NCM460正常結(jié)腸上皮細(xì)胞系專業(yè)培養(yǎng)    "
上海黃浦細(xì)胞來(lái)源：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)內(nèi)外著名大學(xué)建系；┈技┈術(shù)(訂購(gòu))┈熱┈線：0┈2┈1┈5┈4┈3┈8┈5┈3┈1┈3(1┈5┈8┈0┈0┈5┈7┈6┈8┈6┈7)┈聯(lián)┈系┈Q┈Q：3┈3┈0┈6┈0┈8┈4┈3┈5┈0；
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣、成纖維細(xì)胞樣、淋巴細(xì)胞樣等細(xì)胞形態(tài)；
細(xì)胞特性：貼壁或懸浮等細(xì)胞特性；
培養(yǎng)條件：DMEM低糖、DMEM高糖、RPMI-1640、McCoy's 5A等培養(yǎng)基)89%和10%PBS及1%雙抗(防止污染)或者此細(xì)胞的完全培養(yǎng)基或者此細(xì)胞的專用培養(yǎng)基；
生長(zhǎng)條件：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37 ℃(模擬人體正常溫度培養(yǎng)，這也是體外培養(yǎng)合適的溫度)；
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動(dòng)物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器進(jìn)行簡(jiǎn)單介紹：
一、CO2培養(yǎng)箱：CO2培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，它為細(xì)胞提供了一個(gè)體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染，因此，CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。
二、烘箱(干燥箱)：用于細(xì)胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用，玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時(shí)，烘箱內(nèi)溫度一般要達(dá)到160℃以上，通常使用鼓風(fēng)式烘箱。其優(yōu)點(diǎn)是溫度均勻、效果較好，缺點(diǎn)是升溫過(guò)程較慢。升溫時(shí)不能先升溫后鼓風(fēng)而應(yīng)鼓風(fēng)與升溫同時(shí)開(kāi)始，至100℃時(shí)，停止鼓風(fēng)。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦，燒焦的碎屑可影響細(xì)胞的生長(zhǎng)。消毒后不能立即打開(kāi)箱門(mén)，以免驟冷導(dǎo)致玻璃器皿破裂，應(yīng)等溫度自然下降至100℃以下后可開(kāi)門(mén)。
三、超凈工作臺(tái)/生物安全柜：細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)無(wú)菌環(huán)境要求很高，在細(xì)胞操作時(shí)，一般需要在100級(jí)空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行，因此超凈工作臺(tái)或生物安全柜就必須配備。
四、液氮罐：為了保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株，要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃，因此，需要液氮罐。在此環(huán)境中，一般細(xì)胞可以保存十年具有活性。
五、超低溫冰箱：細(xì)胞的凍存過(guò)程需要一系列程序降溫，一般4℃下存放30 min，轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour，再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過(guò)夜，之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃)，這時(shí)就必須配備一臺(tái)-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細(xì)胞可達(dá)數(shù)月，對(duì)于不需要長(zhǎng)期凍存的細(xì)胞，可暫時(shí)放于超低溫冰箱保存。
六、恒溫水浴：從液氮或超低溫冰箱中取出細(xì)胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速?gòu)?fù)蘇之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴也是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器。
七、離心機(jī)：細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞，所以需要配置低速的常溫離心機(jī)，對(duì)于后期細(xì)胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機(jī)。
除上述儀器外，移液器、高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡也是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機(jī)等也常常見(jiàn)于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室。
