Esculetin （6,7-dihydroxycoumarin）：一種通過(guò)抑制口腔鱗狀癌細(xì)胞中的 Sp1 的潛在癌癥化學(xué)預(yù)防劑。

Esculetin （6,7-Dihydroxycoumarin） 是一種香豆素化合物，已知可抑制多種類型人類癌細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，被認(rèn)為是一種很有前途的化療劑。
方法和結(jié)果：
本研究的目的是通過(guò)調(diào)節(jié)特異性蛋白 1 （Sp1） 研究 esculetin 對(duì)兩種口腔鱗狀細(xì)胞癌 （OSCC） 細(xì)胞系 HN22 和 HSC4 的抗增殖作用。我們通過(guò) MTS 法、 DAPI 染色、 膜聯(lián)蛋白 V 、 PI 染色、 RT-PCR 、 western blot 分析和免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè) HN22 和 HSC4 細(xì)胞中 esculetin 的凋亡作用。綜上所述，本研究的結(jié)果表明，esculetin 以劑量和時(shí)間依賴性方式對(duì) OSCC 細(xì)胞 （HN22 和 HSC4） 的生長(zhǎng)具有抗增殖作用。用 esculetin 處理 HN22 和 HSC4 細(xì)胞導(dǎo)致生長(zhǎng)顯著減少并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，隨后調(diào)節(jié) Sp1 和 Sp1 調(diào)節(jié)蛋白。
結(jié)論：
這表明 esculetin 通過(guò)抑制 HN22 和 HSC4 細(xì)胞中的 Sp1 抑制細(xì)胞生長(zhǎng)并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，表明它是口腔癌的有效抗癌候選藥物。

Esculetin 通過(guò)在共培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞和脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo)血紅素加氧酶-1 來(lái)抑制炎癥反應(yīng)。

方法和結(jié)果：
在本研究中，我們研究了 esculetin （6,7-Dihydroxycoumarin，ECT） 通過(guò)上調(diào)共培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞和脂肪細(xì)胞中血紅素加氧酶-1 （HO-1） 的抗炎作用。將 RAW264.7 巨噬細(xì)胞和分化的 3T3-L1 脂肪細(xì)胞在無(wú)血清 Dulbecco 改良的 Eagle 培養(yǎng)基中共培養(yǎng)，有或沒(méi)有 ECT 24 小時(shí)。在共培養(yǎng)上清液中測(cè)量一氧化氮 （NO） 、腫瘤壞死因子-α （TNF-α） 和單核細(xì)胞趨化蛋白-1 （MCP-1） 的產(chǎn)生。ECT 減少了 NO 、 TNF-α 和 MCP-1 的分泌。ECT 抑制共培養(yǎng)脂肪細(xì)胞中過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體 γ （PPARγ） 和 CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白 α （C/EBPα） 和共培養(yǎng)巨噬細(xì)胞中誘導(dǎo)型一氧化氮合酶 （iNOS） 的表達(dá)。此外，在共培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞和脂肪細(xì)胞中誘導(dǎo) HO-1 表達(dá)。盡管存在 ECT，但沉默 HO-1 表達(dá)會(huì)增加共培養(yǎng)細(xì)胞中 NO、TNF-α 和 MCP-1 的產(chǎn)生。
結(jié)論：
本研究證明，ECT 通過(guò) HO-1 表達(dá)抑制脂肪細(xì)胞和巨噬細(xì)胞相互作用中促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生，表現(xiàn)出抗炎特性。ECT 可能有可能改善肥胖癥的慢性炎癥。

Esculetin 通過(guò)抑制兔軟骨細(xì)胞中基質(zhì)金屬蛋白酶的產(chǎn)生來(lái)抑制蛋白多糖代謝。

使用兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的原代培養(yǎng)物研究了 6,7-二羥基香豆素 （esculetin） 的軟骨保護(hù)作用的可能機(jī)制。
方法和結(jié)果：
Esculetin （EST） 顯著抑制蛋白多糖耗竭和用重組人白細(xì)胞介素-1alpha 處理的兔軟骨細(xì)胞基質(zhì)層中脈沖標(biāo)記的 [35S] 蛋白多糖的釋放。基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑 1,10-菲咯啉也阻斷了蛋白多糖的耗竭和 [35S] 蛋白多糖的釋放。從這些結(jié)果來(lái)看，重組人白細(xì)胞介素-1α 誘導(dǎo)的蛋白多糖耗竭很可能是由基質(zhì)金屬蛋白酶介導(dǎo)的。盡管 esculetin 不直接抑制培養(yǎng)基中的膠原分解活性，但它顯著抑制前基質(zhì)金屬蛋白酶-1/間質(zhì)前膠原酶和前基質(zhì)金屬蛋白酶-3/前基質(zhì)溶血素 1 的產(chǎn)生，并伴有其 mRNA 的穩(wěn)態(tài)水平降低。
結(jié)論：
這些結(jié)果表明，esculetin 是抑制骨關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎軟骨破壞的有效候選藥物。

Esculetin 誘導(dǎo) 3T3-L1 細(xì)胞凋亡并抑制脂肪生成。

細(xì)胞系：3T3-L1 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
濃度：0、50、100、200、400、800 μM
孵育時(shí)間：6、12、24 或 48 小時(shí)
方法：
在 96 孔板中進(jìn)行測(cè)試。對(duì)于成熟的脂肪細(xì)胞，細(xì)胞接種（5000 個(gè)細(xì)胞/孔），生長(zhǎng)至匯合，誘導(dǎo)分化，并生長(zhǎng)至成熟。對(duì)于前脂肪細(xì)胞，使用 2500 個(gè)細(xì)胞/孔的接種密度，并在處理前將細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)夜。將細(xì)胞與 DMSO 或增加濃度的 esculetin 一起孵育 6、12、24 或 48 小時(shí)。對(duì)于匯合后的前脂肪細(xì)胞，使用 2500 個(gè)細(xì)胞/孔的接種密度，并在處理前將細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合。在脂肪生成的第 0 至 2 天、第 2 至 4 天和第 4 至 6 天，將 0.01% DMSO 載體中的七葉酸素（100 或 200 μM）與誘導(dǎo)培養(yǎng)基一起加入。培養(yǎng)基每 2 天更換一次。在測(cè)定細(xì)胞活力之前，用 DMEM/10% FBS 洗滌細(xì)胞 3 次，并在用每孔 20 μL MTS 測(cè)定溶液處理之前向每個(gè)孔中加入 100 μL DMEM/10% FBS 培養(yǎng)基。將細(xì)胞在 37 °C 下孵育 1 小時(shí);然后向每個(gè)孔中加入 25 μL 10% 十二烷基硫酸鈉。在讀板器中在 490 nm 處測(cè)量吸光度以確定甲臜濃度，其與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。

Esculetin（6,7-Dihydroxycoumarin） 是一種香豆素衍生物，通過(guò)啟動(dòng)線粒體依賴性細(xì)胞凋亡途徑，在體外和體內(nèi)對(duì)肝細(xì)胞癌發(fā)揮抗增殖活性。

動(dòng)物模型：植入 Hepa1-6 細(xì)胞

的 C57BL/6J 小鼠 配方：生理鹽水
劑量：200、400 或 700 mg/kg/天
給藥：腹腔注射