100次616.00元細胞衰老β-半乳糖苷酶染色試劑盒(Senescenceβ-" />
??????細胞衰老β-半乳糖苷酶染色試劑盒(Senescence β-Galactosidase Staining Kit)是一種基于衰老時衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶(senescence-associated β-galactosidase; SA-β-Gal)活性水平上調(diào)而對衰老細胞或組織進行染色檢測的試劑盒。在普通的光學(xué)顯微鏡下就可以觀測到細胞或組織的衰老情況。本試劑盒可以用于培養(yǎng)細胞的衰老檢測,也可以用于組織切片的衰老檢測。 ??????絕大多數(shù)正常細胞被認為僅有有限的分裂能力,在不能分裂后就進入衰老(senescence)狀態(tài)。此時細胞仍然是存活的,但細胞的基因和蛋白的表達譜發(fā)生了很大改變。衰老的細胞不能在一些常規(guī)的刺激下再誘導(dǎo)細胞分裂,并且衰老細胞的細胞周期分布也比較特殊,不同于一些損傷誘導(dǎo)的細胞休眠,也不同于細胞生長接觸抑制的情況。衰老細胞通常體積變大,并表達在pH6.0時有高酶活性的β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)。細胞衰老也被認為是生物體抑制腫瘤的一種方式,同時也是生物體老化(aging)的一種潛在原因。 ??????碧云天生產(chǎn)的細胞衰老β-半乳糖苷酶染色試劑盒,以X-Gal為底物,在衰老特異性的β-半乳糖苷酶催化下會生成深藍色產(chǎn)物。從而在光學(xué)顯微鏡下很容易觀察到變成藍色的表達β-半乳糖苷酶的細胞或組織。本產(chǎn)品染色的染色效果請參考圖1。
圖1. 正常細胞和衰老細胞用細胞衰老β-半乳糖苷酶染色試劑盒染色后的示例圖片。
??????本試劑盒僅染色衰老細胞,不會染色衰老前的細胞(presenescent cells)、靜止期細胞(quiescent cells)、永生細胞 (immortal cells)或腫瘤細胞。 ??????主要特點:本試劑盒經(jīng)過多方面的優(yōu)化,是同類產(chǎn)品中首創(chuàng)的能兼容普通的細胞培養(yǎng)用多孔板、移液管等聚苯乙烯類材質(zhì)耗材或容器的試劑盒。本試劑盒可以有效避免由于和多孔板、移液管等的不兼容導(dǎo)致的染色偏弱、染色效果不穩(wěn)定等情況。通常同類試劑盒要求使用可高溫高壓滅菌的聚丙烯(polypropylene)材質(zhì)的耗材、容器或玻璃容器進行溶液的配制,而不能使用普通的多孔板、移液管等聚苯乙烯(polystyrene)類材質(zhì)的容器或耗材,否則可能會出現(xiàn)絮狀沉淀,影響實驗觀察。即使嚴格按照要求操作,也會在染色時間比較長的情況下,容易出現(xiàn)絮狀物沉淀(參考圖2)。本試劑盒經(jīng)過多方面的優(yōu)化,對耗材或容器的材質(zhì)無特殊要求,可以兼容普通的多孔板和移液管等常用耗材和容器。而且配制的工作液不會產(chǎn)生沉淀或不溶物,使用更加便捷。
??????圖2. 本試劑盒優(yōu)化前后的對比圖。優(yōu)化前,X-Gal溶液直接接觸聚苯乙烯類材質(zhì)的材料如移液管、多孔板等會產(chǎn)生明顯的腐蝕(A圖),使用聚苯乙烯容器配制染色工作液后,在顯微鏡下觀察有異常的絮狀不溶物(C圖);優(yōu)化后,X-Gal溶液直接接觸聚苯乙烯類材質(zhì)的材料觀察不到有任何異常情況(B圖),使用聚苯乙烯容器配制染色工作液后,在顯微鏡下觀察也沒有任何異常情況(D圖)。
??????如果使用6孔板檢測,足夠測定100個樣品;使用24孔板測定,足夠測定400個樣品;使用96孔板測定,足夠測定1000個樣品。對于組織切片或組織塊,可以檢測的樣品數(shù)量視樣品的大小而定。對于普通切片的滴染足夠檢測100個樣品。 包裝清單:
保存條件: ??????-20℃保存,一年有效。其中X-Gal溶液需避光保存。 注意事項: ??????β-半乳糖苷酶染色固定液對人體有毒、有腐蝕性,操作時請?zhí)貏e小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。 ??????X-Gal溶液在-20℃或4℃保存會凍結(jié),室溫或37℃水浴2-5分鐘并適當(dāng)搖動即可完全融解。 ??????細胞衰老β-半乳糖苷酶染色反應(yīng)依賴于特定的pH條件,不能在二氧化碳培養(yǎng)箱中進行染色反應(yīng)。用于細胞培養(yǎng)的二氧化碳培養(yǎng)箱中較高濃度的二氧化碳會影響染色工作液的pH值,而導(dǎo)致染色失敗。 ??????試劑解凍后或使用前如果有沉淀,必須在使用前確保沉淀全部溶解。β-半乳糖苷酶染色液B剛從試劑盒中取出時,管底可能存在少量沉淀,屬正?,F(xiàn)象,充分混勻或Vortex后,沉淀會全部溶解,并須確保在全部溶解后使用。配制染色工作液時,也可能有少量絮狀沉淀出現(xiàn),震蕩混勻后就會完全溶解,且須確保全部溶解后才能使用。 ??????使用96孔板等多孔板進行檢測時,如果孵育過夜容易產(chǎn)生所謂的“邊緣效應(yīng)”(edge effect),即多孔板四周的孔由于和外界最直接接觸,易受外界環(huán)境影響,其中最明顯的是四周細胞培養(yǎng)孔的蒸發(fā)效應(yīng)。邊緣效應(yīng)會導(dǎo)致細胞生長不均勻、細胞分布不均一、培養(yǎng)液體積不一致、培養(yǎng)液中相關(guān)成分的濃度、pH值不一致。建議采取以下方法避免96孔板等多孔板的邊緣效應(yīng):避免孵育過長時間,以避免蒸發(fā)等帶來的邊緣效應(yīng);棄用邊緣孔并在棄用的邊緣孔中加入等量的水、PBS或其他適當(dāng)溶液;在多孔板非孔的凹陷處加入適量的水或其他適當(dāng)溶液;將整塊板放在濕盒中;使用防揮發(fā)蓋;在實驗設(shè)計時,實驗樣品進行隨機分配,不要將某一組樣品固定放在某個位置而引入可能的系統(tǒng)性誤差。 ??????需自備PBS或HBSS(Hanks Balanced Salt Solution)。 ??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 ?
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