細胞名稱：小鼠源基于MLV-10A1逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞系PT67/LUC(帶熒光素酶)
細胞代次：P4人卵巢癌腺癌細胞OVCAR8/LUC
細胞規(guī)格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運輸費）
細胞凍存：無血清凍存液
細胞傳代：第一次建議1:2
小鼠源基于MLV-10A1逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞系PT67/LUC(帶熒光素酶)細胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細胞的最好辦法。收到細胞用75%酒精噴灑整個細胞瓶，消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴格無菌操作，將細胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（最好40x,100x,200x各一張），前三天照片是重要售后依據(jù)，不提供照片默認收到狀態(tài)良好。（換液后將瓶蓋擰松）
1、收到細胞后，請按照以下方法進行操作：
取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài)，然后換用新鮮完全培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進行傳代。
2、細胞傳代：
1）細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3）棄上清，沉淀細胞用12ml完全培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，最后放入37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）待細胞完全貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果，之后進行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細胞凍存：
1）細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3）用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，并放置于凍存管中；
4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
4、細胞復蘇：
1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細胞移至含5ml完全培養(yǎng)基的15ml離心管中， 1000rpm離心5min；
3）棄上清，沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸，接種25cm2培養(yǎng)瓶，于37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）第二天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項：有些細胞貼壁不牢，在運輸過程中容易發(fā)生細胞脫落，這是正?，F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過渡培養(yǎng)（后期對比培養(yǎng)），沉淀加入胰酶1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml完全培養(yǎng)基終止反應。再離心，棄上清，加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代（兩個T25），補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
小鼠源基于MLV-10A1逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞系PT67/LUC(帶熒光素酶),售后服務
1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等，重發(fā)；
2. 細胞污染問題，請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi)，給我們提出真實的實驗結(jié)果，核實后重發(fā)；
3. 常溫發(fā)貨的細胞靜置24小時后，干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后24小時后，絕大多數(shù)細胞未存活，（需提供真實清晰的細胞狀態(tài)照片），重發(fā)；
4. 干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細胞靜置4小時候并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
5. 細胞活性問題，請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，核實后予重發(fā)；
6. 細胞收到當天以及第2,3天請拍照，3天未告知的，視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現(xiàn)問題時照片以及細胞相關操作的詳細步驟的，并跟技術(shù)人員溝通的，由技術(shù)人員判定為我方責任的，重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔責任的由雙方進行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費重發(fā)。
2）細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
1. 客戶造成細胞污染，不重發(fā)；
2. 客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
3. 非本庫推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
4. 細胞狀態(tài)不好，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
5. 細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
6. 細胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
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| GT1752LUC | NCIH1819/LUC | 人小細胞肺癌細胞NCIH1819/LUC(帶熒光素酶) | 7500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1753LUC | HS27A/LUC | 人骨髓基質(zhì)成纖維細胞HS27A/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
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| GT1755LUC | MESSA/LUC | 人子宮肉瘤細胞MESSA/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | McCOY's5A+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1756LUC | NCIH1568/LUC | 人非小細胞肺腺癌細胞NCIH1568/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1757LUC | SSP25/LUC | 人肝膽管癌細胞SSP25/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1758LUC | RPMI7951/LUC | 人黑色素瘤細胞RPMI7951/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1759LUC | HLE/LUC | 人肝癌細胞HLE/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1760LUC | TM4/LUC | 小鼠睪丸Sertoli細胞TM4/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM/F12+2.5%FBS+5%馬血清+1%P/S貼壁 |
| GT1761LUC | U14/LUC | 小鼠子宮頸癌細胞U14/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1762LUC | MAEC/LUC | 小鼠主動脈內(nèi)皮細胞MAEC/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1763LUC | NCTC1469/LUC | 小鼠正常肝細胞NCTC1469/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%馬血清+1%P/S |
