細胞名稱:人結腸癌氟尿嘧啶耐藥株HCT/Fu
細胞代次:P4
細胞規(guī)格:T25瓶(包郵)/2冷凍管(需加干冰運輸費)
細胞凍存:無血清凍存液
細胞傳代:第一次建議1:2
細胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細胞的最好辦法。收到細胞用75%酒精噴灑整個細胞瓶,消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴格無菌操作,將細胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),前三天照片是重要售后依據(jù),不提供照片默認收到狀態(tài)良好。(換液后將瓶蓋擰松)
人結腸癌氟尿嘧啶耐藥株HCT/Fu,培養(yǎng)步驟
a、細胞傳代:如果未超過80%匯合度時,將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,留5ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);如果細胞密度超80%,即可進行傳代培養(yǎng),傳代具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,使之完全脫落后吸出,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細胞懸液按1:2的比例進行分瓶傳代(兩個T25瓶),補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入到37℃、5%CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細胞凍存:
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心 5min;
3、 棄上清,沉淀細胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液(貨號:C7001),混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要將細胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,則需在-80℃冰箱 中存放24小時以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細胞復蘇:
1、從液氮中取出細胞凍存管(注意佩戴防護面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍, 直至凍存管中無結晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2、將凍存管中的細胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3、棄上清,沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸,接種至T25培養(yǎng)瓶,放于37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4、第二天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項:有些細胞貼壁不牢,在運輸過程中容易發(fā)生細胞脫落,這是正?,F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm離心5min,收集上清作過渡培養(yǎng)(后期對比培養(yǎng)),沉淀加入胰酶1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化1-2分鐘后,加5ml完全培養(yǎng)基終止反應。再離心,棄上清,加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代(兩個T25),補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
人結腸癌氟尿嘧啶耐藥株HCT/Fu,售后服務
1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā);
2. 細胞污染問題,請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi),給我們提出真實的實驗結果,核實后重發(fā);
3. 常溫發(fā)貨的細胞靜置24小時后,干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后24小時后,絕大多數(shù)細胞未存活,(需提供真實清晰的細胞狀態(tài)照片),重發(fā);
4. 干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細胞靜置4小時候并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
5. 細胞活性問題,請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,核實后予重發(fā);
6. 細胞收到當天以及第2,3天請拍照,3天未告知的,視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現(xiàn)問題時照片以及細胞相關操作的詳細步驟的,并跟技術人員溝通的,由技術人員判定為我方責任的,重發(fā)。技術人員判定為雙方承擔責任的由雙方進行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費重發(fā)。
2)細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
1. 客戶造成細胞污染,不重發(fā);
2. 客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3. 非本庫推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4. 細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
5. 細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
6. 細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
歡迎新老客戶咨詢訂購:人結腸癌氟尿嘧啶耐藥株HCT/Fu
更多細胞可以咨詢我司客服:
GT2290C | 3T6Swissalbino | 3T6-Swissalbino小鼠胚胎成纖維細胞 | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT2291C | Psi2DAP | Psi2DAP小鼠胚胎成纖維細胞 | 1800 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT2292C | SKNBE2 | SK-N-BE2人神經(jīng)母細胞瘤細胞 | 2100 | MEM/F12+10%FBS+1%P/S |
