人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞DMS153,培養(yǎng)條件具體詳情可以咨詢(xún)我司客服
凍存條件 | 無(wú)血清凍存液(貨號(hào):C7001)。 |
傳代方法 | 第一次建議1:2傳代 | 傳代情況 | 2天換液 |
備注 | 建議同時(shí)購(gòu)買(mǎi)完培,同時(shí)購(gòu)買(mǎi)非常優(yōu)惠 |
細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿(mǎn)完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運(yùn)輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個(gè)細(xì)胞瓶,消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)嚴(yán)格無(wú)菌操作,將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),前三天照片是重要售后依據(jù),不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。(換液后將瓶蓋擰松)
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞DMS153,培養(yǎng)步驟
a、細(xì)胞傳代:如果未超過(guò)80%匯合度時(shí),將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,留5ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);如果細(xì)胞密度超80%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),傳代具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,使之完全脫落后吸出,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2的比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個(gè)T25瓶),補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入到37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細(xì)胞凍存:
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心 5min;
3、 棄上清,沉淀細(xì)胞加入1ml的雅吉生物無(wú)血清凍存液(貨號(hào):C7001),混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,則需在-80℃冰箱 中存放24小時(shí)以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細(xì)胞復(fù)蘇:
1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意佩戴防護(hù)面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍, 直至凍存管中無(wú)結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3、棄上清,沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸,接種至T25培養(yǎng)瓶,放于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4、第二天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):有些細(xì)胞貼壁不牢,在運(yùn)輸過(guò)程中容易發(fā)生細(xì)胞脫落,這是正?,F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm離心5min,收集上清作過(guò)渡培養(yǎng)(后期對(duì)比培養(yǎng)),沉淀加入胰酶1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化1-2分鐘后,加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,棄上清,加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個(gè)T25),補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞DMS153售后條款:
1)細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標(biāo)準(zhǔn)是什么?
1. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);
2. 細(xì)胞污染問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi),給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,核實(shí)后重發(fā);
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,(需提供真實(shí)清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片),重發(fā);
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時(shí)候并且未開(kāi)封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
5. 細(xì)胞活性問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,核實(shí)后予重發(fā);
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請(qǐng)拍照,3天未告知的,視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問(wèn)題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題時(shí)照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的,并跟技術(shù)人員溝通的,由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的,重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價(jià)的50%收費(fèi)重發(fā)。
2)細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
1. 客戶(hù)造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
2. 客戶(hù)不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3. 非本庫(kù)推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
歡迎新老客戶(hù)咨詢(xún)訂購(gòu):人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞DMS153
更多細(xì)胞可以咨詢(xún)我司客服:
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GT2026C | SYF | 小鼠胚成纖維細(xì)胞SYF | 1500 | DMEM+10%FBS |
GT2027C | ZEM2S | 斑馬魚(yú)胚胎細(xì)胞ZEM2S | 3500 | 50%L15+35%DMEM+15%F12+10%FBS+15mMHEPES |
GT2028C | NCIH716 | 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞NCIH716 | 1800 | RPMI-1640+10%FBS |
GT2029C | DMS153 | 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞DMS153 | 3000 | Waymouth'sMB752/1+10%FBS |
GT2030C | CHSE214 | 鮭魚(yú)胚胎細(xì)胞CHSE214 | 3500 | M199+5%FBS |
GT2031C | RTG2 | 鱒魚(yú)卵細(xì)胞RTG2 | 5000 | MEM+10%FBS |
GT2032C | NG10815 | 小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞與大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞之融合細(xì)胞NG10815 | 2000 | DMEMwithoutsodiumpyruvate+HAT+10%FBS |
GT2033C | PCK | 大黃魚(yú)腎細(xì)胞PCK | 2000 | M199+20%FBS |
GT2034C | C8D1A | 小鼠小腦組織細(xì)胞/小腦星形膠質(zhì)C8D1A | 1500 | DMEM+10%FBS |
GT2035C | PrHNV8 | 菜青蟲(chóng)卵巢細(xì)胞PrHNV8 | 2500 | Grace'sInsectMedium,Supplemented+10%FBS |
GT2036C | Tb1Lu | 蝙蝠肺細(xì)胞Tb1Lu | 2500 | MEM+10%FBS |
GT2037C | FG | 牙鲆細(xì)胞FG | 2500 | MEM+10%FBS |
GT2038C | L1210 | 小鼠淋巴白血病細(xì)胞L1210 | 1800 | DMEM+10%HS |
GT2039C | OCIAML3 | 人急性骨髓性白血病細(xì)胞OCIAML3 | 2500 | a-MEM或1640+20%FBS |
GT2040C | ARH77 | 人外周血淋巴細(xì)胞ARH77 | 2000 | RPMI-1640+10%FBS |
GT2041C | BC3 | 人胸膜積液B淋巴細(xì)胞BC3 | 2500 | RPMI-1640+20%FBS |
GT2042C | CFPAC1 | 人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞CFPAC1 | 1500 | IMDM+10%FBS |
GT2043C | KATOⅢ | 人胃腺癌細(xì)胞KATOⅢ | 1500 | IMDM+10%FBS |
GT2044C | KHOS240S | 人骨肉瘤細(xì)胞KHOS240S | 1800 | MEM+10%FBS |
GT2045C | SJSA1 | 人骨肉瘤細(xì)胞SJSA1 | 1800 | RPMI-1640+10%FBS |
GT2046C | A9 | 小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株A9 | 2000 | DMEM+10%FBS |
GT2047C | BT | 牛鼻甲骨細(xì)胞BT | 2000 | DMEM+10%HS |
關(guān)鍵字: 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞DMS153;細(xì)胞DMS153;人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;ATCC細(xì)胞;ATCC官網(wǎng);
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