產(chǎn)品描述
gelred是一種獨(dú)特的油性大分子,不能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。不易揮發(fā)升華,人體不會(huì)吸入。艾姆斯氏測(cè)試結(jié)果也表明gelred在凝膠染色濃度下完全無(wú)誘變性,相對(duì)于EB的強(qiáng)致癌性是一種安全無(wú)毒的核酸染料。gelred與EB具有相同的光譜特性,無(wú)需改變?yōu)V光片及觀察裝置(普通紫外凝膠透射儀),在300nm處紫外光激發(fā)檢測(cè)即可。gelred適用于瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠電泳中的dsDNA,ssDNA以及RNA染色,可以選擇膠染法或泡染法進(jìn)行染色,使用非常方便和靈活。
使用方法
一、膠染法(同EB,電泳前染色)
1) 制膠時(shí)加入gelred 核酸染料(每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL gelred 10,000×水溶液)。
2) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
注意事項(xiàng)
1)此方法比較節(jié)省染料,500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。
2) 由于gelred具有良好的熱穩(wěn)定性,可以直接添加到熱的瓊脂糖溶液中而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以選擇將gelred儲(chǔ)液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。
3)gelred兼容所有常用的電泳緩沖溶液。
4)含有染料的預(yù)制凝膠溶液可以大量制備,在室溫下避光保存直至用完。
5)如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認(rèn)問(wèn)題是否與染料有關(guān)。如果染色后問(wèn)題依舊存在,則說(shuō)明問(wèn)題與染料無(wú)關(guān),請(qǐng)嘗試:降低瓊脂糖濃度;選用更長(zhǎng)的凝膠;延長(zhǎng)凝膠時(shí)間以保證邊緣清晰;改進(jìn)上樣技巧或選擇泡染法染色。
6)膠染法不適合預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠,對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠請(qǐng)使用泡染法。
二、泡染法(電泳后染色)
1. 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
2. 用H2O將gelred 10,000×水溶液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中,制成3× 染色液。(如將15μL gelred 10,000×水溶液和 5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。
3.將凝膠小心地放入合適的容器中,緩慢加入足量的3× 染色液浸沒(méi)凝膠。室溫振蕩染色30min左右,染色時(shí)間根據(jù)凝膠厚 度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對(duì)于含3.5~10%聚丙烯酰胺的凝膠,染色時(shí)間通常介于30min到1h,并隨聚丙烯酰胺含 量增加而延長(zhǎng)。
注意事項(xiàng)
1)用泡染法染色時(shí),染料用量較多。單次使用的染色液可重復(fù)使用3次左右。
2)3× gelred染色液可以大量制備,在室溫下避光保存直至用完。
關(guān)鍵字: Biotium原裝 41003 Gelred
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