍
加入1.5ml 0.25%含有EDTA的胰酶,在37℃培養(yǎng)箱中消化3-5分鐘
然后取出細胞,加入5ml培養(yǎng)基,吹打均勻后,轉(zhuǎn)移到15ml離心管中,1000rpm 離心5分鐘
離心后,去掉上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細胞,按照1:3的比例進行細胞傳代培養(yǎng)。
細胞復(fù)蘇方法
1取出凍存管后,投入37℃水浴中,震蕩解凍2 min,
酒精消毒管壁外側(cè)后,將其轉(zhuǎn)入超凈臺中,將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至離心管中,加入9 ml 37℃預(yù)熱的內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基重懸,將離心管離心(1000rpm,5 min)棄去上清,再加入5ml 內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)入T-25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
關(guān)鍵字: 小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞
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