索萊寶生產的胰蛋白酶-EDTA消化液(Trypsin-EDTA Solution)含 0.25%胰酶和 0.02%EDTA(0.53mM),溶于無鈣鎂平衡鹽溶液中,經過濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細胞和組織的消化。本產品具有方便快速、穩(wěn)定安全、細胞狀態(tài)好等特點。
產品說明:
在組織細胞的體外培養(yǎng)和原代細胞培養(yǎng)中的組織細胞分散(將組織塊制備成單個細胞懸液)以及傳代細胞培養(yǎng)中,貼壁生長細胞的消化分散均要使用組織細胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶,EDTA等,其功能主要是使細胞間的蛋白質(如細胞外基質)水解,使組織或貼壁細胞分散成單個細胞,制成細胞懸液用于進一步的實驗。
保存:-20℃保存,有效期12個月。
使用方法:
1. 貼壁細胞的消化:
a) 吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
b) 加入少量胰蛋白酶消化液,蓋過細胞即可,室溫放置1-2分鐘。不同的細胞消化時間有所不同,對于貼壁牢固的細胞可適當延長消化時間。
c) 顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用槍吹打細胞發(fā)現細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除消化液。加入含血清的細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
d) 如果發(fā)現消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。
e) 如果發(fā)現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2. 組織的消化:
不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
注意事項:
1.由于組織或細胞性質不同,實驗人員應依據具體情況,確定消化時間;消化細胞時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁和生長狀況;
2.本產品不含抑菌劑,在使用過程中要特別注意無菌操作,避免消化液被微生物污染;
3.不宜4℃長期保存,切忌反復凍融,小量使用時建議分裝凍存;
4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
關鍵字: 胰酶 胰蛋白酶
北京索萊寶科技有限公司是一家集研發(fā)、生產、銷售、服務于一體的高科技生物企業(yè)。技術推廣;技術轉讓;技術咨詢;技術服務;生物試劑技術開發(fā);銷售生物試劑盒、實驗室專用化學試劑、實驗室專用設備、辦公用品、化工產品(不含危險化學品)、計算機軟件及輔助設備;貨物進出口、技術進出口、代理進出口;委托加工生產生物制品、生化制品、化工產品(不含危險化學品);生產生物試劑盒;批發(fā)第一類醫(yī)療器械、第二類醫(yī)療器械;批發(fā)第三類醫(yī)療器械。