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公司提供部分ATCC細(xì)胞有(限于頁(yè)面篇幅，公司全部細(xì)胞并未展示，如有具體所需細(xì)胞，請(qǐng)咨詢我們哦)；CRL-1492|AR42J細(xì)胞；CRL-1420|MIApaca-2細(xì)胞；CRL-2172|SW1990細(xì)胞；HTB-80|CaPan-Ⅱ/Capan-2細(xì)胞；CRL-2119|HPAC細(xì)胞；HTB-52|SK-HEP-1細(xì)胞；HB-8064|Hep-3B細(xì)胞；CRL-2235|SNU-182細(xì)胞；CRL-5803|NCI-H1299細(xì)胞；CRL-11233|THLE-3細(xì)胞；CCL-249|NCL-H548細(xì)胞；HTB-171|NCI-H446細(xì)胞；HTB-180|NCI-H345細(xì)胞；CRL-2064|DMS153細(xì)胞；CCL-257|NCI-H1688細(xì)胞；HTB-177|NCI-H460細(xì)胞；HTB-183|NCI-H661細(xì)胞；HTB-182|NCI-H520細(xì)胞；CRL-5883|NCI-H1650細(xì)胞；CRL-5908|NCI-H1975細(xì)胞；CRL-5844|NCI-H838細(xì)胞；CRL-5934|NCI-H2227細(xì)胞；CRL-1848|NCI-H292細(xì)胞；HTB-178|NCI-H596細(xì)胞；CRL-5800|NCI-H23細(xì)胞；CRL-5922|NCI-H2087細(xì)胞；CCL-185|A549細(xì)胞；HTB-53|A-427細(xì)胞；HTB-58|SK-MES-1細(xì)胞；HTB-55|Calu-3細(xì)胞；HTB-56|Calu-6細(xì)胞；CCL-171|MRC-5細(xì)胞；CCL-75|WI-38細(xì)胞；CRL-8024|PLC/PRF/5細(xì)胞；HTB-57|SK-LU-1細(xì)胞；CCL-211|Hs888Lu細(xì)胞；HTB-172|NCI-H209細(xì)胞；CRL-1932|786-O細(xì)胞；CRL-3216|293T細(xì)胞；CRL-11268|293T/17細(xì)胞；CRL-2190|HK-2細(xì)胞；CRL-1933|769-P細(xì)胞；
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公司提供部分ATCC細(xì)胞有(限于頁(yè)面篇幅，公司全部細(xì)胞并未展示，如有具體所需細(xì)胞，請(qǐng)咨詢我們哦)；CRL-1459|CCD-18Co細(xì)胞系；CRL-2797|MOVAS細(xì)胞系；CRL-1831|FHC細(xì)胞系；CRL-2638|CT26.WT [CT26WT]細(xì)胞系；HB-8064|Hep 3B2.1-7細(xì)胞系；CCL-2.1|Hela 229細(xì)胞系；HB-8065|Hep G2細(xì)胞系；CCL-131|Neuro-2a/N2a細(xì)胞系；CRL-2780|ATRFLOX[Mutatect]細(xì)胞系；CL-188|LS174T細(xì)胞系；CRL-2547|Panc 10.05細(xì)胞系；HB-8065|HepG-2細(xì)胞系；CCL-13|HeLa[Chang Liver]細(xì)胞系；CRL-2233|SNU-398細(xì)胞系；CCL-75.1|WI－38AV13細(xì)胞系；CRL-5892|NCI-H1755[H1755]細(xì)胞系；CRL5844|NCI-H838[H838]細(xì)胞系；CRL-5875|NCI-H1563[H1563]細(xì)胞系；CRL-5928|NCI-H2170[H2170]細(xì)胞系；CRL-2177|SW 1271[SW-1271; SW1271]細(xì)胞系；CRL-5889|NCI-H1703[H1703]細(xì)胞系；CRL-5826|NCI-H226[H226]細(xì)胞系；CRL-5900|NCI-H1869[H1869]細(xì)胞系；HTB-59|SW 900[SW-900; SW900]細(xì)胞系；CRL-1573|HEK-293細(xì)胞系；CRL-1441|G401細(xì)胞系；CRL-1500|ZR75-1細(xì)胞系；CRL-1504|ZR75-30細(xì)胞系；HTB-126|Hs-578T細(xì)胞系；CRL-1897|UACC812細(xì)胞系；HTB-111|AN3 CA細(xì)胞系；CCL-2.1|HeLa229細(xì)胞系；CRL-7924|HeLa-S3細(xì)胞系；HTB-81|DU-145細(xì)胞系；CRL-11610|RWPE2細(xì)胞系；CRL-7002|Hs 1.Tes細(xì)胞系；CRL-7131|Hs 181.Tes細(xì)胞系；CRL-1740|LNCaP clone FGC細(xì)胞系；
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公司提供部分ATCC復(fù)蘇細(xì)胞系有(限于頁(yè)面篇幅，公司全部復(fù)蘇細(xì)胞系并未展示，如有具體所需復(fù)蘇細(xì)胞系，請(qǐng)咨詢我們哦)；CCL-240|HL60復(fù)蘇細(xì)胞系；TIB-54|WEHI 22.1復(fù)蘇細(xì)胞系；TIB-152|Jurkat,Clone E6-1復(fù)蘇細(xì)胞系；CCL-85|EB-3[EB3]復(fù)蘇細(xì)胞系；HTB-14|U87MG復(fù)蘇細(xì)胞系；CCL-121|HT1080復(fù)蘇細(xì)胞系；HTB-12|SW 1088[SW-1088; SW1088]復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-7762|TE 354.T復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-7761|TE 353.Sk復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-2061|SJCRH30[RC13; RMS 13; SJRH30]復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-1608|45.6.TG1.7復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-1999|T/G