小鼠肝癌細(xì)胞HEPA16,培養(yǎng)條件具體詳情可以咨詢我司客服
凍存條件 | 無血清凍存液(貨號:C7001)。 |
傳代方法 | 第一次建議1:2傳代 | 傳代情況 | 2天換液 |
備注 | 建議同時購買完培,同時購買非常優(yōu)惠 |
細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運(yùn)輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個細(xì)胞瓶,消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴(yán)格無菌操作,將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),前三天照片是重要售后依據(jù),不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。(換液后將瓶蓋擰松)
小鼠肝癌細(xì)胞HEPA16,培養(yǎng)步驟
a、細(xì)胞傳代:如果未超過80%匯合度時,將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,留5ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);如果細(xì)胞密度超80%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),傳代具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,使之完全脫落后吸出,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2的比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個T25瓶),補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入到37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細(xì)胞凍存:
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心 5min;
3、 棄上清,沉淀細(xì)胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液(貨號:C7001),混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,則需在-80℃冰箱 中存放24小時以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細(xì)胞復(fù)蘇:
1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意佩戴防護(hù)面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍, 直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3、棄上清,沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸,接種至T25培養(yǎng)瓶,放于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4、第二天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):有些細(xì)胞貼壁不牢,在運(yùn)輸過程中容易發(fā)生細(xì)胞脫落,這是正常現(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm離心5min,收集上清作過渡培養(yǎng)(后期對比培養(yǎng)),沉淀加入胰酶1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化1-2分鐘后,加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,棄上清,加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個T25),補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
小鼠肝癌細(xì)胞HEPA16,售后條款:
1)細(xì)胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標(biāo)準(zhǔn)是什么?
1. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);
2. 細(xì)胞污染問題,請?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時內(nèi),給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,核實(shí)后重發(fā);
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,(需提供真實(shí)清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片),重發(fā);
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時候并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
5. 細(xì)胞活性問題,請?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,核實(shí)后予重發(fā);
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請拍照,3天未告知的,視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題時照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的,并跟技術(shù)人員溝通的,由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的,重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費(fèi)重發(fā)。
2)細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
1. 客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3. 非本庫推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
歡迎新老客戶咨詢訂購:小鼠肝癌細(xì)胞HEPA16
更多細(xì)胞可以咨詢我司客服:
GT1802C | ID8 | 小鼠卵巢上皮癌細(xì)胞ID8 | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S+貼壁 |
GT1803C | MC3T3E1subclone14 | 小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆MC3T3E1subclone14 | 1800 | MEMα(添加NaHCO31.5g/L+肌醇43.2mg/L+葉酸8.82mg/L+β-巰基乙醇7.8mg/L)+FBS10%+P/S1% |
GT1804C | EL4 | 小鼠淋巴瘤細(xì)胞EL4 | 1800 | DMEM(含NaHCO31.5g/L)+10%馬血清(或FBS)+1%P/S |
GT1805C | L5178YTKclone(372C) | 小鼠淋巴瘤細(xì)胞L5178YTKclone(3.7.2C) | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1806C | YAC1 | 小鼠淋巴瘤細(xì)胞YAC1 | 1500 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮 |
GT1807C | SVEC410 | 小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞SVEC410 | 1800 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1808C | Ana1 | 小鼠巨噬細(xì)胞Ana1 | 1350 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮 |
