RKO-E6細(xì)胞系專業(yè)培養(yǎng)|CRL-2578    "【細(xì)胞貨號】 CRL-2578
【細(xì)胞縮寫】 RKO-E6細(xì)胞
【細(xì)胞名稱】 RKO-E6(人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞)
【背景資料】 RKO-E6細(xì)胞系是用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染pCMV-E6的結(jié)腸癌RKO細(xì)胞系。該細(xì)胞含有穩(wěn)定整合受控於巨細(xì)胞病毒啟動(dòng)子的人乳頭狀病毒（HPV）E6癌基因。RKO-E6細(xì)胞系和它的母系RKO一起可用于研究p53缺失引起的細(xì)胞參數(shù)改變p53介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄和凋亡等。
【細(xì)胞來源】 細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學(xué)建系
【代次】 P4
【規(guī)格】 復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管（兩支）
【細(xì)胞數(shù)】 1*10（6）
【生物安全級別】 1
【生物體】 人
【組織來源】 結(jié)腸癌，轉(zhuǎn)染插入到pCMV中的HPV E6
【細(xì)胞形態(tài)】 上皮細(xì)胞樣
【細(xì)胞特性】 貼壁
【細(xì)胞活力】 95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
【細(xì)胞檢測】 細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
【培養(yǎng)條件】 詳見細(xì)胞說明書
【傳代方法】 建議1:2-1:3 兩天換液一次
【凍存條件】 詳見細(xì)胞說明書
【主要文獻(xiàn)】 請具體查閱相關(guān)發(fā)表文章"    "

細(xì)胞凍存及復(fù)蘇基本知識普及：
細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，這樣在需要的時(shí)候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。
除此之外，還可以利用細(xì)胞凍存的形式來購買、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。細(xì)胞凍存時(shí)向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點(diǎn)降低，加之在緩慢凍結(jié)條件下，細(xì)胞內(nèi)水分透出，減少了冰晶形成，從而避免細(xì)胞損傷。 
采用""慢凍快融""的方法能較好地保證細(xì)胞存活。標(biāo)準(zhǔn)冷凍速度開始為-1 到 -2℃/min，當(dāng)溫度低于-25℃時(shí)可加速，到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃)。
細(xì)胞凍存的步驟
（1）選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min，10分鐘)。
（2）去上清液，加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于4℃預(yù)冷15分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為5×106～1×107/mL之間。（凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇。
（3）將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中，每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記（日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù)）
（4）將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中，-80℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在4℃，2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃，2h;-80℃，2h;放入液氮罐。
（5）細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
如何進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇：
1. 從液氮容器中取出凍存管，直接浸入37℃溫水中，并不時(shí)搖動(dòng)令其盡快融化。
2. 從37℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細(xì)胞懸液，加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液，混勻;
3. 離心， 1000rpm，5min;
4. 棄去上清液，加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度，接種培養(yǎng)瓶，37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
5. 次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。
溫馨提醒
1.從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存，但為對數(shù)生長期細(xì)胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液;
2.將凍存管放入液氮容器或從中取出時(shí)，要做好防護(hù)工作（戴棉手套），以免凍傷;
3.凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。
細(xì)胞復(fù)蘇的時(shí)候，有些初次實(shí)驗(yàn)員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時(shí)候是否有哪些細(xì)節(jié)要注意的？
一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺(tái)中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放37度水浴鍋中搖溶，在將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到裝有37度預(yù)熱過的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。"    "

解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：
在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е拢覀冊撛趺催M(jìn)行解決？以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！
出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：
1.解凍過程中細(xì)胞裂解                      
推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為1*10(6)至1*10(7)細(xì)胞/毫升。
2.解凍過程中的問題
推薦的解決方案：在-70℃至-80℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為1-5天，但這不是保存的首選方法。在37℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)。
3.對冷凍液過敏
推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在24小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期。
4.被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡
推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對數(shù)期。
出現(xiàn)大量細(xì)胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下：
1.冷凍時(shí)細(xì)胞密度過低：推薦的解決方案：縮短解凍過程中的時(shí)間。將細(xì)胞取出后，立即將凍存管浸入在37℃的水浴中，并震蕩至全部融化，然后迅速地轉(zhuǎn)移到預(yù)熱的培養(yǎng)基中。
2.不適當(dāng)?shù)睦鋬鲞^程：推薦的解決方案：解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當(dāng)?shù)募夹g(shù)，并確保使用了適量和適合的冷凍液。
出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下：
1.培養(yǎng)瓶的大?。阂话憬鉀Q方案是一些細(xì)胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞密度上升；如，根據(jù)培養(yǎng)基的體積，從T75培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到2或3個(gè)T25培養(yǎng)瓶中。
2.細(xì)胞密度過低：通常解決方案是提高未來冷凍物種細(xì)胞的凍存密度，或使用較小的培養(yǎng)容器，或解凍多個(gè)試管來進(jìn)行培養(yǎng)。"    "

