RNA EMSA電泳凝膠遷移阻滯試劑盒

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發(fā)貨地	上海
更新日期	2024-09-29

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產(chǎn)品詳情

中文名稱:RNA EMSA凝膠遷移阻滯試劑盒	英文名稱:RNA EMSA Kit
品牌: Engibody	產(chǎn)地: 美國(guó)
產(chǎn)品類別: RNA和蛋白互作研究產(chǎn)品
貨號(hào): IF9502	用途范圍: RNA和RNA結(jié)合蛋白互作的研究
規(guī)格: 100個(gè)反應(yīng)

品名：Smart-REMSA? RNA EMSA Kit，貨號(hào)：IF9502，品牌：Engibody

訂購(gòu)及技術(shù)咨詢：朱小鷗，13817407320(微信同號(hào))

NIH、麻省理工、哈佛、斯坦福等世界名校課題組青睞并長(zhǎng)期采購(gòu)的RNA EMSA試劑盒！

Smart-REMSA? RNA EMSARNA電泳凝膠遷移阻滯實(shí)驗(yàn)試劑盒

RNA EMSA技術(shù)的現(xiàn)狀分析

RNA EMSA實(shí)驗(yàn)所需試劑較多，加上生物素探針的合成和標(biāo)記、蛋白樣本的制備、RNA EMSA凝膠的配制、帶正電荷的尼龍膜(特別昂貴)、RNA EMSA專用電泳液和RNA EMSA專用轉(zhuǎn)膜液等，費(fèi)用不小。還需要一些設(shè)備如電泳儀與轉(zhuǎn)膜儀、化學(xué)發(fā)光成像儀等。

從市場(chǎng)逐個(gè)購(gòu)買試劑，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，費(fèi)用不菲，且試劑與試劑之間難以協(xié)調(diào)匹配，遇到各種技術(shù)問(wèn)題也無(wú)法解決。

有了復(fù)名表觀遺傳學(xué)的RNA EMSA試劑盒，這些問(wèn)題全部迎刃而解，最小的費(fèi)用和時(shí)間搞定RNA EMSA實(shí)驗(yàn)。

而且實(shí)驗(yàn)者跟隨本RNA EMSA試劑盒操作步驟可熟悉與掌握該項(xiàng)技術(shù)，節(jié)約很多時(shí)間和費(fèi)用，遇到問(wèn)題可以找復(fù)名表觀遺傳學(xué)技術(shù)支持輕松解決，文末有技術(shù)支持的微信二維碼，可以隨時(shí)添加好友。

Smart-REMSA? RNA EMSA試劑盒的4大優(yōu)勢(shì)
1、本試劑盒適用于貼壁細(xì)胞、懸浮細(xì)胞、動(dòng)物組織、植物組織及純化后的重組蛋白，是個(gè)真正的多合一Kit。

2、本試劑盒包含適用于驗(yàn)證型RNA-EMSA、競(jìng)爭(zhēng)型RNA-EMSA及SuperShift超遷移RNA-EMSA的試劑。

3、本試劑盒采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)，而非采用放射性同位素檢測(cè)，具有高靈敏度，且對(duì)實(shí)驗(yàn)人員健康無(wú)任何傷害。

4、本說(shuō)明書是一本RNA EMSA實(shí)驗(yàn)的全面技術(shù)手冊(cè)，透徹分析了REMSA實(shí)驗(yàn)中的重點(diǎn)、難點(diǎn)，對(duì)各種重點(diǎn)難點(diǎn)問(wèn)題都有針對(duì)性的解決方案。同時(shí)包含了表觀遺傳學(xué)的基礎(chǔ)知識(shí)和基本脈絡(luò)，匯總了RNA與各種蛋白互作的詳細(xì)信息?？赐赀@本保姆級(jí)說(shuō)明書，所有疑難都會(huì)迎刃而解，RNA EMSA盡在掌握之中。

