????????超氧化物檢測(cè)試劑盒(Superoxide Assay Kit)是一種用于超氧化物快速高靈敏度檢測(cè)的試劑盒。
??????本試劑盒利用超氧化物可以還原WST-1產(chǎn)生可溶性有色物質(zhì)為基礎(chǔ)來(lái)檢測(cè)超氧化物。本試劑盒的檢測(cè)試劑中添加了Catalase(觸酶)等，可以清除過(guò)氧化氫等過(guò)氧化物對(duì)WST-1顯色的干擾，使測(cè)定結(jié)果更加準(zhǔn)確。并且本試劑盒還提供SOD(超氧化物歧化酶)，可以驗(yàn)證本試劑盒測(cè)定出的結(jié)果是否為超氧化物，以排除檢測(cè)體系中所用的一些試劑可能產(chǎn)生的干擾。對(duì)于本試劑盒，加入SOD后通常可以抑制90%以上的超氧化物。
??????WST-1是一種類似于MTT的化合物，可以被超氧化物還原生成橙色的formazan。超氧化物產(chǎn)生越多越快，則顏色越深，即相應(yīng)測(cè)定得到的吸光度值越大。
??????使用WST-1作為檢測(cè)試劑比用傳統(tǒng)的細(xì)胞色素c(cytochrome?c)檢測(cè)超氧化物具有多方面的優(yōu)點(diǎn)。首先，WST-1本身的吸光度非常低(通常OD450為0.02左右，因儀器和酶標(biāo)板不同而有所不同)，而細(xì)胞色素c本身的吸光度非常高(通常OD550為0.5左右)，因此，使用WST-1與細(xì)胞色素c相比，檢測(cè)靈敏度高很多倍。其次，WST-1的還原產(chǎn)物是穩(wěn)定的可溶性產(chǎn)物，且對(duì)細(xì)胞基本無(wú)毒性，使WST-1方法更加適合于高通量的篩選。另外，細(xì)胞色素c法由于靈敏度的限制，一般不適合用96孔板測(cè)定，而WST-1法可以用96孔板測(cè)定，使檢測(cè)更加便捷。用WST-1法或細(xì)胞色素c法對(duì)超氧化物測(cè)定效果比較參考圖1。圖1中，50萬(wàn)/毫升嗜中性粒細(xì)胞在37℃用PMA刺激指定時(shí)間，用WST-1或細(xì)胞色素c方法分別測(cè)定。WST-1法測(cè)定OD450，而細(xì)胞色素c法測(cè)定OD550。另外，WST-1法和luminol法相比，靈敏度相近，但僅須使用普通的酶標(biāo)儀，無(wú)須使用luminol法所需的luminometer，并且檢測(cè)速度也比luminol法更加快捷。
??????超氧化物通常指超氧化物陰離子(superoxide?anion)O₂^.-，是一種氧分子的自由基。在呼吸鏈中，NADPH氧化酶把電子傳遞給氧分子的時(shí)候，就會(huì)產(chǎn)生超氧化物陰離子O₂^.-。超氧化物陰離子O₂^.-是一種強(qiáng)氧化劑，可以由被刺激的白細(xì)胞等產(chǎn)生，從而抵御微生物的感染等。超氧化物陰離子O₂^.-也可以導(dǎo)致氧化損傷，和許多疾病的發(fā)生密切相關(guān)。
??????本試劑盒可以測(cè)定100個(gè)樣品。

圖1. WST-1法和細(xì)胞色素c法對(duì)于超氧化物測(cè)定效果的比較。

包裝清單：

保存條件：
??????-20℃保存，一年有效。
注意事項(xiàng)：
??????WST-1溶液、Catalase溶液和SOD溶液均宜盡量避免反復(fù)凍融，可以適當(dāng)分裝。
? ? ? 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。?