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C5058 WEHI 231小鼠B淋巴細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5059 RIN-m褐鼠胰島素瘤上皮細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5060 RenCa小鼠腎癌細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5061 STO鼠胚成纖維四代細(xì)胞系 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5062 RK-13兔腎四代細(xì)胞系 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5063 PK-15豬腎四代細(xì)胞系 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5064 SF-9昆蟲四代細(xì)胞系 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5065 104C1轉(zhuǎn)化的豚鼠胎體細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5067 J774A.1鼠腹水單核四代細(xì)胞瘤 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5068 EPC大黃魚EPC細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5069 SVEC4-10小鼠淋巴結(jié)血管上皮樣細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5071 FDC-P1小鼠骨髓細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5072 NG108-15小鼠神經(jīng)母四代細(xì)胞瘤四代細(xì)胞與大鼠膠質(zhì)瘤四代細(xì)胞之融合細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5073 WEHI-3小鼠血細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5074 AtT-20小鼠垂體瘤四代細(xì)胞(分泌促生長激素分泌激素) ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5075 Fox-NY小鼠骨髓瘤細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5076 MMQ大鼠垂體瘤細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5077 BC3H1小鼠腦瘤細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5078 IEC-6大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5079 LLC-PK1豬腎細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5080 3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纖維細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5081 L6大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5082 RBL-1大鼠嗜堿性粒四代細(xì)胞性白血病細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5085 MPC-11小鼠漿四代細(xì)胞瘤 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5087 TM3正常小鼠睪丸Leydig細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5088 TM4正常小鼠睪丸Leydig細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5089 DSL-6A/C1大鼠胰腺癌四代細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5090 3T3-swiss albino小鼠胚胎成纖維細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5091 RIN-m5F小鼠β胰島素瘤細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5092 V79-4中國倉鼠肺細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5094 BALB/3T3BALB/C小鼠胚成纖維細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5095 A10大鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！
C5097 DT40雞淋巴瘤細(xì)胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細(xì)胞庫來源正常細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、癌細(xì)胞系（三千多種），提供細(xì)胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！"    "

常見培養(yǎng)細(xì)胞預(yù)防污染的有效措施：
體外培養(yǎng)的細(xì)胞受到嚴(yán)重污染時(shí)，有時(shí)即使想盡各種辦法也難以挽回。因此，防止污染，預(yù)防是關(guān)鍵。只有將預(yù)防措施貫穿于整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)的始終，才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。一般預(yù)防可從以下幾方面著手：
（1）添加抗生素：各種抗生素性質(zhì)不同，對各種微生物的作用也不同，聯(lián)合應(yīng)用比單用效果好，預(yù)防性應(yīng)用比污染后使用好（但迄今尚無對抗支原體特效抗生素）。但反復(fù)使用抗生素會(huì)使微生物產(chǎn)生耐藥性，且對細(xì)胞本身也有一定影響，因此為避免誘導(dǎo)抗藥細(xì)菌，應(yīng)定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素，或盡可能不用抗生素處理。
（2）從物品、用品消毒滅菌著手：細(xì)胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底，各種溶液滅菌除菌要仔細(xì)，并在取樣檢菌一周后確認(rèn)無菌才能使用。同時(shí)，在無菌過濾操作中，隨著濾過體積的增大，濾膜破損的可能性增加，故應(yīng)選擇最后過濾的液體進(jìn)行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進(jìn)行消毒。具體操作：75%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后，使用可移動(dòng)的紫外燈至少消毒30min，加入高壓滅菌過的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制300ml的飽和硫酸銅加3L 滅菌超純水混合成硫酸銅溶液加入水槽中。
（3）從操作者做起：①進(jìn)無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用 75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動(dòng)作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時(shí)間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時(shí)會(huì)將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時(shí)間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細(xì)胞，同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會(huì)產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時(shí)盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí)，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺(tái)面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺(tái)面。
（4）防止細(xì)胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲(chǔ)備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。重要細(xì)胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨(dú)立進(jìn)行。
（5）無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，的優(yōu)點(diǎn)是便宜，而且可以稀釋50倍用，而同樣量的酒精價(jià)格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對各種細(xì)菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價(jià)廉，熏蒸消毒時(shí)不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含37－40%的甲醛。"    "

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