金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是引起細(xì)菌性食物中毒的重要致病菌之一，也是引起奶牛乳房炎的主要因素之一，在乳及乳制品中有較高的檢出率。本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可用于乳及乳制品中金黃色葡萄球菌定量檢測(cè)的方法驗(yàn)證和微生物實(shí)驗(yàn)室測(cè)量質(zhì)量控制，也可以用于金黃色葡萄球菌選擇性培養(yǎng)基的生長(zhǎng)率評(píng)價(jià)，為評(píng)價(jià)結(jié)果的可靠性提供計(jì)量溯源保障。?

一、 樣品制備?

選取金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）標(biāo)準(zhǔn)菌株（菌株編號(hào) ATCC 6538P），培養(yǎng)后與保護(hù)劑混合均勻，用移液器分裝至西林瓶進(jìn)行凍干。隨后添加奶粉并壓蓋密封。?

二、 溯源性及定值方法?

本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)由多家單位采用金黃色葡萄球菌涂布平板法（見(jiàn)附件 A）進(jìn)行合作定值。通過(guò)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行 10 倍系列稀釋后，對(duì)可進(jìn)行計(jì)數(shù)的培養(yǎng)基平板上的菌落數(shù)量進(jìn)行計(jì)數(shù)，采用公式計(jì)算得到金黃色葡萄球菌數(shù)量，其量值單位為 CFU/g（CFU，菌落形成單位 Colony-Forming Units）。通過(guò)使用滿足計(jì)量學(xué)特性要求、經(jīng)確認(rèn)的定量測(cè)量方法和經(jīng)檢定校準(zhǔn)的質(zhì)量、容量等計(jì)量器具，確保本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的量值溯源至實(shí)體數(shù)基本單位“一”（符號(hào)：1）以及國(guó)家法定計(jì)量單位克（g）。?

三、 特性量值及不確定度

四、 均勻性及穩(wěn)定性評(píng)估?

參照 JJF1343 國(guó)家計(jì)量技術(shù)規(guī)范（等效 ISO 指南 35），采用金黃色葡萄球菌涂布平板法，按照隨機(jī)抽樣原則對(duì)樣品進(jìn)行均勻性評(píng)估，方差分析結(jié)果表明，樣品均勻性良好；采用相同測(cè)量方法，按照先密后疏的原則對(duì)樣品進(jìn)行穩(wěn)定性評(píng)估，趨勢(shì)分析結(jié)果表明，-20℃下可以長(zhǎng)期穩(wěn)定保存，4℃下可以穩(wěn)定保存 7 天。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)自定值之日起，有效期為 12 個(gè)月，研制單位將繼續(xù)跟蹤監(jiān)測(cè)該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性，有效期內(nèi)如發(fā)現(xiàn)量值變化，將及時(shí)通知用戶。?

五、 包裝、貯存及使用?

1.包裝與保存：本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)采用棕色西林瓶包裝，-20℃避光保存。每瓶 0.50 g，計(jì)算時(shí)按照 0.50g 計(jì)算。采用干冰運(yùn)輸，收到后請(qǐng)于-20℃冰箱中保存。?

2.使用：本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)開瓶后應(yīng)當(dāng)一次性完全使用。使用前從-20℃取出并在室溫(20℃)下平衡 10分鐘，用天平精確稱量(4.49±0.01) g 無(wú)菌蒸餾水復(fù)溶凍干的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。用戶可參考附件 A 奶粉中金黃色葡萄球菌計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測(cè)量方法，使用 Baird-Parker 培養(yǎng)基進(jìn)行測(cè)試。?

3.本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)含有微生物，使用前應(yīng)佩戴口罩和乳膠手套；使用時(shí)應(yīng)注意防護(hù)，避免吸入或與皮膚接觸；使用后的剩余樣品、包裝瓶及取樣吸頭等消耗品應(yīng)按生物污染廢棄物進(jìn)行高壓滅菌處置。