定量蛋白質(zhì)組學(xué)方法也可以用label-free的方法,即非標(biāo)記法。非標(biāo)記蛋白質(zhì)組定量質(zhì)譜檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)就是樣品上機(jī)前,不需要特殊標(biāo)記操作,操作非常方便,也節(jié)省了標(biāo)記試劑的費(fèi)用。結(jié)合使用Maxquant軟件進(jìn)行分析,可以做到定量檢測(cè)。Maxquant軟件非標(biāo)記定量分析是以MS1為基礎(chǔ),實(shí)驗(yàn)證明結(jié)合Maxquant軟件分析的非標(biāo)記技術(shù)具有較好的定量準(zhǔn)確性和可靠性。可以利用無(wú)標(biāo)記蛋白質(zhì)組學(xué)方法對(duì)各類(lèi)復(fù)雜樣本提取蛋白及co-IP、Pull-down等中等復(fù)雜樣本進(jìn)行蛋白鑒定與定量。對(duì)于復(fù)雜樣本蛋白鑒定數(shù)量通常在1千個(gè)以上。
◆ 蛋白質(zhì)組學(xué)非標(biāo)記定量分析的特點(diǎn) 1. 對(duì)液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜的穩(wěn)定性和重復(fù)性要求較高 2. 無(wú)需昂貴的標(biāo)記試劑 3. 對(duì)樣本的數(shù)量無(wú)限制,克服了標(biāo)記定量技術(shù)在對(duì)多個(gè)樣本進(jìn)行定量方面的缺陷 質(zhì)譜鑒定實(shí)驗(yàn)流程(溶液內(nèi)酶解)
使用儀器 Thermo Scientific Q Exactive, Q Exactive HF
技術(shù)優(yōu)勢(shì) 復(fù)雜樣本蛋白和中度復(fù)雜蛋白樣本均可以,如各類(lèi)樣本提取蛋白或相互作用的蛋白質(zhì)洗脫液; 高準(zhǔn)確性, 高靈敏度。 實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容 1、差異蛋白結(jié)果(excel 列表);差異蛋白歸類(lèi)(GO和KEGG分析)。 2、完整的實(shí)驗(yàn)步驟、使用儀器、試劑來(lái)源、軟件檢索參數(shù)等。
樣品要求
實(shí)驗(yàn)樣本預(yù)處理及運(yùn)輸注意事項(xiàng) 為保證高質(zhì)量的技術(shù)服務(wù)結(jié)果,請(qǐng)您參照以下說(shuō)明對(duì)實(shí)驗(yàn)樣本進(jìn)行處理和保存: ⊙蛋白質(zhì)溶液:定量并計(jì)算總蛋白量,密封好管口,干冰包裝寄送。
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