第一部分：背景簡(jiǎn)介及應(yīng)用場(chǎng)景

RNA與蛋白質(zhì)相互作用分析
95%的人類基因組實(shí)際上并不編碼蛋白質(zhì)，而是產(chǎn)生大量非編碼RNA，這些RNA在生命的生長(zhǎng)和發(fā)育中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用，與艾滋病病毒/艾滋病、白血病、糖尿病等各種疾病密切相關(guān)，并參與干細(xì)胞發(fā)育和表觀遺傳學(xué)的調(diào)節(jié)。RNA-蛋白質(zhì)復(fù)合物驅(qū)動(dòng)幾乎所有細(xì)胞過(guò)程中基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)，包括剪接、核輸出、mRNA穩(wěn)定性和蛋白質(zhì)翻譯。因此，對(duì)轉(zhuǎn)錄后調(diào)控網(wǎng)絡(luò)和機(jī)制的理解取決于確定這些過(guò)程中RNA結(jié)合的變化。

RNA結(jié)合蛋白通過(guò)與單鏈RNA結(jié)合基序（RBM）結(jié)合來(lái)控制細(xì)胞生物學(xué)的許多方面。然而，RBM可以隱藏在其局部RNA結(jié)構(gòu)中，從而抑制RNA與蛋白質(zhì)的相互作用。

RNA與蛋白質(zhì)相互作用的研究越來(lái)越受到科學(xué)家的關(guān)注，成為表觀遺傳學(xué)研究的熱點(diǎn)。

目前RNA研究的國(guó)自然熱點(diǎn)主要是mRNA、LncRNA、miRNA、circRNA。
RNA-EMSA（RNA Electrophoretic Mobility Shift Assay），凝膠遷移實(shí)驗(yàn)又稱凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)或電泳遷移率改變實(shí)驗(yàn)，其原理是RNA-binding proteins (RBPs) 蛋白-RNA探針復(fù)合物在聚丙烯酰胺凝膠電泳中比自由探針遷移更慢，是一種用于體外In Vitro檢測(cè)RNA-binding proteins (RBPs) 蛋白與RNA片段相互作用的技術(shù)。

1、RNA-EMSA和RIP、CLIP、RNA Pull-down，這四種研究RNA-蛋白互作技術(shù)的內(nèi)在區(qū)別是什么？
1)、RNA-EMSA———RNA電泳凝膠遷移阻滯實(shí)驗(yàn)(Electrophoretic Mobility Shift Assay)，In Vitro體外通過(guò)RNA探針檢測(cè)目的蛋白，反向驗(yàn)證了RIP。是經(jīng)典方法。

2)、RIP———RNA蛋白免疫沉淀技術(shù)是一種用于在細(xì)胞天然背景下In Vivo體內(nèi)探測(cè)蛋白質(zhì)-RNA 相互作用的技術(shù)。這種方法可以用于檢測(cè)特定RBP蛋白與RNA的結(jié)合水平。

3)、RNA Pull-down———In Vitro體外通過(guò)RNA探針捕獲目的蛋白或其他候選蛋白，獲取蛋白后進(jìn)行WB檢測(cè)或MS質(zhì)譜鑒定。也是經(jīng)典方法。

4)、CLIP———這是近年來(lái)的新興技術(shù)，紫外交聯(lián)RNA-RBP免疫沉淀技術(shù)，可以分為HITS-CLIP(CLIP-Seq)、PAR-CLIP、iCLIP、miCLIP。

2、RNA-EMSA和RIP的聯(lián)合分析，相互驗(yàn)證
這是經(jīng)典研究策略，RIP是體內(nèi)In Vivo研究RNA和蛋白互作，RNA-EMSA是體外In Vitro進(jìn)行RNA和蛋白互作的驗(yàn)證，互相印證。

