細(xì)胞轉(zhuǎn)染是外源基因進(jìn)入真核細(xì)胞的一種重要方法。這些外源DNA或RNA通過(guò)轉(zhuǎn)染試劑的包裝輔助,才能順利進(jìn)入細(xì)胞發(fā)揮相應(yīng)的作用,進(jìn)而研究其細(xì)胞功能及相應(yīng)的影響。riboFECT? CP轉(zhuǎn)染試劑是一種專門用于核酸分子的轉(zhuǎn)染試劑,極具生物相容性、轉(zhuǎn)染效率高、細(xì)胞毒性小,適合各種核酸分子,如siRNA、miRNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),不推薦用于質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,突出優(yōu)勢(shì)是無(wú)需進(jìn)行培養(yǎng)基更換操作,尤其適合各種高通量細(xì)胞篩選實(shí)驗(yàn),方便、快速、高效。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1、高轉(zhuǎn)染效率,適用于大多數(shù)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)
2、低細(xì)胞毒性,對(duì)細(xì)胞傷害小,對(duì)大多數(shù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染均無(wú)需更換培養(yǎng)液
3、操作簡(jiǎn)單方便,可反向轉(zhuǎn)染,適合高通量篩選實(shí)驗(yàn)
技術(shù)支持
高轉(zhuǎn)染效率,低細(xì)胞毒性,只為更佳的基因沉默效率
轉(zhuǎn)染效率對(duì)基因沉默實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要,riboFECT? CP轉(zhuǎn)染試劑極具生物相容性,能夠顯著提高siRNA、miRNA的轉(zhuǎn)染效率,保證RNAi實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行,并能夠降低各種核酸分子使用濃度,目前已成功應(yīng)用于各種真核細(xì)胞系的核酸轉(zhuǎn)染,如HeLa、A549、293T、NIH/3T3、HepG2、HUVEC等細(xì)胞系。
圖1 分別用riboFECT? CP轉(zhuǎn)染HUVEC(A)和Hela(B)細(xì)胞,采用riboMONITOR?檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率
圖2 用riboFECT? CP和Reagent L分別轉(zhuǎn)染p65 siRNA于HUVEC和Hela細(xì)胞,采用qPCR方法檢測(cè)其基因沉默效率。
結(jié)果顯示riboFECT? CP轉(zhuǎn)染效果更好,且隨著轉(zhuǎn)染試劑用量升高,轉(zhuǎn)染效果越好,基因沉默效率也進(jìn)一步提高。
操作流程簡(jiǎn)單,可反向轉(zhuǎn)染,非常適合高通量篩選研究
僅需簡(jiǎn)單地將siRNA或miRNA與buffer混合后,加入riboFECT? CP形成復(fù)合物,室溫孵育0~10分鐘,再加入一定體積的培養(yǎng)液,隨后加入完全細(xì)胞培養(yǎng)基中即可,中途無(wú)需更換培養(yǎng)基。
反向轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中,先將siRNA或miRNA與riboFECT? CP混合,加至培養(yǎng)孔以形成轉(zhuǎn)染復(fù)合物,再將細(xì)胞加入至培養(yǎng)孔中進(jìn)行反向轉(zhuǎn)染,以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞高通量篩選。其中,轉(zhuǎn)染混合物制備后可保存較長(zhǎng)時(shí)間,即允許提前準(zhǔn)備和儲(chǔ)存,非常適合自動(dòng)化高通量篩選系統(tǒng)。
關(guān)鍵字: 轉(zhuǎn)染試劑;RNA;
廣州市銳博生物科技有限公司(簡(jiǎn)稱銳博生物)成立于2004年,是一家由諾貝爾獎(jiǎng)獲得者和國(guó)家重大人才工程入選者領(lǐng)銜的、以核酸技術(shù)為核心的國(guó)家火炬計(jì)劃重點(diǎn)高新技術(shù)企業(yè)?;谑澜珙I(lǐng)先的寡核苷酸和mRNA技術(shù),銳博生物致力于提供高品質(zhì)的各類寡核苷酸和mRNA產(chǎn)品(包括但不限于ASO、siRNA、CpG、Aptamer、crRNA、和tracrRNA)。此外,公司建立了符合或超過(guò)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的寡核苷酸CDMO/CMO服務(wù)平臺(tái)、mRNA/LNP制劑開發(fā)和制造平臺(tái),能夠?yàn)楹怂崴幬镩_發(fā)的各個(gè)階段提供一站式寡核苷酸/mRNA CDMO服務(wù)、以及LNP制劑開發(fā)和制造服務(wù),為國(guó)內(nèi)外超過(guò)5000家機(jī)構(gòu)提供產(chǎn)品或服務(wù),現(xiàn)已躋身于全球核酸藥CDMO的知名企業(yè)行列。銳博生物擁有60多項(xiàng)自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)核酸技術(shù)發(fā)明,獲得了廣東省核酸藥物工程實(shí)驗(yàn)室、廣東省核酸醫(yī)藥工程技術(shù)研究中心、NMPA頒發(fā)的寡核酸藥品生產(chǎn)許可等資質(zhì),是中國(guó)核酸行業(yè)的領(lǐng)軍企業(yè)之一。