QIAGEN Plasmid Mega Kit (25) 是一款用于純化轉染級質(zhì)粒DNA的試劑盒，它能夠快速純化至多2.5 mg的轉染級純質(zhì)?；蚩滤官|(zhì)粒DNA。該試劑盒利用重力流陰離子交換柱技術，純化得到的DNA純度相當于經(jīng)過兩次CsCl梯度離心得到的DNA純度。它具有以下特點：

1. 高產(chǎn)量質(zhì)粒DNA：該試劑盒能夠從500 ml至2.5 L的培養(yǎng)基中純化獲得多達2.5 mg的高拷貝質(zhì)粒DNA。

2. 經(jīng)濟的制備方法：QIAGEN Plasmid Mega Kit 提供了一種成本效益高的質(zhì)粒DNA制備方法。

3. 使用LyseBlue：試劑盒中包含LyseBlue，能夠獲得最佳的裂解效果和最大的DNA產(chǎn)量。

4. 適合多種應用：純化的質(zhì)粒DNA適用于多種應用，如轉染、克隆和體外轉錄。

5. 避免使用有毒物質(zhì)：整個純化過程避免使用苯酚、氯仿、溴化乙錠和CsCl等有毒物質(zhì)，減少對用戶和環(huán)境的危害。

操作流程包括將中性細菌裂解物直接置于QIAfilter Cartridge內(nèi)孵育，數(shù)秒內(nèi)即可過濾澄清，然后將澄清的裂解物上樣至陰離子交換純化柱，在適當?shù)牡望}和pH條件下，質(zhì)粒DNA會選擇性地結合上去。利用中鹽濃度的洗滌液去除RNA、蛋白質(zhì)、代謝物及其他低分子量雜質(zhì)，使用高鹽緩沖液洗脫超純的質(zhì)粒DNA。利用異丙醇沉淀對DNA進行濃縮并脫鹽，并通過離心收集。