BCA 法蛋白含量測定試劑盒說明書 

微量法 100T/96S

正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定 

測定意義：

樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計(jì)算。此外，可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。

測定原理：

堿性條件下，蛋白質(zhì)中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽鍵，能將 Cu 2+還原成 Cu +；2 分子 的 BCA 與 Cu +結(jié)合，生成紫色絡(luò)合物，在 540-595nm 有吸收峰，562nm 處吸收峰最強(qiáng)。

自備儀器和用品：

臺式離心機(jī)、恒溫水浴鍋、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、移液器和蒸餾水。

樣品中可溶性蛋白質(zhì)提?。?/span>

1、液體樣品：

澄清液體樣品可以直接測定。 

2、組織樣品：

按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1ml 提取液（自備，根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水） 冰浴勻漿，10000rpm，4℃離心 10min，取上清，即待測液。

3 、細(xì)菌、細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（10 4個）：

提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)胞 加入 1ml 提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；然后 10000rpm， 4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測。