概述
Bradford試劑蛋白定量是一種快速、即用型的總蛋白光學(xué)定量方法。在酸性條件下,考馬斯亮藍G-250染料與蛋白質(zhì)疏水區(qū)結(jié)合,導(dǎo)致吸收峰由465 nm變?yōu)?95 nm,同時顏色也由棕色變?yōu)樗{色,該藍色化合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度的高低成正比關(guān)系。將蛋白質(zhì)樣品或稀釋的BSA與Bradford試劑混合,測量在595 nm處的吸收值,在由一系列稀釋的BSA建立的標準曲線的情況下,蛋白質(zhì)的濃度可以根據(jù)標準曲線而確定。
特點
檢測速度快,10~20個樣品只需不足10 min即可完成; 靈敏度高,最小檢測蛋白量達到0.2 ug,待測樣品體積為1~20 ul; 在10~150 ug/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系; 與還原性糖和還原性巰基試劑兼容; 可以采用分光光度法或酶標板法對蛋白進行定量。
應(yīng)用
用于蛋白定量測試
組份
Bradford試劑;BSA蛋白質(zhì)標準液(5 mg/ml);1X PBS
生工生物工程(上海)股份有限公司
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