HA-VSMC復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-11372|hFOB 1.19復(fù)蘇細(xì)胞系；TIB-71|RAW 264.7復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-6323|B16F1復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-6322|B16-Fo復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-6475|B16F10復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-1830|Hepa 1-6復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-1586|VERO E6復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-2638|CT-26.WT復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-9096|CHO/dhFr-復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-2755|EMT6復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-1975|145-2C11復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-8179|Cl.Ly1+2-/9復(fù)蘇細(xì)胞系；TIB-75|BNL1ME A.7R.1復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-1935|CHL/IU[CHL-11]復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-2594|MC3T3-E1 Subclone 14復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-12557|7F2復(fù)蘇細(xì)胞系；CL-173|3T3L1復(fù)蘇細(xì)胞系；CCL-17|KB復(fù)蘇細(xì)胞系；CCL-23|HEp-2復(fù)蘇細(xì)胞系；HTB-43|FaDu復(fù)蘇細(xì)胞系；HTB-135|HS-746T復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-1739|AGS復(fù)蘇細(xì)胞系；CRL-5822|NCI-N87復(fù)蘇細(xì)胞系；HTB-37|CACO-2復(fù)蘇細(xì)胞系；CCL-222|Colo205復(fù)蘇細(xì)胞系；CCL-220|Colo320DM復(fù)蘇細(xì)胞系；CCL-247|HCT116復(fù)蘇細(xì)胞系；CCL-244|HCT-8復(fù)蘇細(xì)胞系；HTB-38|HT-29復(fù)蘇細(xì)胞系；HTB-40|HuTu-80復(fù)蘇細(xì)胞系；CCL-228|SW480復(fù)蘇細(xì)胞系；CCL-227|SW620復(fù)蘇細(xì)胞系；CCL-248|T84復(fù)蘇細(xì)胞系；CCL-229|Lovo復(fù)蘇細(xì)胞系；
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公司已合作單位有山西中醫(yī)學(xué)院、福建醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院、上海市第六人民醫(yī)院、北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部、同濟(jì)大學(xué)、四平中心醫(yī)院、廣州中醫(yī)藥大學(xué)、中科院上海生命科學(xué)研究院生化與細(xì)胞研究所、解放軍第306醫(yī)院、江南大學(xué)、西南醫(yī)院、吉首大學(xué)、西南大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院、寧波大學(xué)、福建醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院、中南大學(xué)、延安大學(xué)附屬醫(yī)院、中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所、天津市兒童醫(yī)院、江蘇省中醫(yī)藥研究院、湘雅醫(yī)學(xué)院、第四軍醫(yī)大學(xué)預(yù)防系勞動(dòng)與環(huán)境教研室、揚(yáng)州大學(xué)、上海交通大學(xué)、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)、浙江省立同德醫(yī)院、中國(guó)人民解放軍第150中心醫(yī)院、蘇州大學(xué)、四川大學(xué)華西醫(yī)院、云南大學(xué)、揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院、海南醫(yī)學(xué)院、江蘇腫瘤醫(yī)院、上海市閔行區(qū)中心醫(yī)院、大連醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院、中國(guó)科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院、沈陽(yáng)藥科大學(xué)、廣州市第八人民醫(yī)院、南京大學(xué)、浙江中醫(yī)藥大學(xué)、蘭州大學(xué)、上海中醫(yī)藥大學(xué)、中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所、廈門(mén)市婦幼保健院、重慶大學(xué