常春藤 （Hedera helix L.） 葉子中的 Hederagenin 通過線粒體途徑誘導(dǎo)人 LoVo 結(jié)腸細(xì)胞凋亡。

結(jié)直腸癌已成為全世界癌癥發(fā)病率和死亡率的主要原因之一。Hederagenin 是從常春藤 （Hedera helix L.） 的葉子中分離的齊墩果酸衍生物，已被證明具有潛在的抗腫瘤活性。該研究旨在評(píng)估 Hederagenin 是否能誘導(dǎo)人結(jié)腸癌 LoVo 細(xì)胞凋亡并探索可能的機(jī)制。
方法和結(jié)果：
MTT 法評(píng)價(jià)細(xì)胞活力，Annexin V-FITC/PI 法和 Hoechst 33342 核染色法測(cè)定細(xì)胞凋亡和線粒體膜電位。DCFH-DA 熒光染色和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) ROS 生成。對(duì)細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)進(jìn)行實(shí)時(shí) PCR 和 western blot 分析。 MTT 測(cè)定顯示 Hederagenin 可以以濃度依賴性和時(shí)間依賴性方式顯著抑制 LoVo 細(xì)胞的活力，IC50 在 24 小時(shí)為 1.39 μM，在 48 小時(shí)為 1.17 μM。在 Annexin V-FITC/PI 測(cè)定中，通過誘導(dǎo) Hederagenin （1 和 2 μM） 使細(xì)胞凋亡率顯著增加至 32.46% 和 81.78%。Hederagenin 還可以通過熒光顯微鏡下 Hoechst 33342 核染色誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的核變化特征。DCFH-DA 熒光染色和流式細(xì)胞術(shù)顯示，Hederagenin 可顯著增加 LoVo 細(xì)胞中 ROS 的生成。Real-time PCR 顯示 Hederagenin 誘導(dǎo) Bax 上調(diào)，下調(diào) Bcl-2 、 Bcl-xL 和 Survivin 。Western blotting 分析顯示，Hederagenin 降低細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白 Bcl-2 、 procaspase-9 、 procaspase-3 和 polyADP-核糖聚合酶 （PARP） 的表達(dá)，而 Bax 、 caspase-3 、 caspase-9 的表達(dá)升高。然而，caspase-8 沒有顯著變化。
結(jié)論：
這些結(jié)果表明，線粒體膜電位的破壞可能有助于 LoVo 細(xì)胞中 Hederagenin 的凋亡。我們的研究結(jié)果表明，Hederagenin 可能是一種很有前途的人結(jié)腸癌治療候選藥物。

從 Dipsacus asper 根中分離的 hederagenin 皂苷的體外抗互補(bǔ)活性。

在體外研究了從 Dipsacus asper 中分離的 Hederagenin 和相關(guān)皂苷的抗互補(bǔ)活性。
方法和結(jié)果：
HN 皂苷 F （3） 最有效，IC50 值為 3.7x10（-5） M，其次是 3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（1->3）-α-L-L-鼠李糖吡喃糖基-（1->2）-β-L-+ ++阿拉伯吡喃糖基 Hederagenin 28-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（1->6）-β-D-吡喃葡萄糖苷側(cè) （8），3-O-β-L-阿拉伯吡喃糖基 Hederagenin 28-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（1->6）-β-D-吡喃葡萄糖苷 （5），dipsacus 皂苷 A （4） 和 Hederagenin（1） 在補(bǔ)體系統(tǒng)的經(jīng)典途徑 （CP） 上，而皂苷 3-5 沒有表現(xiàn)出對(duì)溶血的抑制，而是在替代途徑 （AP） 上增加了溶血。
方法和結(jié)果：
然而，所有 C-3 monodesmosides [prosapogenin CP （2）、dipsacus saponin B （6） 和 dipsacus saponin C （7）] 直接在紅細(xì)胞上誘發(fā)溶血。

去甲腎上腺素和血清素系統(tǒng)在不可預(yù)測(cè)的慢性輕度應(yīng)激誘導(dǎo)抑郁癥大鼠模型中參與 hederogenin 的抗抑郁樣作用。

