Canagliflozin是一種高效的，選擇性SGLT2抑制劑，作用于hSGLT2，無(wú)細(xì)胞試驗(yàn)中IC50為2.2 nM，比作用于hSGLT1選擇性高413倍。

靶點(diǎn)

體外研究

Canagliflozin 是新型C-葡萄糖苷，具有噻吩環(huán)。Canagliflozin 抑制 Na+依賴性的14C-AMG 吸收，這種作用存在濃度依賴性。Canagliflozin作用于 CHO-hSGLT1 和mSGLT1 細(xì)胞，抑制 14C-AMG 吸收，IC50 分別為 0.7 μM 和 >1 μM。Canagliflozin作用于 L6成肌細(xì)胞，抑制 50%以下 (非-Na+-關(guān)聯(lián)的) GLUT調(diào)節(jié)的2H-2-DG吸收。在50 µM DNJ存在時(shí)，Canagliflozin (10 µM) 或phlorizin (3 mM) 單獨(dú)作用于注射空白對(duì)照的卵母細(xì)胞，不影響電流。DMSO 和 Canagliflozin 10 µM 作用于注射SGLT3-的卵母細(xì)胞，抑制DNJ誘導(dǎo)的電流，分別抑制 15.6% 和 23.4%。

體內(nèi)研究

Canagliflozin 處理高脂肪飼料飼喂的KK(HF-KK)小鼠，具有顯著的抗高血糖效果。Canagliflozin 按30 mg/kg劑量口服處理給藥雄性SD大鼠，誘導(dǎo)葡萄糖外排，處理24小時(shí)，每 200 g 體重外排3,696 mg 糖。藥代動(dòng)力學(xué)研究顯示Canagliflozin 口服處理藥效更高。Canagliflozin 按3和 10 mg/kg劑量分別靜脈注射和口服處理給藥雄性SD 大鼠, 測(cè)定AUC0−inf, po, t1/2 和生物有效性分別為 35,980 ng·h/mL, 5.2 小時(shí),和 85%。Canagliflozin口服處理，抑制腎小管中的SGLT2，很可能是因?yàn)槌掷m(xù)抑制葡萄糖的重吸收。廣泛的UGE可反映 Canagliflozin 在體內(nèi)優(yōu)秀的藥代動(dòng)力學(xué)特性，及對(duì)SGLT2的高效抑制。由于大部分過(guò)濾的葡糖糖在腎小管中被SGLT2 重吸收，所以新型化合物將是很有效的抗糖尿病試劑。Canagliflozin 按3 mg/kg 劑量單獨(dú)口服處理高糖高脂肪飼料喂養(yǎng)的KK(HF-KK)小鼠，顯著降低血糖水平，不影響食物吸收。處理6個(gè)小時(shí)，與對(duì)照組相比，血糖水平降低48%。相反, Canagliflozin作用于正常血糖小鼠，只輕微影響血糖水平。因此, Canagliflozin 在治療T2DM時(shí)可控制高血糖，也降低低血糖風(fēng)險(xiǎn)。

• Cell lines: L6 細(xì)胞系
• Concentrations: 0-10 μM
• Incubation Time: 24 小時(shí)
• Method: 使用從大鼠骨骼肌提取的細(xì)胞系L6,檢測(cè) Canagliflozin 作用于葡糖糖載體 1 (GLUT1)活性的效果。細(xì)胞培養(yǎng)在含5.6 mM葡萄糖，補(bǔ)充10% 胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中，按每孔3.0×105個(gè)細(xì)胞的密度接種到14孔板中，在含5% CO2的環(huán)境中37oC下培養(yǎng)24小時(shí)。使用Kreb's ringer 磷酸HEPES buffer (pH 7.4,150 mM NaCl,5 mM KCl,1.25 mM MgSO4,1.25 mM CaCl2, 2.9 mM Na2HPO4, 10 mM HEPES)漂洗2次細(xì)胞，然后與Canagliflozin 溶液(250 µL, 10 uM) 在室溫下預(yù)溫育5分鐘。加入50 µL 4.5 mM 2-DG (作為GLUTs的底物)/3H-2-DG(0.625 µCi)開(kāi)始反應(yīng)，隨便在室溫下溫育15分鐘。 通過(guò)吸取溫育混合物而使2-DG 吸收停止。使用冰凍PBS立刻沖洗細(xì)胞3次。使用0.3 N NaOH萃取樣本,通過(guò)液體閃爍法測(cè)定放射性。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：

• Animal Models: KK (HF-KK) 小鼠
• Formulation: 0.2% CMC/0.2% Tween-80
• Dosages: 10 mg/kg
• Administration: 口服處理

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.2496 mL

11.2481 mL

22.4962 mL

5 mM

0.4499 mL

2.2496 mL

4.4992 mL

10 mM

0.2250 mL

1.1248 mL

2.2496 mL

50 mM

0.0450 mL

0.2250 mL

0.4499 mL