細胞名稱:人腦髓母細胞瘤細胞DAOY/LUC(帶熒光素酶)
細胞代次:P4
細胞規(guī)格:T25瓶(包郵)/2冷凍管(需加干冰運輸費)
細胞凍存:無血清凍存液
細胞傳代:第一次建議1:2
細胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細胞的最好辦法。收到細胞用75%酒精噴灑整個細胞瓶,消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴格無菌操作,將細胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),前三天照片是重要售后依據(jù),不提供照片默認收到狀態(tài)良好。(換液后將瓶蓋擰松)
人Burkitt's淋巴瘤細胞DAUDI/LUC(帶熒光素酶),培養(yǎng)步驟
a、細胞傳代:如果未超過80%匯合度時,將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,留5ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);如果細胞密度超80%,即可進行傳代培養(yǎng),傳代具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,使之完全脫落后吸出,然后將懸液轉移至15ml離心管中,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細胞懸液按1:2的比例進行分瓶傳代(兩個T25瓶),補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入到37℃、5%CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細胞凍存:
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1000rpm離心 5min;
3、 棄上清,沉淀細胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液(貨號:C7001),混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要將細胞轉入液氮罐中,則需在-80℃冰箱 中存放24小時以上再轉入液氮罐中。
C、細胞復蘇:
1、從液氮中取出細胞凍存管(注意佩戴防護面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍, 直至凍存管中無結晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2、將凍存管中的細胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3、棄上清,沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸,接種至T25培養(yǎng)瓶,放于37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4、第二天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項:有些細胞貼壁不牢,在運輸過程中容易發(fā)生細胞脫落,這是正常現(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm離心5min,收集上清作過渡培養(yǎng)(后期對比培養(yǎng)),沉淀加入胰酶1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化1-2分鐘后,加5ml完全培養(yǎng)基終止反應。再離心,棄上清,加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代(兩個T25),補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
人Burkitt's淋巴瘤細胞DAUDI/LUC(帶熒光素酶),售后服務
1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā);
2. 細胞污染問題,請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi),給我們提出真實的實驗結果,核實后重發(fā);
3. 常溫發(fā)貨的細胞靜置24小時后,干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后24小時后,絕大多數(shù)細胞未存活,(需提供真實清晰的細胞狀態(tài)照片),重發(fā);
4. 干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細胞靜置4小時候并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
5. 細胞活性問題,請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,核實后予重發(fā);
6. 細胞收到當天以及第2,3天請拍照,3天未告知的,視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現(xiàn)問題時照片以及細胞相關操作的詳細步驟的,并跟技術人員溝通的,由技術人員判定為我方責任的,重發(fā)。技術人員判定為雙方承擔責任的由雙方進行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費重發(fā)。
2)細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
1. 客戶造成細胞污染,不重發(fā);
2. 客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3. 非本庫推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4. 細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
5. 細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
6. 細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
更多相關產(chǎn)品如下:人Burkitt's淋巴瘤細胞DAUDI/LUC(帶熒光素酶)
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GT1043LUC | Capan2/LUC | 人胰腺癌細胞Capan2/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MCCOY'S5A+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1044LUC | CaSKi/LUC | 人宮頸癌細胞CaSKi/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1045LUC | CCD841CON/LUC | 人正常結腸上皮細胞CCD841CON/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
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GT1047LUC | CEMC1/LUC | 人急性淋巴細胞白血病細胞CEMC1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮 |
GT1048LUC | changliver/LUC | 人宮頸癌細胞changliver/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S |
GT1049LUC | CoC1/LUC | 人卵巢癌細胞CoC1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮 |
GT1050LUC | COLO205/LUC | 人結腸癌細胞COLO205/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S半貼壁 |
GT1051LUC | COLO320/LUC | 人結直腸腺癌細胞COLO320/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
GT1052LUC | COLO320DM/LUC | 人結直腸腺癌細胞COLO320DM/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S半貼半懸浮 |
GT1053LUC | COLO320HSR/LUC | 人結直腸腺癌細胞COLO320HSR/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼不牢,成團 |
GT1054LUC | CW2/LUC | 人結腸癌細胞CW2/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁長的慢1傳2 |
GT1055LUC | CX1/LUC | 人結腸癌細胞CX1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1056LUC | D283Med/LUC | 人腦髓母細胞瘤細胞D283Med/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S懸浮+貼壁(少量)生長 |
GT1057LUC | D341Med/LUC | 人腦髓母細胞瘤細胞D341Med/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+1%丙酮酸鈉+1%NEAA+10%FBS+1%P/S懸浮+貼壁(少量)生長 |
GT1058LUC | DAMI/LUC | 人巨核細胞白血病細胞DAMI/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
GT1059LUC | DAOY/LUC | 人腦髓母細胞瘤細胞DAOY/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S |
GT1060LUC | DAUDI/LUC | 人Burkitt's淋巴瘤細胞DAUDI/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
GT1061LUC | DB/LUC | 人彌漫性大B細胞淋巴瘤細胞DB/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮生長 |
GT1062LUC | Detroit562/LUC | 人口腔咽頭癌胸水轉移細胞Detroit562/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%F/S貼壁 |
GT1063LUC | DLD1/LUC | 人結直腸腺癌細胞DLD1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
歡迎新老客戶咨詢訂購:人Burkitt's淋巴瘤細胞DAUDI/LUC(帶熒光素酶)
關鍵字: 人Burkitt's淋巴瘤細胞DAUDI;細胞DAUDI;人Burkitt's淋巴瘤細胞;ATCC細胞;ATCC官網(wǎng);
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