僅供科研使用,不得用于臨床檢驗(yàn)。
小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
通用名稱:小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
英文名稱:Mouse IFN-γ ELISA Kit
【包裝規(guī)格】
48T/96T
【預(yù)期用途】
僅供科研使用,不得用于臨床檢驗(yàn)。
需要但未提供的材料及耗材:
1、酶標(biāo)儀
2、精密移液器及一次性吸頭
3、蒸餾水
4、洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī)
5、37℃水浴鍋或恒溫箱
6、500ml量筒
7、無粉一次性乳膠手套
【儲(chǔ)存條件及有效期】
1、2-8℃保存,切勿冷凍,有效期6個(gè)月。
2、開封使用后,包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中,密閉自封袋,并將全部試劑放回2-8℃冰箱。
3、開封后,按照建議的條件保存,校準(zhǔn)品、包被微孔板和hrp標(biāo)記抗體,有效期為14天,其他成分在標(biāo)簽標(biāo)明的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的。
【適用儀器】
半自動(dòng)的酶標(biāo)儀,如thermo mk3,或者國產(chǎn)酶標(biāo)儀。
【樣本要求】
樣本類型和采集
以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細(xì)胞培養(yǎng)上清:4000rpm條件下離心20min,去除細(xì)胞顆粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反復(fù)凍融。
2、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,4000rpm條件下離心20min,小心地分離出血清,保存在- 20℃以下,避免反復(fù)凍融。
3、血漿:肝素,edta,或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在4000rpm條件下,離心20分鐘取上清,血漿保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。
樣本保存和穩(wěn)定性:
樣本在2-8℃條件下,可以儲(chǔ)存72h,或者在- 20℃儲(chǔ)存6個(gè)月。樣本收集后,不是一次檢測(cè)完,請(qǐng)按一次用量分裝凍存,避免反復(fù)凍融,使用時(shí)在室溫下解凍,確保樣品均勻充分解凍。
【檢驗(yàn)方法】
試劑準(zhǔn)備
1、使用前,所有的組分都要至少復(fù)溫30min,確保充分復(fù)溫到室溫。
2、濃縮洗滌液:從冰箱取出的濃縮洗滌液,會(huì)有結(jié)晶產(chǎn)生,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解。濃縮洗滌液與蒸餾水,按1:20稀釋,即1份的濃縮洗滌液,添加19份的蒸餾水。
3、底物:底物液a和b,在使用前,按1:1體積充分混合,混合后15分鐘內(nèi)使用。
操作程序:
1、所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫,標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品,建議做復(fù)孔。
2、按前面試劑準(zhǔn)備中描述的方法,配制好試劑盒各種組分的工作液。
3、從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。
4、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μl,樣本孔加待測(cè)樣本50μl,空白孔不加。
5、除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μl。
6、用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
7、揭開封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置20s,甩去洗滌液,吸水紙上拍干。
8、如此重復(fù)4次(共洗板5次)。若使用自動(dòng)洗板機(jī),請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板,添加浸泡20s的程序,可以提高檢測(cè)的精度。洗板結(jié)束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應(yīng)板。
9、將底物a和b按1:1體積充分混合,所有孔中加入底物混合液100μl。用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min。
10、所有孔加入終止液50μl,在酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度(od值)。
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
檢測(cè)完成后,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度做為縱坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的吸光度(od值)作為橫坐標(biāo),利用計(jì)算機(jī)軟件,采用四參數(shù)logistic曲線擬合(4-pl),創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線方程,通過樣本的吸光度(od值),利用方程計(jì)算樣品的濃度值。
如果樣品被稀釋,通過上述方法測(cè)的的濃度值,要乘以稀釋倍數(shù),才是樣品的最終濃度。
【檢驗(yàn)方法的局限性】
1、僅供科研使用,不得用于臨床診斷。
2、在試劑盒標(biāo)示的有效期內(nèi)使用,過期產(chǎn)品不得使用。
3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。
4、使用試劑盒配套的樣品稀釋液。
5、如果樣本值高于最高標(biāo)準(zhǔn)品濃度值,請(qǐng)將樣本適當(dāng)稀釋后,再重新測(cè)定。
6、待測(cè)樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果,檢測(cè)前,請(qǐng)排除該因素。
7、通過其他方法得到的檢測(cè)結(jié)果,與本試劑盒測(cè)定結(jié)果不具有直接的可比性。
技術(shù)提示:
1、混合蛋白溶液時(shí),避免起泡。
2、加校準(zhǔn)品與樣本時(shí),每個(gè)校準(zhǔn)品濃度和樣本都要更換移液槍頭,公共組分應(yīng)該懸臂加樣,避免交叉污染。
3、合適的溫育時(shí)間,和充分的洗滌步驟,是保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的必要條件。
4、底物溶液為無色液體,保存過程中變?yōu)樗{(lán)色,代表底物溶液已經(jīng)失效,不得使用。
5、終止液加樣順序與底物溶液加樣順序一致,加入終止液后,藍(lán)色底物產(chǎn)物,會(huì)瞬間變?yōu)辄S色。
6、實(shí)驗(yàn)中,用剩的板條,應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
7、所有液體組分,使用前充分搖勻,嚴(yán)格按照說明書標(biāo)明的時(shí)間、加樣量及加樣順序進(jìn)行溫育操作。
廢物處理:
所有使用或未使用的試劑,所有污染性的一次性材料,應(yīng)當(dāng)遵循傳染性或潛在傳染性產(chǎn)品的處理程序,每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都有責(zé)任根據(jù)其實(shí)驗(yàn)的類型和危險(xiǎn)性級(jí)別,進(jìn)行廢物和污物的處理,同時(shí)要嚴(yán)格依照有關(guān)規(guī)定對(duì)待所有的廢物和污物。
【基本信息】
企業(yè)名稱:上海將來實(shí)業(yè)股份有限公司
生產(chǎn)地址:上海市楊浦區(qū)五角場(chǎng)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)園區(qū)
固定電話:021-60496032 / 60484409
傳真號(hào)碼:021-55660885
網(wǎng) 址:www.jonln.com
qq號(hào)碼:2880522968
郵 箱:shjlsw@163.com
公司簡(jiǎn)介:
江萊生物(中國老牌ELISA試劑盒供應(yīng)商)
“江萊生物”10年以來一直致力于免疫學(xué)技術(shù)的積累與沉淀,目前江萊生物實(shí)驗(yàn)室占地約3000平米,技術(shù)研發(fā)團(tuán)隊(duì)50余人,配備了全球最先進(jìn)的分析和檢測(cè)設(shè)備,我們通過自主創(chuàng)新以及與國內(nèi)外的科研單位合作研發(fā),不斷突破新技術(shù),目前我們研發(fā)了上千種指標(biāo),質(zhì)量成熟,并長期出口到歐美市場(chǎng),贏得了眾多科研機(jī)構(gòu)的認(rèn)可。
產(chǎn)品質(zhì)量:
我們嚴(yán)格選擇國內(nèi)外最頂尖的原材料并反復(fù)測(cè)試,以確保每個(gè)產(chǎn)品的源頭都是高品質(zhì)的,我們承諾:如有產(chǎn)品質(zhì)量問題,我們免費(fèi)為用戶退換,直到客戶滿意。
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