細(xì)胞名稱：人間變性大細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞Karpas299/LUC(帶熒光素酶)
細(xì)胞代次：P4
細(xì)胞規(guī)格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運(yùn)輸費(fèi)）
細(xì)胞凍存：無血清凍存液
細(xì)胞傳代：第一次建議1:2
細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運(yùn)輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個(gè)細(xì)胞瓶，消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)嚴(yán)格無菌操作，將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（最好40x,100x,200x各一張），前三天照片是重要售后依據(jù)，不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。（換液后將瓶蓋擰松）
人間變性大細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞Karpas299/LUC(帶熒光素酶)，培養(yǎng)步驟
a、細(xì)胞傳代：如果未超過80%匯合度時(shí)，將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，留5ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；如果細(xì)胞密度超80%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)，傳代具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，使之完全脫落后吸出，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2的比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個(gè)T25瓶），補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入到37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細(xì)胞凍存：
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心 5min；
3、 棄上清，沉淀細(xì)胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液（貨號(hào)：C7001），混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可，如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中，則需在-80℃冰箱 中存放24小時(shí)以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細(xì)胞復(fù)蘇：
1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意佩戴防護(hù)面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍， 直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、棄上清，沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸，接種至T25培養(yǎng)瓶，放于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4、第二天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項(xiàng)：有些細(xì)胞貼壁不牢，在運(yùn)輸過程中容易發(fā)生細(xì)胞脫落，這是正?，F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過渡培養(yǎng)（后期對(duì)比培養(yǎng)），沉淀加入胰酶1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心，棄上清，加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個(gè)T25），補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
人間變性大細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞Karpas299/LUC(帶熒光素酶),售后服務(wù)
1. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)；
2. 細(xì)胞污染問題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi)，給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，核實(shí)后重發(fā)；
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時(shí)后，干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，（需提供真實(shí)清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片），重發(fā)；
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時(shí)候并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
5. 細(xì)胞活性問題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，核實(shí)后予重發(fā)；
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請(qǐng)拍照，3天未告知的，視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題時(shí)照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的，并跟技術(shù)人員溝通的，由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的，重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價(jià)的50%收費(fèi)重發(fā)。
2）細(xì)胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
1. 客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
3. 非本庫推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
更多相關(guān)產(chǎn)品如下：人間變性大細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞Karpas299/LUC(帶熒光素酶)
| GT1353LUC | IOMMLee/LUC | 人腦膜瘤細(xì)胞IOMMLee/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%P/S |
| GT1354LUC | MDAMB175VII/LUC | 人乳腺癌細(xì)胞MDAMB175VII/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L-15+10%FBS+1%P/S貼壁生長 |
| GT1355LUC | KTC1/LUC | 人甲狀腺癌細(xì)胞KTC1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+NEAA+1%P/S |
| GT1356LUC | Karpas299/LUC | 人間變性大細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞Karpas299/LUC(帶熒光素酶) | 5000 | 1640+20%FBS+1%P/S |
| GT1357LUC | MKN7/LUC | 人胃腺癌細(xì)胞MKN7/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
| GT1358LUC | NCIH508/LUC | 人結(jié)腸直腸腺癌細(xì)胞NCIH508/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
| GT1359LUC | SKNBE/LUC | 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SKNBE/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM/F12+10%FBS+1%P/S |
| GT1360LUC | LS1034/LUC | 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞LS1034/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁生長 |
| GT1361LUC | TCCSUP/LUC | 人膀胱癌細(xì)胞TCCSUP/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%NEAA+1%P/S |