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| GT1765LUC | SDOW17/LUC | 小鼠雜交瘤SDOW17/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S懸浮 |
| GT1766LUC | PT67/LUC | 小鼠源基于MLV-10A1逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞系PT67/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1767LUC | BAF3/LUC | 小鼠原B細胞株BAF3/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10FBS+10ng/mlIL-3（鼠源）+1%P/S懸浮 |
| GT1768LUC | PAN02/LUC | 小鼠胰腺癌細胞/胰腺導管癌PAN02/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+5%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1769LUC | LTPA/LUC | 小鼠胰腺癌細胞LTPA/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1770LUC | BetaTC6/LUC | 小鼠胰島素瘤胰島Beta細胞BetaTC6/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM(含NaHCO31.5g/L)+15%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1771LUC | MS1/LUC | 小鼠胰島內(nèi)皮細胞MS1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1772LUC | HL1/LUC | 小鼠心肌細胞HL1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1773LUC | BV2/LUC | 小鼠小膠質(zhì)細胞BV2/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%HEPES+1%P/S貼壁 |
| GT1774LUC | STC1/LUC | 小鼠小腸內(nèi)分泌細胞STC1/LUC(帶熒光素酶) | 5000 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1775LUC | RGC5/LUC | 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞RGC5/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | F12+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1776LUC | MPC5/LUC | 小鼠腎足細胞MPC5/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1777LUC | IMCD3/LUC | 小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細胞IMCD3/LUC(帶熒光素酶) | 5000 | DMEM/F12+10%FBS+1%P/S |
| GT1778LUC | SV40MES13/LUC | 小鼠腎小球系膜細胞SV40MES13/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | D/F12+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1779LUC | Renca/LUC | 小鼠腎癌細胞Renca/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
| GT1780LUC | C172/LUC | 小鼠神經(jīng)干細胞C17.2/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1781LUC | HC11/LUC | 小鼠乳腺上皮細胞HC11/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1%P/S |
| GT1782LUC | HC11MAMMARY/LUC | 小鼠乳腺上皮細胞HC11MAMMARY/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1%P/S |
| GT1783LUC | 4T1/LUC | 小鼠乳腺癌細胞4T1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1784LUC | EMT6/LUC | 小鼠乳腺癌細胞EMT6/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1785LUC | MA891/LUC | 小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細胞MA891/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1786LUC | MFC/LUC | 小鼠前胃癌細胞MFC/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
| GT1787LUC | RM1/LUC | 小鼠前列腺癌細胞RM1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1788LUC | ASMC/LUC | 小鼠氣道平滑肌細胞ASMC/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
| GT1789LUC | Lwnt3a/LUC | 小鼠皮下結(jié)締組織細胞Lwnt3a/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S+G4180.4mg/ml |
| GT1790LUC | NIH3T3/LUC | 小鼠胚胎細胞NIH3T3/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%小牛血清+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1%L-谷氨酰胺+1%P/S |
| GT1791LUC | ATDC5/LUC | 小鼠胚胎瘤細胞-軟骨細胞ATDC5/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1792LUC | E14/LUC | 小鼠胚胎干細胞E14/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+15%FBS+0.1uL/mLLIF+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1%PS+1uL/mLβ－巰基乙醇+1%P/S培養(yǎng)瓶用0.1%明膠包被細胞呈集落生長 |
| GT1793LUC | 3T3L1/LUC | 小鼠胚胎成纖維細胞3T3L1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM(含NaHCO31.5g/L)+10%小牛血清+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1%P/S |
| GT1794LUC | BALB3T3cloneA31/LUC | 小鼠胚胎成纖維細胞BALB3T3cloneA31/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S80%密度時1:2傳代，生長慢，傳代密度要大 |
| GT1795LUC | C3H10T12,Clone8/LUC | 小鼠胚胎成纖維細胞C3H10T12,Clone8/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1796LUC | MEF/LUC | 小鼠胚胎成纖維細胞MEF/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | D/F12+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1797LUC | MEF人小細胞肺癌細胞NCIH1819/LUC(帶熒光素酶)(絲裂霉素C處理)/LUC | 小鼠胚胎成纖維細胞MEF(絲裂霉素C處理)/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | D/F12+10%FBS+1%P/S |
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