我們實(shí)驗(yàn)室先前的研究表明，F(xiàn)ructus Akebiae （FAE） [Akebiae quinata （Thunb.） 的果實(shí)）的急性和亞慢性給藥。Decne， （Lardizabalaceae）] 在動(dòng)物抑郁行為測(cè)試中產(chǎn)生抗抑郁樣作用。FAE 含有大約 70% 的 Hederagenin （HG） 作為其主要化學(xué)成分。 本研究比較了小鼠 FAE 與 HG 的抗抑郁能力，并進(jìn)一步研究了 HG 在遭受不可預(yù)測(cè)的慢性輕度應(yīng)激 （UCMS） 大鼠中的抗抑郁樣作用和潛在機(jī)制。
方法和結(jié)果：
小鼠通過胃內(nèi)給藥 （ig.） 每天一次接受 FAE （50 mg/kg） 和 HG （20 mg/kg），持續(xù) 3 周。使用高架加迷宮 （EPM） 和行為絕望測(cè)試（包括懸尾試驗(yàn) （TST） 和強(qiáng)迫游泳試驗(yàn) （FST））比較 FAE 和 HG 的抗焦慮和抗抑郁活性。使用 UCMS 抑郁大鼠模型評(píng)估 HG （5 mg/kg） 的抗抑郁效果。此外，通過高效液相色譜、電化學(xué)檢測(cè)和實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)測(cè)定 UCMS 大鼠海馬體內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)水平和相關(guān)基因表達(dá)。 我們的初步篩選測(cè)試結(jié)果表明，與載體組相比，20 mg/kg 的 HG 雖然不是 50 mg/kg 的 FAE，但與載體組相比，長(zhǎng)期給藥時(shí)，TST 和 FST 的不動(dòng)性顯著降低;然而，HG 組和 FAE 組之間沒有觀察到顯著差異。長(zhǎng)期施用 HG 未能顯著逆轉(zhuǎn)改變的雜交和飼養(yǎng)行為表現(xiàn)、在 EPM 中張開臂和閉合入口中花費(fèi)的時(shí)間，即使它們顯示出增加的趨勢(shì)，但 HG 顯著增加了蔗糖偏好測(cè)試中蔗糖偏好的百分比 （SPT） 并減少了 FST 中的不動(dòng)時(shí)間。HG 顯示去甲腎上腺素和血清素水平顯著增加，并表現(xiàn)出增加 5-羥色胺 （血清素） 1A 受體 mRNA 表達(dá)的趨勢(shì)，并顯著降低血清素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 （5-HTT） 的 mRNA 表達(dá)。然而，腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的表達(dá)沒有顯著差異。
結(jié)論：
這些發(fā)現(xiàn)證實(shí)了 HG 在行為絕望測(cè)試和 UCMS 大鼠模型中的抗抑郁樣作用，這可能與單胺神經(jīng)遞質(zhì)和 5-HTT mRNA 表達(dá)有關(guān)。

皂苷 α-hederin 及其糖苷配基半胱甘肽在含膽固醇的雙層中誘導(dǎo)的結(jié)構(gòu)域形成和透化。

皂苷和三萜酸已被證明能夠與富含膽固醇的脂質(zhì)膜和結(jié)構(gòu)域（筏）相互作用。皂苷如何能夠調(diào)節(jié)膜中的脂質(zhì)相分離以及糖鏈對(duì)這種活性的作用尚不清楚。
方法和結(jié)果：
我們?cè)谟?DMPC/Chol （3：1 mol/mol） 組成的二元膜模型中證明，皂苷 α-hederin 及其無糖鏈的糖苷配基，三萜酸 Hederagenin，能夠誘導(dǎo)脂質(zhì)結(jié)構(gòu)域的形成。我們?cè)诙鄬幽遗?（MLV）、巨型單層囊泡 （GUV） 和支撐的平面雙層 （SPB） 上表明，皂苷元上糖單元的存在加速了結(jié)構(gòu)域的形成并增加了這些結(jié)構(gòu)域內(nèi)甾醇的比例。結(jié)構(gòu)域形狀也受糖存在的影響，因?yàn)?α-hederin 和 Hederagenin 分別誘導(dǎo)管狀和球形結(jié)構(gòu)域的形成。這些高度彎曲的結(jié)構(gòu)應(yīng)該是兩種化合物誘導(dǎo)膜曲率的結(jié)果。除了結(jié)構(gòu)域的形成外，α-hederin 和 Hederagenin 還能透化 GUV。α-hederin 形成膜孔伴隨著脂質(zhì)在 SPB 中積累到非雙層結(jié)構(gòu)中。這個(gè)過程可能是兩種化合物的透化活性的原因。在 LUV 中，α-hederin 的透化是甾醇依賴性的。
結(jié)論：
討論了我們結(jié)果的生物學(xué)意義和所涉及的機(jī)制與皂苷和三萜酸對(duì)膜筏、癌細(xì)胞和溶血的活性有關(guān)。