)、南京軍區(qū)總醫(yī)院、天津市人民醫(yī)院、北京醫(yī)學(xué)科學(xué)腫瘤醫(yī)院、江蘇大學(xué)、桂林醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院、中國(guó)科學(xué)院化學(xué)研究所、、鄭州大學(xué)附屬醫(yī)院、湖北省人民醫(yī)院、四川大學(xué)華西第二醫(yī)院、廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院、黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院、青海紅十字醫(yī)院、廣州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院、北京紅十字朝陽(yáng)醫(yī)院、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬一院、江西中醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院、北京中醫(yī)藥大學(xué)東直門(mén)醫(yī)院、山西醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院、上海長(zhǎng)海醫(yī)院、北京阜外醫(yī)院、北京安貞醫(yī)院、上海遠(yuǎn)大心胸醫(yī)院、哈爾濱醫(yī)科大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院、廣東霍英東心臟中心、中山醫(yī)科大學(xué)中山眼科中心、天津眼科醫(yī)院、溫州醫(yī)學(xué)院附屬眼視光醫(yī)院、北京兒童醫(yī)院、重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院、復(fù)旦大學(xué)附屬兒童醫(yī)院、南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院、湖北十堰市太和醫(yī)院、濟(jì)南市兒童醫(yī)院、中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院、天津醫(yī)科大學(xué)代謝病醫(yī)院
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            細(xì)胞貨號(hào)：                    C0972
            細(xì)胞縮寫(xiě)：                    NCM460細(xì)胞
            ┈技┈術(shù)(訂購(gòu))┈熱┈線：0┈2┈1┈5┈4┈3┈8┈5┈3┈1┈3(1┈5┈8┈0┈0┈5┈7┈6┈8┈6┈7)┈聯(lián)┈系┈Q┈Q：3┈3┈0┈6┈0┈8┈4┈3┈5┈0；公司已合作單位有廣西醫(yī)科大學(xué)、中山大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院、復(fù)旦大學(xué)、南方醫(yī)科大學(xué)、浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬邵逸夫醫(yī)院、深圳市孫逸仙心血管醫(yī)院、福建省立醫(yī)院、上海寵樂(lè)道寵物醫(yī)院、中國(guó)科學(xué)院上海高等研究院、北京市昌平區(qū)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院、中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院、云南中醫(yī)學(xué)院、紹興市人民醫(yī)院、汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院、首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京同仁醫(yī)院、解放軍總醫(yī)院、上海瑞金醫(yī)院、北京宣武醫(yī)院、吉林大學(xué)臨床醫(yī)院、北京中醫(yī)藥大學(xué)附屬東直門(mén)醫(yī)院、北京天壇醫(yī)院、復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院、北京協(xié)和醫(yī)院、河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院、北京軍區(qū)總醫(yī)院、上海市中醫(yī)醫(yī)院、復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院、浙江省中醫(yī)院、上海華山醫(yī)院、哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院、西安唐都醫(yī)院、上海長(zhǎng)征醫(yī)院、廣州珠江醫(yī)院、上海仁濟(jì)醫(yī)院、山西省眼科醫(yī)院、航天中心醫(yī)院、中山大學(xué)腫瘤醫(yī)院、重慶新橋醫(yī)院、浙江大學(xué)附屬第二醫(yī)院、解放軍總醫(yī)院(301醫(yī)院)、北京大學(xué)第三醫(yī)院、廣州軍區(qū)廣州總院、北京大學(xué)人民醫(yī)院、山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院、、廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院、寧波市第二醫(yī)院、廣州南方醫(yī)院、西京醫(yī)院、復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院、浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院、重慶醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院、北京地壇醫(yī)院、北京大學(xué)醫(yī)院、中山大學(xué)附屬醫(yī)院、天津市腫瘤醫(yī)院、武漢協(xié)和醫(yī)院心血管疾病研究所、第二軍醫(yī)大學(xué)東方肝膽外科醫(yī)院、北京腫瘤醫(yī)院、湖南省腫瘤醫(yī)院、南方醫(yī)院、廣東省人民醫(yī)院、北京市廣安門(mén)醫(yī)院、北京同仁醫(yī)院、復(fù)旦大學(xué)附屬眼耳鼻喉科醫(yī)院、上海仁濟(jì)醫(yī)院(西部)、山東大學(xué)齊魯醫(yī)院、海軍總醫(yī)院；細(xì)胞名稱：                    NCM460(正常結(jié)腸上皮細(xì)胞)
