??????碧云天生產(chǎn)的中性紅細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(Neutral Red Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)是一種基于細(xì)胞對于中性紅的攝入能力來檢測細(xì)胞增殖或細(xì)胞毒性的試劑盒。 ??????細(xì)胞對中性紅的攝入取決于細(xì)胞對pH梯度的維持能力,而這種能力是通過產(chǎn)生ATP來維持的。在生理pH條件下,中性紅染料的凈電荷幾乎為零,從而使其能通過非離子被動擴(kuò)散的方式穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞。溶酶體(lysosomes)中的質(zhì)子梯度使溶酶體中的pH值低于細(xì)胞質(zhì),從而可以使中性紅帶上電荷并在溶酶體中積累。在細(xì)胞增殖加快時,細(xì)胞數(shù)量增多,可以攝入的中性紅的量就會增加。在細(xì)胞受到損傷時,中性紅的攝入能力會下降。經(jīng)過一定時間攝入后,細(xì)胞經(jīng)清洗并用裂解液裂解即可釋放中性紅而用于檢測。這樣通過測定細(xì)胞對于中性紅的攝入量,就可以確定細(xì)胞的增殖或毒性情況。 ??????中性紅同時也是一種pH指示劑,在酸性時呈紅色,在pH6.8升至pH8.0時由紅色逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。對于活細(xì)胞,中性紅積累在溶酶體中,而溶酶體中是酸性環(huán)境,因此溶酶體被中性紅染成紅色。本產(chǎn)品中的中性紅染色液對正常培養(yǎng)的L929細(xì)胞的染色效果參考圖1。
圖1. 正常培養(yǎng)的L929細(xì)胞加入中性紅染色液后的染色效果。
??????中性紅的分子式為C15H17IN4,分子量為288.8,CAS Number為553-24-2。 ??????本試劑盒可以用于檢測500個樣品。 包裝清單:
保存條件: ??????-20℃保存,一年有效。中性紅染色液需避光保存。 注意事項: ??????需準(zhǔn)備一臺可以測定A540的酶標(biāo)儀或微量分光光度計。 ??????次使用本試劑盒時建議先取少量樣品做好預(yù)實驗。 ? ? ? 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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