??????谷胱甘肽還原酶檢測試劑盒(Glutathione Reductase Assay Kit)是一種簡單易行的通過紫外比色來檢測細胞、組織或其它樣品中谷胱甘肽還原酶(Glutathione reductase,GR)活性的試劑盒。谷胱甘肽還原酶在許多組織中都有分布,可以維持細胞內充足的還原型谷胱甘肽(GSH)水平。GSH可以清除自由基和一些有機過氧化物,或作為谷胱甘肽氧化酶(Glutathione peroxidase)的底物來清除一些過氧化物。 ??????谷胱甘肽還原酶可以還原氧化型谷胱甘肽(GSSG)生成還原型谷胱甘肽(GSH),而GSH可以和生色底物DTNB反應產生黃色的TNB和GSSG,并可以通過測定A412來檢測TNB的生成量。適當設置應體系,前后兩個反應合并起來后,GSSG/GSH過量而GR相對不足時,該反應體系中谷胱甘肽還原酶就成為整個反應體系的限速因素,此時黃色的TNB生成量和谷胱甘肽還原酶的活性呈線性正相關。從而通過測定A412就可以計算出谷胱甘肽還原酶的活性水平。本試劑盒的具體反應原理如下:
??????兩個反應相合并: ??????本試劑盒可以檢測組織勻漿液上清、細胞裂解液上清等生物樣品中的谷胱甘肽還原酶的活性。一個試劑盒共可以進行100次檢測。 包裝清單:
保存條件: ??????-20℃保存,一年有效。NADPH溶解后宜-70℃保存,4℃可以保存一天,-20℃保存一周后NADPH會減少10%以上。GSSG和DTNB在配制成溶液后,適當分裝,-20℃保存。 注意事項: ??????本試劑盒檢測時牽涉到氧化還原反應,所有氧化劑或還原劑都會干擾本試劑盒的測定。另外,硫酸鈉、硫酸銨和鐵氰化物都會干擾本試劑盒的測定。請盡量避免。 ??????樣品可以立即測定,也可以-70℃凍存待以后測定。 ??????一定要嚴格控制反應時的溫度,否則會引起較多誤差。 ??????NADPH不太穩(wěn)定,要嚴格按照后續(xù)說明操作,謹防失活。 ??????本產品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。 ??????為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。?
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