V8蛋白酶
Cat.No.：66676-43-5
EC：3.4.21.19
全名: 序列分析純V8蛋白酶；金黃色葡萄球菌V8蛋白酶
別名: V8蛋白酶；谷氨酰胺內(nèi)切酶；天冬酰胺內(nèi)切酶
儲存條件：凍干粉，2-8℃
來源：基因工程生產(chǎn)，大腸桿菌表達。
1.產(chǎn)品簡介
V8蛋白酶屬于絲氨酸蛋白酶家族，能特異水解谷氨酸或天冬氨酸殘基羧基側(cè)肽鍵。在pH 7.8的NH4HCO3和pH 4.0的CH3COONH4緩沖液中識別并切割Glu羧基端肽鍵，在pH 7.8的磷酸鹽緩沖液中識別并切割Glu或Asp羧基端肽鍵，且對Glu的水解速率高于Asp。V8蛋白酶在pH4.0-10.0之間均有活性，最適pH為8.0-8.5。在進行蛋白質(zhì)酶切測序、肽圖譜分析和肽質(zhì)量指紋圖譜分析中使用時，可以單獨使用或與其他蛋白酶混合使用。V8蛋白酶的抑制劑有二異丙基氟磷酸（DFP）、α2- 巨球蛋白和Nα-P-甲苯磺酰基-L-賴氨酸氯甲基酮（TLCK）。
2.產(chǎn)品特性
單位定義：在25℃，pH7.8的條件下，每分鐘催化底物（Z-Phe-Leu-Glu-4-nitranilide）生成1μmol對硝基苯胺（4-nitroaniline）所需要的酶量為一個酶活性單位。
3.儲存和運輸穩(wěn)定性
儲存穩(wěn)定性：重組V8蛋白酶凍干粉存于2-8℃，24個月穩(wěn)定；
溶解后穩(wěn)定性：用水或50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于-20℃ 以下（1mg/ml），6個月穩(wěn)定；用水或50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于4℃（1mg/ml，無菌），2個月穩(wěn)定；用50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于25℃或37℃（0.5mg/ml）12h，活性可維持85%以上；溶解后溶液可反復(fù)凍融10次無活性損失。
運輸穩(wěn)定性：藍冰保溫運輸，活性穩(wěn)定。
4.推薦使用方法
1）使用前注意
可按使用量分裝以限度避免污染或自切。
2）目的蛋白溶解
用酶切buffer溶解目的蛋白，例如25-50mM NH4HCO3 pH7.8，若溶解度不好對目的蛋白變性，添加尿素、SDS、DTT或加熱。尿素和SDS對V8蛋白酶的影響見表一。
3）酶切
V8蛋白酶和目的蛋白推薦比例為1/20-1/100（W/W)，25℃或37℃酶切2-18h。
表一：V8蛋白酶在含有不同濃度變性劑，尿素25℃2h，SDS25℃12h的穩(wěn)定性
（注：V8蛋白酶0.5mg/ml，50mM Tris-HCl pH8.0）
5.產(chǎn)品優(yōu)勢
序列分析純蛋白酶：特異性高，穩(wěn)定性好。
無動物源性：重組生產(chǎn)，無外源性的病毒污染，生產(chǎn)過程不使用任何動物源原料。
質(zhì)量穩(wěn)定：批量生產(chǎn)，可保證穩(wěn)定連續(xù)的批次生產(chǎn)；產(chǎn) 品批次間無差異，質(zhì)量穩(wěn)定。
純度高：比活高；宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求。
凍干粉：易于儲存和
關(guān)鍵字： V8 Protease，V8 蛋白酶，Glu-C
上海雅心生物技術(shù)有限公司主要從事基因工程蛋白酶的研發(fā)和生產(chǎn)，目前的主要品種為基因工程羧肽酶B、基因工程胰蛋白酶和基因工程脂肪酶A；為本公司自主研發(fā)，擁有自主知識產(chǎn)權(quán)。公司擁有自組研發(fā)團隊，擁有世界先進的重組生物技術(shù)；自主研發(fā)的重組生物用酶為世界上生物用酶的首創(chuàng)！
基因工程羧肽酶B，基因工程胰蛋白酶和基因工程脂肪酶A都是由基因工程方法生產(chǎn)，純度高，不含雜酶，無羧肽酶A、糜蛋白酶等其他蛋白酶活性；無動物源性，出口產(chǎn)品無需進行終產(chǎn)品的動物源性檢驗。制品中不含蛋白酶抑制劑，產(chǎn)品安全。
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產(chǎn)品經(jīng)多