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人腺病毒D32型探針法熒光定量PCR試劑盒Human Adenovirus D32(HAdV-D32)
  • 人腺病毒D32型探針法熒光定量PCR試劑盒Human Adenovirus D32(HAdV-D32)

人腺病毒D32型探針法熒光定量PCR試劑盒Human Adenovirus D32(HAdV-D32) 新品

價格 3990
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最小起訂量 1盒
發(fā)貨地 上海
更新日期 2024-12-24
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產(chǎn)品詳情

中文名稱:人腺病毒D32型探針法熒光定量PCR試劑盒Human Adenovirus D32(HAdV-D32)品牌: 晶風(fēng)生物
產(chǎn)地: 上海保存條件: -20℃
純度規(guī)格: 99產(chǎn)品類別: PCR檢測試劑盒 熒光定量探針法PCR試劑盒
貨號: 1593038用途: 科研實(shí)驗(yàn)
產(chǎn)品規(guī)格: 50次/盒
2024-12-24 人腺病毒D32型探針法熒光定量PCR試劑盒Human Adenovirus D32(HAdV-D32) 1盒/3990RMB 3990 晶風(fēng)生物 上海 -20℃ 99 PCR檢測試劑盒 熒光定量探針法PCR試劑盒

人腺病毒D32型探針法熒光定量PCR試劑盒Human Adenovirus D32(HAdV-D32)的特點(diǎn)

1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。

2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。

3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。

4. 特異性高,不會跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。

5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研。

15.jpg


包裝規(guī)格及成份(具體信息詳見説明書,以説明書為準(zhǔn))

成份編號十孔盒包裝
探針法 qRT-PCR 緩沖液A500μL(黃蓋)
探針法 qRT-PCR 酶混合液B100μL(紅蓋)
熒光 PCR 專用模板稀釋液C1 mL(黃蓋)
探針法 qRT-PCR引物混合液D100 μL(白蓋)
 qRT-PCR 探針E50 μL(棕色管)
探針法 qRT-PCR陽性對照(1×10E8 拷貝/μL)F50 μL(黃蓋)
使用手冊G一份

人腺病毒D32型探針法熒光定量PCR試劑盒Human Adenovirus D32(HAdV-D32)使用方法

一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,

千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,

只提供無傳染性的 DNA 片段作為陽性對照。

1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 專用模板稀釋液,最好用帶芯槍頭,下同)。

3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

6.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

二、樣品 RNA 的制備

7. 如果有N個樣品,最好設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋

液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。

8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈送20次免RNA提取

的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。

三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)

9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。

如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個PCR管,

其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),

1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。

10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存

好后最后加):

    成分樣品管N+2RT-PCR陰性對照管標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品管
    2-7 管)
    探針法qPCR緩沖液各 10 μL10 μL各 10 μL
    探針法 qPCR 酶混合液各 2 μL2 μL各 2 μL
    qRT-PCR探針各 1 μL1 μL各 1 μL
    探針qRT-PCR
    引物混合液
    各 2 μL 2 μL各 2 μL
    待測樣品 RNA 模板各 5 μL----
    超純水--5 μL--
    第 7 步所得標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品稀釋液(2-7 號)----各5 μL(2號樣到2號管,3號樣到3 號管…)
    1. 蓋上蓋子后上機(jī),按下面參數(shù)進(jìn)行 qRT-PCR:

    過程溫度時間
    逆轉(zhuǎn)錄50℃30 min
    預(yù)變性94℃10 min
    qRT-PCR 反應(yīng)(40 個循環(huán))94℃15 sec
    60℃1 min(采集 FAM 通道的熒光信號)

四、數(shù)據(jù)處理

11.如果把本試劑盒用于定量檢測,則以陽性對照濃度的log值為橫軸,以Ct值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品的Ct值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上推算出樣品核酸濃度的log值,再推算出其濃度。

12.如果把本試劑盒用于定性檢測,只判斷陽性或陰性,則陰性對照Ct必須大于或等于40。陽性對照必須有熒光對數(shù)增長,有典型擴(kuò)增曲線,Ct值應(yīng)該小于或等于39。對待測樣品,如果其Ct大于或等于40則為陰性,如果小于或等于39則為陽性。如果在39-40之間,則重復(fù)一次。重復(fù)實(shí)驗(yàn)的Ct值如果大于或等于40則為陰性,如果小于40,則為陽性。


人腺病毒D32型探針法熒光定量PCR試劑盒Human Adenovirus D32(HAdV-D32)【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存

有效期 12 個月。


人腺病毒D32型探針法熒光定量PCR試劑盒Human Adenovirus D32(HAdV-D32)注意事項(xiàng)

1操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行;

2試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,完全混勻并短暫離心;

3反應(yīng)液應(yīng)避光保存;

4反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

5使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服;

6樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行,以免交叉污染;

7實(shí)驗(yàn)完畢后用10%次氯酸或75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;

8試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待,并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理。


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公司簡介

上海晶風(fēng)生物科技有限公司擁有一個蓬勃朝氣的年輕團(tuán)隊(duì),是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域,提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛小熬эL(fēng)生物”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)享有一定的聲譽(yù),深得新老客戶厚愛。本著“服務(wù)、誠信、進(jìn)取”的精神,堅(jiān)持溝通你我,創(chuàng)新服務(wù),為國內(nèi)外廣大用戶提供產(chǎn)品和服務(wù)。
成立日期 2021-08-16 (4年) 注冊資本 100萬人民幣
員工人數(shù) 1-10人 年?duì)I業(yè)額 ¥ 100萬以內(nèi)
主營行業(yè) 化學(xué)試劑,醫(yī)藥原料 經(jīng)營模式 貿(mào)易,工廠,試劑
  • 上海晶風(fēng)生物科技有限公司
VIP 1年
  • 公司成立:4年
  • 注冊資本:100萬人民幣
  • 企業(yè)類型:有限責(zé)任公司(自然人投資或控股)
  • 主營產(chǎn)品:細(xì)胞,原代細(xì)胞,完全培養(yǎng)基,Elisa試劑盒,PCR試劑盒
  • 公司地址:青浦區(qū)朱家角鎮(zhèn)康業(yè)路388弄1-14號4幢一層
詢盤

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2024-12-24
¥3980
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2024-12-24
詢價
上海帛科生物技術(shù)有限公司
2024-09-10
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