            T25培養(yǎng)瓶發(fā)貨形式是用T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開(kāi)包裝T25培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴75%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)（有條件可以拍下此時(shí)細(xì)胞照片）。將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細(xì)胞密度高于80%，可以直接消化傳代，相反則加入5-6ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。背景資料：                    見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
            細(xì)胞消化時(shí)注意把握消化時(shí)間，消化不夠會(huì)導(dǎo)致吹打細(xì)胞時(shí)造成損傷，一般消化時(shí)間是2-3分鐘，但以鏡檢時(shí)大部分細(xì)胞縮回球形為準(zhǔn)，一般2次即可將細(xì)胞吹打下來(lái)，消化不夠進(jìn)行細(xì)胞吹打易損傷細(xì)胞。細(xì)胞系的凍存液配方：90%FBS+10%DMSO，貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長(zhǎng)，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)                    細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)內(nèi)外著名大學(xué)建系
            公司提供的細(xì)胞代次低，活性好，質(zhì)量有保障，全程為您的細(xì)胞相關(guān)科研實(shí)驗(yàn)研究保駕護(hù)航，技術(shù)一對(duì)一服務(wù)，細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程一條龍服務(wù)，代次：                    P4
            規(guī)格：                    復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管（兩支）
            細(xì)胞數(shù)：                    1*10（6）
            離心管發(fā)貨形式是用15ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有T25培養(yǎng)瓶，可以暫時(shí)T75 培養(yǎng)瓶，加入10-15ml培養(yǎng)基,，建議10ml培養(yǎng)基，也可以使用T175 培養(yǎng)瓶，加入50-60ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，一般不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來(lái)再換大的，不然會(huì)長(zhǎng)得很慢，嚴(yán)重的，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn))，平衡完成后，離心（1000rpm，3min）收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。生物安全級(jí)別：                    1
            生物體：                    人
            組織來(lái)源：                    結(jié)腸
            細(xì)胞形態(tài)：                    上皮細(xì)胞
            "T25瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時(shí)使部分因運(yùn)輸導(dǎo)致脫落的細(xì)胞貼壁，此步驟非常必要。T25瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細(xì)胞，可以收集上清后離心（1200rpm，5min）后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。
部分細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細(xì)胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細(xì)胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細(xì)胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細(xì)胞可以離心（1000rpm，3min）收集細(xì)胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細(xì)胞。細(xì)胞特性："                    貼壁
