以臺盼藍(lán)死/活細(xì)胞染色和顯微圖像識別為基本工作原理的細(xì)胞計數(shù)儀被廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)中，用于取代人工顯微鏡計數(shù)方法，具有操作簡便、測量快捷、參數(shù)多樣等優(yōu)點(diǎn)。本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)主要用于臺盼藍(lán)原理顯微圖像式細(xì)胞計數(shù)儀的活/死細(xì)胞濃度與活細(xì)胞比例測量項目的校準(zhǔn)或相關(guān)檢測測量質(zhì)量評價等工作。

一、 樣品制備

本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)候選物采用模擬臺盼藍(lán)原理的活/死細(xì)胞的高分子聚合物微球為原料，通過特殊工藝進(jìn)行處理，得到一定細(xì)胞濃度與比例的微球溶液，在無菌潔凈環(huán)境條件下通過移液器進(jìn)行分裝。

二、 溯源性及定值方法

本溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的活/死細(xì)胞濃度與活細(xì)胞比例采用顯微鏡直接計數(shù)法進(jìn)行定值。通過使用顯微鏡人工鏡檢計數(shù)細(xì)胞計數(shù)板固定體積內(nèi)總細(xì)胞模擬微球和活/死細(xì)胞模擬微球的數(shù)量，通過計算得到活/死細(xì)胞濃度值與活細(xì)胞比例值。通過使用經(jīng)確認(rèn)的、滿足計量學(xué)特性要求的測量方法和經(jīng)檢定校準(zhǔn)的顯微鏡、細(xì)胞計數(shù)板等計量器具，確保本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的量值溯源至實體數(shù)基本單位“一”（符號：1）。

三、 特性量值及不確定度

所賦特性量值的不確定度綜合考慮了顯微鏡細(xì)胞板直接計數(shù)法測量重復(fù)性、均勻性和穩(wěn)定性等不確定度分量。

四、 均勻性及穩(wěn)定性評估

參照 JJF1343 國家計量技術(shù)規(guī)范（等效 ISO 指南 35），采用顯微鏡檢方法，按照隨機(jī)抽樣原則對樣品進(jìn)行均勻性評估，方差分析結(jié)果表明，樣品均勻性良好；采用相同測量方法，按照先密后疏的原則對樣品進(jìn)行穩(wěn)定性評估，趨勢分析結(jié)果表明，4℃下可以長期穩(wěn)定保存，37℃下可以穩(wěn)定保存31 天，因此，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)貯存在 4℃下，建議優(yōu)先冰袋運(yùn)輸，環(huán)境溫度 37℃以下也可常溫運(yùn)輸。

該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)自定值之日起，有效期為 12 個月，研制單位將繼續(xù)跟蹤監(jiān)測該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性，有效期內(nèi)如發(fā)現(xiàn)量值變化，將及時通知用戶。

五、 包裝、貯存及使用

1.包裝與貯存：本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)采用 3mL 具塞玻璃瓶包裝，每瓶 1mL；置于 4℃冰箱中低溫保存，切勿冷凍。

2.使用：本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可在冰袋保護(hù)下和常溫條件（環(huán)境溫度低于 37℃）運(yùn)輸。使用前必須平衡至室溫，通過反復(fù)上下顛倒和搖動保證溶液混合均勻，并嚴(yán)格按照細(xì)胞計數(shù)儀的操作說明。