第二部分：技術(shù)原理和技術(shù)流程

技術(shù)原理：

當(dāng)RNA探針與蛋白樣本混合孵育時(shí)，樣本中可以與RNA探針結(jié)合的蛋白與探針形成蛋白-探針復(fù)合物，這種復(fù)合物由于分子量很大，在進(jìn)行PAGE電泳時(shí)遷移較慢，而沒(méi)有結(jié)合蛋白的自由RNA探針則遷移較快，跑在凝膠的前沿。孵育的樣本在進(jìn)行PAGE電泳分離并轉(zhuǎn)膜（正電荷尼龍膜）后，蛋白-探針復(fù)合物會(huì)在膜靠前的自由探針位置后方再形成一條目的條帶，說(shuō)明有蛋白與目標(biāo)探針發(fā)生了互作。

技術(shù)流程：

根據(jù)實(shí)驗(yàn)者研究的靶標(biāo)蛋白類型不同，采用3種略有不同的技術(shù)流程
1、驗(yàn)證型RNA EMSA
如果樣本是純化后的重組蛋白，沒(méi)有其他雜蛋白的干擾，只需要設(shè)計(jì)含有陰性對(duì)照的最簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)方案即可。

2、競(jìng)爭(zhēng)型RNA EMSA
如果樣本是細(xì)胞漿或者細(xì)胞核蛋白提取物，樣本里除了目的蛋白，還有很多其他各種蛋白，容易和RNA探針發(fā)生非特異性結(jié)合，這時(shí)就需要設(shè)計(jì)野生型冷探針競(jìng)爭(zhēng)對(duì)照組和突變型冷探針競(jìng)爭(zhēng)對(duì)照組來(lái)排除非特異性結(jié)合。

3、SuperShift超遷移RNA EMSA
如果還想對(duì)目的蛋白進(jìn)行進(jìn)一步確定，可以在蛋白樣本中加入探針及靶標(biāo)蛋白的抗體，形成三元復(fù)合物，這樣電泳遷移率進(jìn)一步變慢，得到超遷移條帶。

第四部分：RNA EMSA實(shí)驗(yàn)結(jié)果與示例展示
展示2個(gè)結(jié)果示例，如下列圖片所示：

	RNA探針序列舉例
名稱	序列	用途
COX2-3′UTR (49 bps)	5′-UCUAUUAAUUUAAUUAUUUAAUAAUAUUUAUAUUAAACUCCUUAU-3′
WEE1-EXON2 (49 bps)	5′-GAAACAGACCUGCUAAGGUGUGUGAAGAGGCUGGAUGGAUGCAGAACG-3′
備注：	bps: Base pairs; 3′UTR: 3′-Untranslated Region

RNA EMSA
The RNA-EMSA assay
（A）RNA寡核苷酸探針。
（B）（1:1）在1×TBE緩沖液中滴加1μm探針。
（C&D）與重組HuR (RNA結(jié)合蛋白)相比，用非變性粗細(xì)胞裂解物運(yùn)行固定濃度的探針（62.5 nM）。（C&D）中的數(shù)據(jù)代表了至少兩個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)。

RNA EMSA
RNA-EMSA assay of the IRE/IRP example
RAW264.7巨噬細(xì)胞IRE結(jié)合活性的鐵依賴性調(diào)節(jié)。10⁷個(gè)細(xì)胞制備細(xì)胞質(zhì)裂解物，IRE探針通過(guò)RNA-EMSA進(jìn)行分析。IRE/IRP1和IRE/IRP2復(fù)合物以及游離IRE探針的位置由箭頭指示。