GT1809C | GC1spg | 小鼠精原細(xì)胞系GC1spg | 1350 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1810C | MC38 | 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞MC38 | 1500/3000 | DMEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1%HEPES+1%P/S |
GT1811C | CT26 | 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞CT26 | 1500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1812C | CT26WT | 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞CT26.WT | 1500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1813C | GL261 | 小鼠膠質(zhì)細(xì)胞瘤GL261 | 2500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1814C | P19 | 小鼠畸胎瘤細(xì)胞P19 | 1500 | MEMα+7.5%小牛血清+2.5%胎牛血清+1%P/S |
GT1815C | B16 | 小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16 | 1350 | 1640(或IMDM)+10%FBS+1%P/S |
GT1816C | B16B | 小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16B | 1350 | 1640+10%小牛血清+1%P/S貼壁 |
GT1817C | B16F10 | 小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16F10 | 1500 | DMEM(含NaHCO31.5g/L)+10%FBS+1%P/S |
GT1818C | HT22 | 小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞HT22 | 1800 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1819C | MLOY4 | 小鼠骨樣細(xì)胞MLOY4 | 1800 | MEMa+5%FBS+5%小牛血清+1%P/S鼠尾膠原包被 |
GT1820C | Sp20 | 小鼠骨髓瘤細(xì)胞Sp20 | 1500 | 1640+10%FBS+1%P/S圓形貼壁,傳代時不可吹打?。?!使其自然脫落 |
GT1821C | Sp20Ag14 | 小鼠骨髓瘤細(xì)胞Sp20Ag14 | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S懸浮不要用力吹打(生長時會沉到瓶底) |
GT1822C | OP9 | 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞OP9 | 1500 | MEMa+20%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1823C | K7M2WT | 小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞K7M2WT | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1824C | TM3 | 小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞TM3 | 1500 | DMEM/F12+2.5%FBS+5%馬血清+1%P/S貼壁 |
GT1825C | AML12 | 小鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞AML12 | 1800 | D/F12+10%FBS+1%ITS(10ug/mL胰島素;轉(zhuǎn)鐵蛋白5.5ug/mL;5ng/mL硒)+40ng/ml地塞米松+1%P/S |
GT1826C | HEPA16 | 小鼠肝癌細(xì)胞HEPA16 | 1500 | DMEM(含NaHCO31.5g/L)+10%FBS+1%丙酮酸納+1%P/S貼壁 |
GT1827C | H22 | 小鼠肝癌細(xì)胞H22 | 1500 | RPMI-1640+10%FBS |
GT1828C | S180 | 小鼠腹水瘤細(xì)胞S180 | 1800 | 1640含NaHCO31.5g/L)+g/LUCose2.5g/L+SodiumPyruvate0.11g/L+10%FBS+1%P/S |
GT1829C | MLE12 | 小鼠肺上皮細(xì)胞MLE12 | 1500 | DMEM/F12+1%ITS(10ug/mL胰島素;轉(zhuǎn)鐵蛋白5.5ug/mL;5ng/mL硒)+10nM氫化可的松+10nM雌二醇+10mMhepes+2mML-谷氨酰胺+2%胎牛血清 |
GT1830C | MHS | 小鼠肺泡巨噬細(xì)胞MHS | 1500 | 1640+10%FBS+0.05mM巰基乙醇(β-Me)半貼 |
GT1831C | LL2(LLC1) | 小鼠肺癌細(xì)胞LL2(LLC1) | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1832C | LLC | 小鼠肺癌細(xì)胞LLC | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1833C | P815 | 小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞P815 | 1350 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮,少量貼壁 |
GT1834C | RAW2647 | 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞RAW264.7 | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁,傳代時密度要大,易分化 |
GT1835C | J774A1 | 小鼠單核巨噬細(xì)胞J774A.1 | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1836C | L929 | 小鼠成纖維細(xì)胞/結(jié)締組織成纖維細(xì)胞L929 | 1500 | MEM+10%HS(馬血清)+1%P/S |
GT1837C | NCTCclone929 | 小鼠成纖維細(xì)胞/結(jié)締組織成纖維細(xì)胞NCTCclone929 | 1500 | MEM+10%HS(馬血清)+1%P/S貼壁 |
GT1838C | C2C12 | 小鼠成肌細(xì)胞C2C12 | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S,C2C12細(xì)胞生長較快,培養(yǎng)時細(xì)胞密度不可過高,否則容易分化 |
GT1839C | MB49 | 小鼠膀胱癌細(xì)胞MB49 | 1350 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1840C | P388 | 小鼠白血病細(xì)胞P388 | 1350 | 1640+10%FBS+1%P/S |
關(guān)鍵字: 小鼠肝癌細(xì)胞HEPA16;細(xì)胞HEPA16;小鼠肝癌細(xì)胞;ATCC細(xì)胞;ATCC官網(wǎng);
上海晶風(fēng)生物科技有限公司擁有一個蓬勃朝氣的年輕團(tuán)隊(duì),是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域,提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛小熬эL(fēng)生物”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)享有一定的聲譽(yù),深得新老客戶厚愛。本著“服務(wù)、誠信、進(jìn)取”的精神,堅(jiān)持溝通你我,創(chuàng)新服務(wù),為國內(nèi)外廣大用戶提供產(chǎn)品和服務(wù)。