細(xì)胞名稱:中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞CHL/LUC(帶熒光素酶)
細(xì)胞代次:P4
細(xì)胞規(guī)格:T25瓶(包郵)/2冷凍管(需加干冰運(yùn)輸費(fèi))
細(xì)胞凍存:無(wú)血清凍存液
細(xì)胞傳代:第一次建議1:2
中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞CHL/LUC(帶熒光素酶)細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運(yùn)輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個(gè)細(xì)胞瓶,消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)嚴(yán)格無(wú)菌操作,將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),前三天照片是重要售后依據(jù),不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。(換液后將瓶蓋擰松)
1、收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作:
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮完全培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml完全培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細(xì)胞完全貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
4、細(xì)胞復(fù)蘇:
1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具),快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無(wú)結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細(xì)胞移至含5ml完全培養(yǎng)基的15ml離心管中, 1000rpm離心5min;
3)棄上清,沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸,接種25cm2培養(yǎng)瓶,于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)第二天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):有些細(xì)胞貼壁不牢,在運(yùn)輸過程中容易發(fā)生細(xì)胞脫落,這是正?,F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm離心5min,收集上清作過渡培養(yǎng)(后期對(duì)比培養(yǎng)),沉淀加入胰酶1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化1-2分鐘后,加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,棄上清,加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個(gè)T25),補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞CHL/LUC(帶熒光素酶),售后服務(wù)
1. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);
2. 細(xì)胞污染問題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi),給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,核實(shí)后重發(fā);
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,(需提供真實(shí)清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片),重發(fā);
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時(shí)候并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
5. 細(xì)胞活性問題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,核實(shí)后予重發(fā);
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請(qǐng)拍照,3天未告知的,視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題時(shí)照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的,并跟技術(shù)人員溝通的,由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的,重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價(jià)的50%收費(fèi)重發(fā)。
2)細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
1. 客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3. 非本庫(kù)推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
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GT1933LUC | USMC/LUC | 大鼠血管平滑肌細(xì)胞USMC/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+10ng/ml成纖維因子貼壁 |
GT1934LUC | MMQ/LUC | 大鼠垂體瘤細(xì)胞MMQ/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+20%FBS懸浮 |
GT1935LUC | HI97IGFIR/LUC | 大鼠腦海馬體成纖維細(xì)胞HI97IGFIR/LUC(帶熒光素酶) | 4500 | DMEM+0.2mg/mlG418+0.001mg/ml嘌呤霉素+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1936LUC | EGCCRL2690/LUC | 大鼠空腸膠質(zhì)細(xì)胞EGCCRL2690/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1937LUC | MCARH7777/LUC | 大鼠肝癌細(xì)胞MCARH7777/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1938LUC | RG2/LUC | 大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞RG2/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1939LUC | Y3Ag123S210/LUC | 大鼠骨髓瘤細(xì)胞Y3Ag1.2.3S210/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S懸浮 |
GT1940LUC | LLCPK1/LUC | 豬腎細(xì)胞系LLCPK1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1941LUC | PK13/LUC | 豬腎細(xì)胞系PK13/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1942LUC | PK15/LUC | 豬腎細(xì)胞PK15/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1943LUC | PIEC/LUC | 豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞PIEC/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
GT1944LUC | ST/LUC | 豬睪丸細(xì)胞/豬睪丸成纖維細(xì)胞ST/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S |
GT1945LUC | 3D421/LUC | 豬肺泡巨噬細(xì)胞3D421/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640(atcc改良)+10%FBS貼壁 |
GT1946LUC | PTK75/LUC | 豬鼻甲黏膜成纖維細(xì)胞PTK75/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1947LUC | CHOK1(懸浮)/LUC | 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞k1亞克隆系CHOK1(懸?。?LUC(帶熒光素酶) | 5000 | CHO-K1無(wú)血清專用培養(yǎng)基+谷氨酰胺1%+1%P/S |
GT1948LUC | CHL/LUC | 中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞CHL/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1949LUC | MDBK/LUC | 牛腎細(xì)胞MDBK/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1950LUC | OARL1/LUC | 綿羊肺成纖維細(xì)胞(原代)OARL1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1951LUC | F81/LUC | 貓腎細(xì)胞F81/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640(含NaHCO31.5g/L)+10%FBS+1%PS貼壁 |
GT1952LUC | UMNSAHDF1/LUC | 雞胚胎成纖維細(xì)胞UMNSAHDF1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM(含NAHCO31.5g/L)+10%FBS+1%P/S39℃培養(yǎng) |
GT1953LUC | DT40/LUC | 雞淋巴瘤細(xì)胞DT40/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+5%雞血清+0.05mMβ-巰基乙醇+1%P/S |
GT1954LUC | LMH/LUC | 雞肝癌細(xì)胞LMH/LUC(帶熒光素酶) | 9999 | D/F12+10%FBS+1%P/S貼壁性差康寧3289包被的瓶子培養(yǎng) |
GT1955LUC | MA104/LUC | 恒河猴腎細(xì)胞MA104/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1956LUC | MDCK/LUC | 狗腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞MDCK/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1957LUC | DH82/LUC | 狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞DH82/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S |
GT1958LUC | COS7/LUC | 非洲綠猴腎細(xì)胞SV40轉(zhuǎn)化COS7/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1959LUC | VERO/LUC | 非洲綠猴腎細(xì)胞VERO/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1960LUC | VEROE6/LUC | 非洲綠猴腎細(xì)胞VEROE6/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1961LUC | Marc145/LUC | 非洲綠猴胚胎腎細(xì)胞Marc145/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+15%FBS+1%P/S |
GT1962LUC | COS1/LUC | 非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞COS1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM(含NAHCO31.5g/L)+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1963LUC | CV1/LUC | 非洲綠猴腎細(xì)胞CV1/LUC(帶熒光素酶) | 4500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1964LUC | B958/LUC | EBV陽(yáng)性棉頂狨猴淋巴細(xì)胞B958/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
GT1965LUC | BSC1/LUC | 非洲綠猴正常腎上皮細(xì)胞BSC1/LUC(帶熒光素酶) | 4500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1966LUC | VX2/LUC | 兔間變表皮鱗癌瘤株VX2/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1967LUC | BHK21/LUC | 倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞BHK21/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S |
GT1968LUC | chodhfr/LUC | 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞二氫葉酸還原酶缺陷chodhfr/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | IMDM+10%FBS+0.1mM次黃嘌呤+0.016mM胸腺嘧啶+100nM氨甲喋呤+1%P/S |
GT1969LUC | CHO/LUC | 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞CHO/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
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