第五部分：RNA-EMSA試劑盒組分清單
（共計(jì)13個(gè)組分，均可單獨(dú)購(gòu)買）

編號(hào)	組分名稱	數(shù)量	保存	注意事項(xiàng)
下列組分收到后需儲(chǔ)存在 4 °C中。
REMSA-001	10×蛋白與RNA探針結(jié)合反應(yīng)液	1 mL	+4 °C
REMSA-002	REMSA專用封閉液	120 mL	+4 °C
REMSA-003	REMSA專用10×洗滌液	250 mL	+4 °C
REMSA-004	REMSA檢測(cè)反應(yīng)液	120 mL	+4 °C
EMSA-005	ECL發(fā)光液A液	50 mL	+4 °C
EMSA-006	ECL發(fā)光液B液	50 mL	+4 °C
下列組分收到后必須要儲(chǔ)存在 -20 °C中
REMSA-008	REMSA專用Loading Buffer（5×）	3*1 mL	-20 °C
REMSA-009	Streptavidin Conjugated HRP	100 μL	-20 °C
REMSA-010	50% Glycerol	500 μL	-20 °C
REMSA-011	TCEP (dissolve in nuclease-free water to 100mM)	Powder, 5mg	-20 °C
REMSA-012	2 M KCl	500 μL	-20 °C
REMSA-013	tRNA (10 mg/mL)	50 μL	-20 °C
REMSA-014	Streptavidin Conjugated HRP 信號(hào)放大劑	100 μL	-20 °C

訂購(gòu)及技術(shù)咨詢：朱小鷗，13817407320(微信同號(hào))

關(guān)鍵字： RNA EMSA;RBP;RNA binding protein;EMSA;RNA電泳凝膠遷移阻滯實(shí)驗(yàn);

公司簡(jiǎn)介

復(fù)名表觀遺傳學(xué)（上海復(fù)名醫(yī)療科技有限公司），專注于表觀遺傳學(xué)研究工具的開(kāi)發(fā)和表觀技術(shù)服務(wù)的提供。經(jīng)過(guò)多年和全球著名大學(xué)表觀研究領(lǐng)域?qū)＜医淌诘慕涣骱吞接?，積累經(jīng)驗(yàn)，精準(zhǔn)解決表觀研究工具領(lǐng)域的痛點(diǎn)難點(diǎn)，在表觀基因組學(xué)、表觀轉(zhuǎn)錄組學(xué)和表觀蛋白組學(xué)領(lǐng)域均開(kāi)發(fā)了一系列研究試劑盒并提供表觀技術(shù)服務(wù)，和哈佛大學(xué)，華盛頓大學(xué)，斯坦福大學(xué)，麻省理工學(xué)院，UCSC，UCSF，HHMI，德國(guó)海德堡大學(xué)，法國(guó)國(guó)家健康與醫(yī)學(xué)研究院inserm等世界名校均建立了密切的合作和交流，所開(kāi)發(fā)的抗體，試劑，試劑盒受到了全球客戶的歡迎。 Engibody為復(fù)名表觀遺傳學(xué)旗下品牌，所開(kāi)發(fā)的抗體，試劑，表觀試劑盒在全球范圍內(nèi)銷售，受到眾多世界著名大學(xué)課題組老師及醫(yī)藥500強(qiáng)巨頭的認(rèn)可和喜愛(ài)。公司地址: 上海市嘉定區(qū)嘉定工業(yè)區(qū)永盛路1218號(hào)金元大廈908室。訂購(gòu)請(qǐng)咨詢：13817407320(微信同號(hào))

成立日期	2019-03-22 （6年）	注冊(cè)資本	200萬(wàn)
員工人數(shù)	1-10人	年?duì)I業(yè)額	￥ 100萬(wàn)-300萬(wàn)
主營(yíng)行業(yè)	抗體,癌癥研究,蛋白組學(xué),分子生物學(xué),細(xì)胞生物學(xué)	經(jīng)營(yíng)模式	試劑,服務(wù)

上海復(fù)名醫(yī)療科技有限公司

非會(huì)員

公司成立：6年
注冊(cè)資本：200萬(wàn)
企業(yè)類型：有限責(zé)任公司
主營(yíng)產(chǎn)品：抗體，試劑盒
公司地址：上海市嘉定區(qū)嘉定工業(yè)區(qū)永盛路1218號(hào)金元大廈908室

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