| GT1362LUC | DMS114/LUC | 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞DMS114/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1363LUC | TOV112D/LUC | 人上皮性卵巢癌細(xì)胞TOV112D/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 基礎(chǔ)培養(yǎng)基是1:1的MCDB105培養(yǎng)基（含最終濃度為1.5g/L碳酸氫鈉）和M199培養(yǎng)基（含最終濃度為2.2g/L碳酸氫鈉）的混合物，優(yōu)質(zhì)胎牛血清，15%；雙抗，1%。 |
| GT1364LUC | C8166CD4/LUC | 人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞C8166CD4/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S+1%丙酮酸鈉+1%L-谷氨酰胺 |
| GT1365LUC | HMy2CIR/LUC | 人B淋巴母細(xì)胞HMy2.CIR/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | IMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1366LUC | THLE2/LUC | 人正常肝細(xì)胞THLE2/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 準(zhǔn)備BEGMkit培養(yǎng)基(Lonza/Clonetics，CC-3170)備注：培養(yǎng)基包含（A+B），ATCC不使用BEGM試劑盒提供的GA（慶大霉素-兩性霉素B混合物）和腎上腺素（Epinephrine），另向其中添加額外的5ng/mLEGF、70ng/mL磷酸乙醇胺和10%FBS。可根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求添加P/S雙抗，1%。
A：BEBM基礎(chǔ)培養(yǎng)基（貨號(hào)CC-3171）500ML
B:細(xì)胞生長添加劑（貨號(hào)CC-4175）一套（包含下列試劑）
●BPE,2.0ml●Hydrocortisone,0.5ml●hEGF,0.5ml
●Epinephrine,0.5ml●Insulin,0.5ml●Transferrin,0.5ml
●Triiodothyronine,0.5ml●RetinoicAcid,0.5ml●GA,0.5ml
注意：Theflasksusedshouldbeprecoatedwithamixtureof0.01mg/mLfibronectin,0.03mg/mLbovinecollagentypeIand0.01mg/mLbovineserumalbumindissolvedinBEBMmedium. |
| GT1367LUC | Ocut2C/LUC | 人甲狀腺癌細(xì)胞（未分化）Ocut2C/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1368LUC | COV434/LUC | 人卵巢顆粒腫瘤細(xì)胞COV434/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1369LUC | SNU387/LUC | 人肝癌細(xì)胞SNU387/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS |
| GT1370LUC | UT7/LUC | 人類原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞UT7/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | RPMI1640(w/oHepes)10%FBS；5-7u/mlEpo或者RPM-1640+10%FBS，5ngMLGM-CSF， |
| GT1371LUC | ACC3/LUC | 人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞-人瘤病毒相關(guān)性宮頸管腺癌ACC3/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS |
| GT1372LUC | BE(2)M17/LUC | 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞BE(2)M17/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM/F12+10%FBS |
| GT1373LUC | Hs865Sk/LUC | 人皮膚成纖維細(xì)胞（有限細(xì)胞系）Hs865.Sk/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM(高糖）+10%FBS |
| GT1374LUC | AD293/LUC | 人胚腎細(xì)胞AD293/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM(高糖）+10%FBS |
| GT1375LUC | GP2293/LUC | 人胚腎上皮包裝細(xì)胞GP2293/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM(高糖）+10%FBS |
| GT1376LUC | SKNAS/LUC | 人腦神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SKNAS/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEMO.1mMNon-EssentialAminoAcids(NEAA)fetalbovineserumtoafinalconcentrationof10% |
| GT1377LUC | DU4475/LUC | 人乳腺癌細(xì)胞（三陰性）DU4475/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | RPMI-1640+10%FBS |
| GT1378LUC | UACC812/LUC | 人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞（無特殊類型的浸潤性乳腺癌）UACC812/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L-15+10mcg/ml胰島素，16mcg/mlglutathione，90%;+10%FBS無二氧化碳培養(yǎng) |
| GT1379LUC | G401/LUC | 人腎橫紋肌肉瘤/不是腎癌細(xì)胞G401/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | McCoy's5a+10%FBS |
| GT1380LUC | NCIH838/LUC | 人肺腺癌細(xì)胞NCIH838/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | RPMI1640+10%FBS |
| GT1381LUC | NCIH596/LUC | 人肺腺鱗癌細(xì)胞NCIH596/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | RPMI1640+10%FBS |
| GT1382LUC | NCIH1563/LUC | 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH1563/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | RPMI1640+10%FBS |
| GT1383LUC | NCIH2347/LUC | 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH2347/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | RPMI1640+10%FBS |
| GT1384LUC | NCIH2087/LUC | 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞NCIH2087/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | ACL-4medium(serum-free)DMEM/F12(1:1):Ham＇sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES，withNEAAMedium)0.02mg/ml胰島素＋0.01mg/ml轉(zhuǎn)鐵蛋白＋25nM亞砷酸鈉＋50nM氫化可的松＋1ng/mlEGF＋0.01mM乙酰胺＋0.01mM磷酸乙醇胺＋100pM三碘甲腺原氨酸＋0.5%(w/v)牛血清白蛋白＋10mMHEPES＋0.5mM丙酮酸鈉＋2mML-谷氨酰胺 |
| GT1385LUC | NCIH209/LUC | 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH209/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | IMDM+10%FBSorRPMI1640+10%FBS |
| GT1386LUC | NCIH2170/LUC | 人肺鱗癌細(xì)胞NCIH2170/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | RPMI1640+10%FBS |
歡迎新老客戶咨詢訂購：人間變性大細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞Karpas299/LUC(帶熒光素酶)
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