GT2293C | L5178YTKclone372C | L5178YTK+-clone3.7.2C小鼠淋巴瘤細胞 | 1800 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT2294C | PED | PED豬內(nèi)皮細胞 | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT2295C | CV1[PartoftheWistarSpecialCollection] | CV-1[PartoftheWistarSpecialCollection]非洲綠猴腎細胞 | 1500 | MEM+10%FBS+1%P/S |
GT2296C | VEROC1008 | VEROC1008[VeroE6]非洲綠猴腎細胞 | 1700 | MEM+10%FBS+1%P/S |
GT2297C | HifiveBTITN5B14 | Hi-five(BTI-TN-5B1-4)昆蟲細胞 | 2100 | TNM-FH+10%FBS+1%P/S |
GT2298C | TtTGF | TtT/GF小鼠垂體促甲狀腺濾泡星狀細胞 | 1800 | DMEM/F12+10%HS+2.5%FBS+2ng/mLFGF+0.45%G/LUCose+2.85g/LSodiumBicarbonate+1%P/S |
GT2299C | NIT1 | NIT-1小鼠胰島素瘤β細胞 | 1800 | F-12K+10%heat-inactivateddialyzedFBS+1%P/S |
GT2300C | A549Tax | A549/Tax人肺腺癌紫杉醇耐藥性細胞 | 2800 | F-12K+10%FBS+0.5-1μg/mLTax+1%P/S |
GT2301C | GC2spdts | GC-2spdts小鼠精母細胞 | 1800 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT2302C | HCTTaxo1 | 人結腸癌紫衫醇耐藥株HCT/Taxo1 | 2580 | Ham'sF-12KPM150910+10%FBS164210-500+1%P/SPB180120+0.5-1μg/mLTax |
GT2303C | HCT/Fu | 人結腸癌氟尿嘧啶耐藥株HCT/Fu | 2580 | 1640+10%FBS+1ug/ml5-/Fu |
GT2304C | A549Taxo1 | 人肺癌紫衫醇耐藥株A549/Taxo1 | 2580 | Ham'sF-12KPM150910+10%FBS164210-500+1%P/SPB180120+0.5-1μg/mLTax |
GT2305C | BEL/Fu | 人肝癌氟尿嘧啶耐藥株BEL/Fu | 2580 | RPMI-1640 |
GT2306C | LO2 | 人正常肝細胞LO2 | 1280 | MEM-EBSS:MinimumEssentialMediumMEMEagleswithEarle'sBalancedSalts+10%FBS |
GT2307C | C3A | 人肝細胞C3A | 1800 | MEM培養(yǎng)基;10%胎牛血清;1%雙抗;NEAA,丙酮酸鈉 |
GT2308C | A2780Taxo1 | 人卵巢癌紫衫醇耐藥株A2780/Taxo1 | 2580 | RPMI-1640 |
GT2309C | 3AO | 人卵巢癌細胞3AO | 1800 | RPMI1640+10%FBS |
GT2310C | BE2M17 | 人神經(jīng)母細胞瘤細胞BE2-M17 | 1800 | DMEM/F12+10%FBS |
GT2311C | SHG44 | 人膠質(zhì)瘤細胞SHG-44 | 1280 | RPMI1640+10%FBS |
GT2312C | HSC | 人雪旺細胞HSC | 1680 | 雪旺細胞培養(yǎng)基,sciencell,貨號:1701 |
GT2313C | BIU87Adr | 人膀胱癌阿霉素耐藥株BIU87/Adr | 2580 | RPMI-1640 |
GT2314C | HTR8 | 人滋養(yǎng)細胞HTR-8 | 2000 | DMEM/F12+15%FBS |
GT2315C | MCFAdr | 人乳腺癌阿霉素耐藥細胞株MCFAdr | 2580 | RPMI-1640 |
GT2316C | HA | 人羊膜細胞HA | 1280 | RPMI1640+10%FBS |
GT2317C | HFSF | 人胚胎眼鞏膜成纖維細胞系HFSF | 1680 | DMEM高糖+10%FBS |
GT2318C | HASMC | 人主動脈平滑肌細胞HASMC | 2500 | 平滑肌細胞培養(yǎng)基,sciencell,貨號:1101 |
GT2319C | Helamock | 轉(zhuǎn)染了microRNA-mock基因的陰性對照細胞Hela-mock | 1800 |
|
GT2320C | PtK1NBL3 | PtK1NBL-3袋鼠腎細胞 | 1200 | EMEM+10%FBS |
GT2321C | BMF | 小鼠成纖維細胞BMF | 1800 | RPMI1640+11%FBS |
GT2322C | mousepodocyte | 腎小球足細胞mousepodocyte | 1680 | DMEM高糖+10%FBS33℃,5%CO2培養(yǎng) |
GT2323C | MC3T3L1 | 小鼠胚胎成纖維細胞MC3T3-L1 | 1280 | DMEM高糖+10%FBS |
GT2324C | MPC11 | 小鼠漿細胞瘤MPC-11 | 1680 | DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMediumDMEH-214.5g/LiterG/LUCose 10%HS |
GT2325C | ROS1728 | 大鼠成骨細胞ROS1728 | 1800 | DMEM高糖+10%FBS |
GT2326C | Hs821T | 人巨細胞肉瘤Hs821.T | 1680 | DMEM+10%FBS |
GT2327C | SNUC2A | 人結腸癌細胞SNUC2A | 1680 | ACL-4mediumserum-free |
GT2328C | HLFa | 人肺細胞HLFa | 1680 | EMEM+10%FBS |
GT2329C | BCP1 | 人B淋巴細胞瘤細胞BCP1 | 1680 | RPMI-1640+20%FBS |
GT2330C | Ramos2G64C10 | 人B淋巴細胞瘤細胞Ramos-2G6-4C10 | 1680 | RPMI1640+10%FBS |
關鍵字: 人結腸癌氟尿嘧啶耐藥株HCT/Fu;HCT/Fu細胞;人結腸癌氟尿嘧啶耐藥株;ATCC細胞;ATCC官網(wǎng);
上海晶風生物科技有限公司擁有一個蓬勃朝氣的年輕團隊,是一家面向生命科學領域,提供科研類試劑、耗材、儀器、技術服務的生物企業(yè)。包括分子生物學、免疫學、微生物學、細胞學等 。旗下?lián)碛小熬эL生物”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)享有一定的聲譽,深得新老客戶厚愛。本著“服務、誠信、進取”的精神,堅持溝通你我,創(chuàng)新服務,為國內(nèi)外廣大用戶提供產(chǎn)品和服務。