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EHA105(pSoup)感受態(tài)細(xì)胞
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EHA105(pSoup)感受態(tài)細(xì)胞

價(jià)格 詢價(jià)
包裝 100 ul
最小起訂量 100 ul
發(fā)貨地 上海
更新日期 2024-12-25

產(chǎn)品詳情

中文名稱:EHA105(pSoup)感受態(tài)細(xì)胞產(chǎn)品類別: 基因 感受態(tài)細(xì)胞
2024-12-25 EHA105(pSoup)感受態(tài)細(xì)胞 100 ul /RMB 基因 感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品規(guī)格 (CAT#: LM1010)

EHA105 Elec:                                                            50μl/支
pCAMBIA2301(control vector,10ng/μl )                    10μl
保存條件(保質(zhì)期):                                         -80℃(12個(gè)月)

 

EHA105 Electro感受態(tài)細(xì)胞基因型
C58 (rifR) Ti pEHA105 (pTiBo542DT-DNA) Succinamopine

 

EHA105 Electro感受態(tài)細(xì)胞產(chǎn)品說明

EHA105菌株由EHA101菌株改造而來,為C58型背景,核基因中含有篩選標(biāo)簽——利福平抗性基因rif,為了便于轉(zhuǎn)化操作,此菌株攜帶一無自身轉(zhuǎn)運(yùn)功能的琥珀堿型Ti質(zhì)粒pEHA105 (pTiBo542DT-DNA),此質(zhì)粒含有vir基因 (vir基因是T-DNA插入植物基因組必需的元件,pEHA105 (pTiBo542DT-DNA)質(zhì)粒自身的T-DNA轉(zhuǎn)移功能被破壞,但可以幫助轉(zhuǎn)入的雙元載體T-DNA順利轉(zhuǎn)移)。EHA105菌株適用于水稻、煙草等植物的轉(zhuǎn)基因操作。唯地生物開發(fā)的EHA105電轉(zhuǎn)感受態(tài)特別適用于大質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化:經(jīng)pCAMBIA2301質(zhì)粒 (size:11633 bp)檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>10cfu/μg DNA;經(jīng)pCAMBIA2301-ZH質(zhì)粒(size:40 kd)檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率可達(dá)5×10cfu/μg DNA。

 

 

EHA105 Electro感受態(tài)細(xì)胞操作方法

1. 0.1 cm電擊杯和杯蓋從儲(chǔ)存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上5分鐘,待其瀝干水分,正置5分鐘,使乙醇充分揮發(fā),待乙醇揮發(fā)干凈立即插入冰中,壓實(shí)冰面,電極杯頂離冰面0.5 cm以方便蓋上杯蓋,冰中靜置5分鐘充分降溫。

2. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)插入冰中5分鐘,待其融化,加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(體積不大于6ul,感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率較高,次使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定所加質(zhì)粒的量),用手撥打管底混勻,立即插入冰中,用200 μl槍頭將感受態(tài)-質(zhì)粒混合物快速移到電擊杯中,蓋上杯蓋,空管保留待用。

3. 啟動(dòng)電轉(zhuǎn)儀,設(shè)置參數(shù):C=25 μF,PC=200 ohm,V=2400 V(此參數(shù)為Biorad 推薦,使用者也可按所用電轉(zhuǎn)儀推薦的protocol操作),將電擊杯快速放入電轉(zhuǎn)槽中,電擊完成快速插入冰中,加入700 μl無抗生素的LB并轉(zhuǎn)移到感受態(tài)空管中,28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時(shí)。

4. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天

(當(dāng)平板只含有50 μg/ml kan 時(shí),28℃培養(yǎng)48 h即可;平板中同時(shí)加入50 μg/ml kan,20 μg/ml rif 時(shí),需28℃培養(yǎng)60 h;如果使用的平板含有50 μg/ml rif 則需要28℃培養(yǎng)72-90 h)。

 

備注

1、農(nóng)桿菌相關(guān)抗生素配方:

抗生素

配方

原液

工作液

羧芐青霉素(carb)

雙蒸水溶解,0.22 μm濾膜過濾除菌

50 mg/ml

50 μg/ml

硫酸卡那霉素(kan)

雙蒸水溶解,0.22 μm濾膜過濾除菌

50 mg/ml

50 μg/ml

鏈霉素(strep)

雙蒸水溶解,0.22 μm濾膜過濾除菌

10 mg/ml

50 μg/ml

利福平(rif)

DMSO溶解,0.22 μm濾膜過濾除菌

10 mg/ml

20 μg/ml

慶大霉素(gent)

雙蒸水溶解,0.22 μm濾膜過濾除菌

20 mg/ml

40 μg/ml

關(guān)鍵字: EHA105(pSoup)_感受態(tài)細(xì)胞_基因_

公司簡(jiǎn)介

上海聯(lián)邁生物工程有限公司(LMAI Bio)是一家經(jīng)營(yíng)生物、儀器、試劑、耗材等科研產(chǎn)品的高新技術(shù)生命科學(xué)公司,在廣大用戶的幫助和支持下,經(jīng)過不懈的努力, 已成為國(guó)內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的一家供應(yīng)商,代理許多國(guó)際先進(jìn)水平的高科技產(chǎn)品,包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、診 斷等多個(gè)研究及應(yīng)用領(lǐng)域。 公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國(guó),在同行獲得一致好評(píng)。 特別是生物試劑和細(xì)胞產(chǎn)品更是種類齊全、價(jià)格實(shí)惠,美國(guó)原裝進(jìn)口原代細(xì)胞,專業(yè)培養(yǎng)基,常用傳統(tǒng)培養(yǎng)基,細(xì)胞培養(yǎng)用的相關(guān)試劑,氨基酸,抗生素,維他命類產(chǎn)品品種齊全,試劑耗材種類繁多。 公司的規(guī)模和產(chǎn)品種類日益擴(kuò)大和更新,我們一直秉承著代理優(yōu)質(zhì)品牌的產(chǎn)品,服務(wù)好每一位顧客,將
成立日期 2017-09-26 (8年) 注冊(cè)資本 100.000000萬人民幣
員工人數(shù) 50-100人 年?duì)I業(yè)額 ¥ 300萬-500萬
主營(yíng)行業(yè) 生化試劑,細(xì)胞培養(yǎng),蛋白組學(xué),分子生物學(xué),細(xì)胞生物學(xué) 經(jīng)營(yíng)模式 貿(mào)易,工廠,試劑,定制,服務(wù)
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非會(huì)員
  • 公司成立:8年
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  • 主營(yíng)產(chǎn)品:技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓,儀器儀表、機(jī)電設(shè)備、機(jī)械設(shè)備、玻璃制品、電子產(chǎn)品、一類醫(yī)療器械
  • 公司地址:上海 上海市松江區(qū)新車公路185號(hào)上海莘莘學(xué)子創(chuàng)業(yè)園
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