            特別注意：如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng)，貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)，如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心，加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決                    95％（Viability by Trypan Blue Exclusion），凍存液中含有DMSO請(qǐng)使用細(xì)胞級(jí)DMSO，同時(shí)濃度不要太高，部分細(xì)胞在10%DMSO條件下凍存會(huì)死亡，所以DMSO濃度5%-8%是比較推薦的濃度。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇遵循慢凍快融的原則，即取0.2-0.3ml的凍存液重懸的細(xì)胞于一個(gè)凍存管中，與正常體積凍存的細(xì)胞共同凍存，至液氮后復(fù)蘇檢查凍存結(jié)果。凍檢合格前，留一部分細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)，以防萬(wàn)一。
            細(xì)胞檢測(cè)：                    細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
            培養(yǎng)條件：                    選擇此細(xì)胞合適的培養(yǎng)基(DMEM低糖、DMEM高糖、RPMI-1640、McCoy's 5A等培養(yǎng)基)89%和10%PBS及1%雙抗(防止污染)或者此細(xì)胞的完全培養(yǎng)基或者此細(xì)胞的專用培養(yǎng)基；生長(zhǎng)條件：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37 ℃(模擬人體正常溫度培養(yǎng)，這也是體外培養(yǎng)合適的溫度)
            傳代比例建議1:2-1:3，長(zhǎng)得比較快的細(xì)胞可以1:3，比較慢的按1:2傳代。傳代后，建議不要使用傳代前培養(yǎng)所使用的培養(yǎng)基，會(huì)有大量細(xì)胞碎片甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡的風(fēng)險(xiǎn)。細(xì)胞狀態(tài)不好或者生長(zhǎng)極慢的時(shí)候，可以通過(guò)增加血清濃度調(diào)整細(xì)胞狀態(tài)及生長(zhǎng)速度。請(qǐng)不要隨意更換培養(yǎng)基，因?qū)嶒?yàn)需要，可以逐步馴化(讓它們慢慢適應(yīng))。傳代方法：                    建議1:2-1:3 兩天換液一次；公司提供部分ATCC細(xì)胞有(限于頁(yè)面篇幅，公司全部細(xì)胞并未展示，如有具體所需細(xì)胞，請(qǐng)咨詢我們哦)；CRL-1459|CCD-18Co細(xì)胞；CRL-2797|MOVAS細(xì)胞；CRL-1831|FHC細(xì)胞；CRL-2638|CT26.WT [CT26WT]細(xì)胞；HB-8064|Hep 3B2.1-7細(xì)胞；CCL-2.1|Hela 229細(xì)胞；HB-8065|Hep G2細(xì)胞；CCL-131|Neuro-2a/N2a細(xì)胞；CRL-2780|ATRFLOX[Mutatect]細(xì)胞；CL-188|LS174T細(xì)胞；CRL-2547|Panc 10.05細(xì)胞；HB-8065|HepG-2細(xì)胞；CCL-13|HeLa[Chang Liver]細(xì)胞；CRL-2233|SNU-398細(xì)胞；CCL-75.1|WI－38AV13細(xì)胞；CRL-5892|NCI-H1755[H1755]細(xì)胞；CRL5844|NCI-H838[H838]細(xì)胞；CRL-5875|NCI-H1563[H1563]細(xì)胞；CRL-5928|NCI-H2170[H2170]細(xì)胞；CRL-2177|SW 1271[SW-1271; SW1271]細(xì)胞；CRL-5889|NCI-H1703[H1703]細(xì)胞；CRL-5826|NCI-H226[H226]細(xì)胞；CRL-5900|NCI-H1869[H1869]細(xì)胞；HTB-59|SW 900[SW-900; SW900]細(xì)胞；CRL-1573|HEK-293細(xì)胞；CRL-1441|G401細(xì)胞；CRL-1500|ZR75-1細(xì)胞；CRL-1504|ZR75-30細(xì)胞；HTB-126|Hs-578T細(xì)胞；CRL-1897|UACC812細(xì)胞；HTB-111|AN3 CA細(xì)胞；CCL-2.1|HeLa229細(xì)胞；CRL-7924|HeLa-S3細(xì)胞；HTB-81|DU-145細(xì)胞；CRL-11610|RWPE2細(xì)胞；CRL-7002|Hs 1.Tes細(xì)胞；CRL-7131|Hs 181.Tes細(xì)胞；CRL-1740|LNCaP clone FGC細(xì)胞；CCL-240|HL60細(xì)胞；TIB-54|WEHI 22.1細(xì)胞；TIB-152|Jurkat,Clone E6-1細(xì)胞；CCL-85|EB-3[EB3]細(xì)胞；HTB-14|U87MG細(xì)胞；CCL-121|HT1080細(xì)胞；HTB-12|SW 1088[SW-1088; SW1088]細(xì)胞；CRL-7762|TE 354.T細(xì)胞；CRL-7761|TE 353.Sk細(xì)胞；CRL-2061|SJCRH30[RC13; RMS 13; SJRH30]細(xì)胞；CRL-1608|45.6.TG1.7細(xì)胞；CRL-1999|T/G HA-VSMC細(xì)胞；CRL-11372|hFOB 1.19細(xì)胞；TIB-71|RAW 