產(chǎn)品名稱(chēng):綿羊鞭蟲(chóng)PCR試劑盒
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本產(chǎn)品就是根據(jù)PCR原理專(zhuān)門(mén)開(kāi)發(fā)的試劑盒,它具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供樣品DNA模板。
2. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
3. 產(chǎn)品精心優(yōu)化且特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟除此之外的其它微生物DNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
4. PCR mix中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本產(chǎn)品足夠50次20μL體系的PCR反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于定性實(shí)驗(yàn),不能用于定量。
7. 本產(chǎn)品只能用于科研
包裝規(guī)格及成分(具體信息詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)):
綿羊鞭蟲(chóng)PCR試劑盒的制備
1. 用自選方法純化N+2個(gè)樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。
2. 如果有N個(gè)樣品,則需要做N+2個(gè)提取,包括一個(gè)樣品制備陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽(yáng)性對(duì)照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加 10μL 差異支原體 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
電泳分析
1. 取 5-10uL 擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行常規(guī)瓊脂糖電泳,檢測(cè)擴(kuò)增效果,由于擴(kuò)增產(chǎn)物較短,建議用 1.5%-2.0%的瓊脂糖凝膠。
2. 陽(yáng)性樣品預(yù)期得到的擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度為 200bp 左右。如果兩個(gè)陰性對(duì)照(樣品制備陰性對(duì)照或 PCR 陰性對(duì)照)有此擴(kuò)增產(chǎn)物,說(shuō)明環(huán)境污染,則整個(gè)實(shí)驗(yàn)無(wú)效,不需要分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
3. 如果所有樣品和 PCR 陽(yáng)性對(duì)照均無(wú)此擴(kuò)增產(chǎn)物,則說(shuō)明有系統(tǒng)性的問(wèn)題(試劑、設(shè)備、程序、操作等),需要重復(fù)并排查原因。
4. 如果沒(méi)有上述兩種情況,則實(shí)驗(yàn)有效,可以分析樣品的擴(kuò)增結(jié)果。N+2 個(gè)樣品中有擴(kuò)增產(chǎn)物的判定為陽(yáng)性,無(wú)則判定為陰性。
綿羊鞭蟲(chóng)PCR試劑盒樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。陽(yáng)性對(duì)照需單獨(dú)放置,不要污染其他試劑。
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
4、自備試劑:樣品DNA。
綿羊鞭蟲(chóng)PCR試劑盒注意事項(xiàng):
1 所有操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行;
2試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,混勻并短暫離心;
3 反應(yīng)液應(yīng)避光保存;
4反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;
5使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專(zhuān)用工作服;
6 樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行,以免交叉污染;
7 實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器;
綿羊鞭蟲(chóng)PCR試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
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