細(xì)胞名稱：人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞CAKI1/LUC(帶熒光素酶)
細(xì)胞代次：P4
細(xì)胞規(guī)格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運(yùn)輸費）
細(xì)胞凍存：無血清凍存液
細(xì)胞傳代：第一次建議1:2
細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運(yùn)輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個細(xì)胞瓶，消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴(yán)格無菌操作，將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（最好40x,100x,200x各一張），前三天照片是重要售后依據(jù)，不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。（換液后將瓶蓋擰松）
人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞CAKI1/LUC(帶熒光素酶),培養(yǎng)步驟
a、細(xì)胞傳代：如果未超過80%匯合度時，將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，留5ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；如果細(xì)胞密度超80%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)，傳代具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，使之完全脫落后吸出，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2的比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個T25瓶），補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入到37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細(xì)胞凍存：
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心 5min；
3、 棄上清，沉淀細(xì)胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液（貨號：C7001），混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可，如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中，則需在-80℃冰箱 中存放24小時以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細(xì)胞復(fù)蘇：
1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意佩戴防護(hù)面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍， 直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、棄上清，沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸，接種至T25培養(yǎng)瓶，放于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4、第二天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項：有些細(xì)胞貼壁不牢，在運(yùn)輸過程中容易發(fā)生細(xì)胞脫落，這是正?，F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過渡培養(yǎng)（后期對比培養(yǎng)），沉淀加入胰酶1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心，棄上清，加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個T25），補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞CAKI1/LUC(帶熒光素酶),售后服務(wù)
1. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)；
2. 細(xì)胞污染問題，請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi)，給我們提出真實的實驗結(jié)果，核實后重發(fā)；
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時后，干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，（需提供真實清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片），重發(fā)；
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時候并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
5. 細(xì)胞活性問題，請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果，用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，核實后予重發(fā)；
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請拍照，3天未告知的，視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題時照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的，并跟技術(shù)人員溝通的，由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的，重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費重發(fā)。
2）細(xì)胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
1. 客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
3. 非本庫推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
更多相關(guān)產(chǎn)品如下：人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞CAKI1/LUC(帶熒光素酶)
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| GT1036LUC | CAKI2/LUC | 人腎透明細(xì)胞癌CAKI2/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | McCOY's5A+10%FBS+1%P/S |
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| GT1038LUC | Calu1/LUC | 人肺鱗癌細(xì)胞Calu1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MCCOY'S5A+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1039LUC | Calu3/LUC | 人肺腺癌細(xì)胞Calu3/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1040LUC | calu6/LUC | 人間變性肺腺癌細(xì)胞calu6/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1041LUC | CAOV3/LUC | 人卵巢腺癌細(xì)胞CAOV3/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM(含NaHCO31.5g/L)+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1042LUC | Capan1/LUC | 人胰腺癌細(xì)胞Capan1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | IMDM+20%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1043LUC | Capan2/LUC | 人胰腺癌細(xì)胞Capan2/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MCCOY'S5A+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1044LUC | CaSKi/LUC | 人宮頸癌細(xì)胞CaSKi/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1045LUC | CCD841CON/LUC | 人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞CCD841CON/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1046LUC | CCRFCEM/LUC | 人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞CCRFCEM/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮 |
| GT1047LUC | CEMC1/LUC | 人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞CEMC1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮 |
| GT1048LUC | changliver/LUC | 人宮頸癌細(xì)胞changliver/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1049LUC | CoC1/LUC | 人卵巢癌細(xì)胞CoC1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮 |
| GT1050LUC | COLO205/LUC | 人結(jié)腸癌細(xì)胞COLO205/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S半貼壁 |
| GT1051LUC | COLO320/LUC | 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞COLO320/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
| GT1052LUC | COLO320DM/LUC | 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞COLO320DM/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S半貼半懸浮 |
| GT1053LUC | COLO320HSR/LUC | 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞COLO320HSR/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼不牢，成團(tuán) |
| GT1054LUC | CW2/LUC | 人結(jié)腸癌細(xì)胞CW2/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁長的慢1傳2 |
| GT1055LUC | CX1/LUC | 人結(jié)腸癌細(xì)胞CX1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1056LUC | D283Med/LUC | 人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞D283Med/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S懸浮+貼壁（少量）生長 |
| GT1057LUC | D341Med/LUC | 人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞D341Med/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+1%丙酮酸鈉+1%NEAA+10%FBS+1%P/S懸浮+貼壁（少量）生長 |
| GT1058LUC | DAMI/LUC | 人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞DAMI/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
| GT1059LUC | DAOY/LUC | 人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞DAOY/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1060LUC | DAUDI/LUC | 人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞DAUDI/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
| GT1061LUC | DB/LUC | 人彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞DB/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮生長 |
| GT1062LUC | Detroit562/LUC | 人口腔咽頭癌胸水轉(zhuǎn)移細(xì)胞Detroit562/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%F/S貼壁 |
| GT1063LUC | DLD1/LUC | 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞DLD1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
歡迎新老客戶咨詢訂購：人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞CAKI1/LUC(帶熒光素酶)
關(guān)鍵字： 人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞CAKI1/L;細(xì)胞CAKI1/L;人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞;ATCC細(xì)胞;ATCC官網(wǎng);
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