264.7細(xì)胞；CRL-6323|B16F1細(xì)胞；CRL-6322|B16-Fo細(xì)胞；CRL-6475|B16F10細(xì)胞；CRL-1830|Hepa 1-6細(xì)胞；CRL-1586|VERO E6細(xì)胞；CRL-2638|CT-26.WT細(xì)胞；CRL-9096|CHO/dhFr-細(xì)胞；CRL-2755|EMT6細(xì)胞；CRL-1975|145-2C11細(xì)胞；CRL-8179|Cl.Ly1+2-/9細(xì)胞；TIB-75|BNL1ME A.7R.1細(xì)胞；CRL-1935|CHL/IU[CHL-11]細(xì)胞；CRL-2594|MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞；CRL-12557|7F2細(xì)胞；CL-173|3T3L1細(xì)胞；CCL-17|KB細(xì)胞；CCL-23|HEp-2細(xì)胞；HTB-43|FaDu細(xì)胞；HTB-135|HS-746T細(xì)胞；CRL-1739|AGS細(xì)胞；CRL-5822|NCI-N87細(xì)胞；HTB-37|CACO-2細(xì)胞；CCL-222|Colo205細(xì)胞；CCL-220|Colo320DM細(xì)胞；CCL-247|HCT116細(xì)胞；CCL-244|HCT-8細(xì)胞；HTB-38|HT-29細(xì)胞；HTB-40|HuTu-80細(xì)胞；CCL-228|SW480細(xì)胞；CCL-227|SW620細(xì)胞；CCL-248|T84細(xì)胞；CCL-229|Lovo細(xì)胞；CRL-2577|RKO細(xì)胞；CRL-2579|RKO-AS45-1細(xì)胞；CRL-2578|RKO-E6細(xì)胞；CL-187|LS 180細(xì)胞；CCL-225|HCT-15細(xì)胞；CCL-221|DLD-1細(xì)胞；CRL-1469|PANC-1細(xì)胞；CRL-1918|CFPAC-1細(xì)胞；CRL-1435|PC-3細(xì)胞；CRL-1682|AsPc-1細(xì)胞；CRL-1687|BxPC-3細(xì)胞；CRL-1492|AR42J細(xì)胞；CRL-1420|MIApaca-2細(xì)胞；CRL-2172|SW1990細(xì)胞；HTB-80|CaPan-Ⅱ/Capan-2細(xì)胞；CRL-2119|HPAC細(xì)胞；HTB-52|SK-HEP-1細(xì)胞；HB-8064|Hep-3B細(xì)胞；CRL-2235|SNU-182細(xì)胞；CRL-5803|NCI-H1299細(xì)胞；CRL-11233|THLE-3細(xì)胞；CCL-249|NCL-H548細(xì)胞；
            ┈技┈術(shù)(銷售)┈熱┈線：零0┈貳2┈壹1┈伍5┈肆4┈叁3┈捌8┈伍5┈叁3┈壹1┈叁3(壹1┈伍5┈捌8┈零0┈零0┈伍5┈柒7┈陸6┈捌8┈陸6┈柒7)┈聯(lián)┈系┈Q┈Q：叁3┈叁3┈零0┈陸6┈零0┈捌8┈肆4┈叁3┈伍5┈零0；凍存條件：                    詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
            凍存液配方：建議使用92%PBS+8%DMSO，客戶自身實(shí)驗(yàn)室所使用的凍存液也可以適用，血清濃度不低于30%，DSMO含量不高于12%即可。細(xì)胞請(qǐng)于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，大部分細(xì)胞是37℃，5%CO2，濕度100%環(huán)境下培養(yǎng)的。有極少部分細(xì)胞培養(yǎng)條件不一致，請(qǐng)仔細(xì)閱讀相應(yīng)的細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，使用正確的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件；細(xì)胞于培養(yǎng)瓶或皿中培養(yǎng)，加入適量說(shuō)明書(shū)上標(biāo)注的細(xì)胞相應(yīng)完全培養(yǎng)基（一般液面高度2-3mm即可）。主要文獻(xiàn)：                    "請(qǐng)具體查閱相關(guān)發(fā)表文章，接收細(xì)胞相關(guān)問(wèn)題：如不能在收到細(xì)胞后及時(shí)操作細(xì)胞，T25及離心管發(fā)貨的細(xì)胞將可以消毒后在37度過(guò)夜，血清發(fā)貨的細(xì)胞在室溫下靜置1-2天（注意不要放冰箱），干冰發(fā)貨的可以在確認(rèn)干冰未完全升華時(shí)將細(xì)胞直接放回液氮或者-80度冰箱，若干冰完全升華，請(qǐng)即刻復(fù)蘇細(xì)胞。
T25瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時(shí)使部分因運(yùn)輸導(dǎo)致脫落的細(xì)胞貼壁，此步驟非常必要。T25瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細(xì)胞，可以收集上清后離心（1200rpm，5min）后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。
部分細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細(xì)胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細(xì)胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細(xì)胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細(xì)胞可以離心（1000rpm，3min）收集細(xì)胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細(xì)胞。"