鹽酸棕櫚堿對結(jié)腸腺癌 HT-29 細胞的光動力作用。

鹽酸棕櫚堿 （PaH） 是一種來自傳統(tǒng)中藥 （TCM） 的天然活性化合物。本研究旨在評估 PaH 作為一種新的光敏劑在光照射下對結(jié)腸腺癌 HT-29 細胞的影響。
方法和結(jié)果：
首先，分別使用紫外-可見分光光度計和 RF-1500PC 分光光度計測量 PaH 的吸收和熒光光譜。使用 1,3-二苯基異苯并呋喃 （DPBF） 測定 PaH 的單線態(tài)氧 （（1）O2） 產(chǎn)量。使用 3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基四唑溴化物 （MTT） 測定法估計 PaH 的暗毒性。在不同的時間間隔檢測到 HT-29 細胞中 PaH 的細胞攝取。使用共聚焦激光熒光顯微鏡觀察 PaH 在 HT-29 細胞中的蝶基下定位。對于光動力處理，HT-29 細胞與 PaH 一起孵育，然后用 LED 光源的可見光 （470nm） 照射。使用 MTT 測定法在光動力處理后 24 小時研究光細胞毒性。使用膜聯(lián)蛋白 V/PI 染色的流式細胞術(shù)進行光動力處理后 18 小時觀察到細胞凋亡。結(jié)果表明，PaH 在 400 nm 至 500 nm 的可見光區(qū)域具有吸收峰，在 406 nm 處具有熒光發(fā)射峰，激發(fā)波長為 365 nm。來自 LED 光源的 470nm 可見光激活 PaH 以產(chǎn)生 （1）O2。暗毒性顯示，單獨 PaH 治療孵育 24 h 后對 HT-29 癌細胞和 NIH-3T3 正常細胞無細胞毒性。孵育 40 min 后，細胞對 PaH 的攝取達到最大值，PaH 位于線粒體中。PaH 的光動力處理對 HT-29 細胞具有顯著的光細胞毒性。細胞死亡率以 PaH 濃度依賴性和輕劑量依賴性方式顯著增加。進一步評估顯示，在光動力處理濃度為 5μM、能量密度為 10.8J/cm 的 PaH 后，HT-29 細胞的早期和晚期凋亡率顯著增加，分別高達 21.54% 和 5.39% （2）。
結(jié)論：
我們的研究結(jié)果表明，PaH 作為一種天然存在的光敏劑，在結(jié)腸腺癌的光動力治療中具有潛力。