人涎腺腺樣囊性癌細胞ACC-2,培養(yǎng)條件具體詳情可以咨詢我司客服
凍存條件 | 無血清凍存液(貨號:C7001)。 |
傳代方法 | 第一次建議1:2傳代 | 傳代情況 | 2天換液 |
備注 | 建議同時購買完培,同時購買非常優(yōu)惠 |
細胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細胞的最好辦法。收到細胞用75%酒精噴灑整個細胞瓶,消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴格無菌操作,將細胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),前三天照片是重要售后依據(jù),不提供照片默認收到狀態(tài)良好。(換液后將瓶蓋擰松)
人涎腺腺樣囊性癌細胞ACC-2,培養(yǎng)步驟
a、細胞傳代:如果未超過80%匯合度時,將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,留5ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);如果細胞密度超80%,即可進行傳代培養(yǎng),傳代具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,使之完全脫落后吸出,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細胞懸液按1:2的比例進行分瓶傳代(兩個T25瓶),補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入到37℃、5%CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細胞凍存:
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心 5min;
3、 棄上清,沉淀細胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液(貨號:C7001),混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要將細胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,則需在-80℃冰箱 中存放24小時以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細胞復蘇:
1、從液氮中取出細胞凍存管(注意佩戴防護面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍, 直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2、將凍存管中的細胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3、棄上清,沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸,接種至T25培養(yǎng)瓶,放于37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4、第二天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項:有些細胞貼壁不牢,在運輸過程中容易發(fā)生細胞脫落,這是正?,F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm離心5min,收集上清作過渡培養(yǎng)(后期對比培養(yǎng)),沉淀加入胰酶1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化1-2分鐘后,加5ml完全培養(yǎng)基終止反應。再離心,棄上清,加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代(兩個T25),補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
人涎腺腺樣囊性癌細胞ACC-2,款后條款:
1)細胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標準是什么?
1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā);
2. 細胞污染問題,請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi),給我們提出真實的實驗結(jié)果,核實后重發(fā);
3. 常溫發(fā)貨的細胞靜置24小時后,干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后24小時后,絕大多數(shù)細胞未存活,(需提供真實清晰的細胞狀態(tài)照片),重發(fā);
4. 干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細胞靜置4小時候并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
5. 細胞活性問題,請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,核實后予重發(fā);
6. 細胞收到當天以及第2,3天請拍照,3天未告知的,視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現(xiàn)問題時照片以及細胞相關操作的詳細步驟的,并跟技術人員溝通的,由技術人員判定為我方責任的,重發(fā)。技術人員判定為雙方承擔責任的由雙方進行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費重發(fā)。
2)細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
1. 客戶造成細胞污染,不重發(fā);
2. 客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3. 非本庫推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4. 細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
5. 細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
6. 細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
歡迎新老客戶咨詢訂購:人涎腺腺樣囊性癌細胞ACC-2
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GT2248C | H82 | H82狗腎惡性組織細胞增生癥細胞 | 1800 | MEM培養(yǎng)基(GIBCO,貨號41500034,添加NaHCO31.5g/L,SodiumPyruvate0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 |
GT2249C | EGC | 大鼠空腸細胞EGC | 2000 | DMEM+10%FBS |
GT2250C | RTgillW1 | 魚鰓細胞系RTgill-W1(ATCC CRL-2523) | 5000 | L-15+10%FBS無二氧化碳18-20攝氏度 |
GT2251C | CCCSMC1 | 兔主動脈平滑肌細胞CCC-SMC-1 | 1200 | DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterG/LUCose)20%FBS |
GT2252C | WBF344 | 大鼠肝上皮樣干細胞WB-F344 | 1500 | DMEM(高糖)+10%FBS |
GT2253C | RTE | 大鼠氣管上皮細胞RTE | 2000 | MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)20%FBS |
GT2254C | PC12(未分化) | 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞PC-12(未分化) | 1500 | F12K+15%horseserum+5%FBS |
GT2255C | PC12(高分化) | 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞PC-12(高分化) | 900 | DMEM+10%FBS |
GT2256C | PC12(低分化) | 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞PC-12(低分化) | 900 | 1640+10%馬血清+5%胎牛血清 |
GT2257C | RS1 | 大鼠皮膚成纖維樣細胞RS1 | 2000 | RPMI1640(w/oHepes)15%FBS |
GT2258C | WalkerLLCWRC256 | 大鼠腹水癌細胞Walker/LLC-WRC256 | 3500 | 1640+10%FBS |
GT2259C | ERH35 | RH-35大鼠肝癌細胞 | 1500 | DMEM+10%FBS |
GT2260C | IAR20 | 大鼠肝細胞IAR20 | 1800 | MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)20%FBS |
GT2261C | XC | 大鼠Wistar肉瘤細胞XC | 3500 | EMEM+10%FBS |
GT2262C | 3LL | 小鼠肺癌細胞系3LL | 1800 | 1640+10%FBS |
GT2263C | NS1 | 小鼠骨髓瘤細胞NS-1 | 1800 | DMEM(高糖)+10%FBS |
GT2264C | SP2MIL6 | 小鼠骨髓瘤B淋巴細胞SP2/MIL-6 | 1800 | Hybri-CareMedium(ATCC+0.05mM2-Mercaptoethanol+10%FBS |
GT2265C | GT11GT11 | 小鼠垂體瘤細胞GT1.1/GT1-1 | 1800 | DMEM/F12+8%胎牛血清+2%馬血清(兩種血清均需滅活,滅活方法:42度,30分鐘) |
關鍵字: 人涎腺腺樣囊性癌細胞ACC-2;細胞ACC-2;人涎腺腺樣囊性癌細胞;ATCC細胞;ATCC官網(wǎng);
上海晶風生物科技有限公司擁有一個蓬勃朝氣的年輕團隊,是一家面向生命科學領域,提供科研類試劑、耗材、儀器、技術服務的生物企業(yè)。包括分子生物學、免疫學、微生物學、細胞學等 。旗下?lián)碛小熬эL生物”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)享有一定的聲譽,深得新老客戶厚愛。本著“服務、誠信、進取”的精神,堅持溝通你我,創(chuàng)新服務,為國內(nèi)外廣大用戶提供產(chǎn)品和服務。