人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞ncm460，培養(yǎng)條件具體詳情可以咨詢我司客服
凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001）。 |
傳代方法 | 第一次建議1:2傳代 | 傳代情況 | 2天換液 |
備注 | 建議同時購買完培，同時購買非常優(yōu)惠 |
細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運(yùn)輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個細(xì)胞瓶，消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴(yán)格無菌操作，將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（最好40x,100x,200x各一張），前三天照片是重要售后依據(jù)，不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。（換液后將瓶蓋擰松）
人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞ncm460，培養(yǎng)步驟
a、細(xì)胞傳代：如果未超過80%匯合度時，將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，留5ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；如果細(xì)胞密度超80%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)，傳代具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，使之完全脫落后吸出，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2的比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個T25瓶），補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入到37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細(xì)胞凍存：
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心 5min；
3、 棄上清，沉淀細(xì)胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液（貨號：C7001），混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可，如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中，則需在-80℃冰箱 中存放24小時以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細(xì)胞復(fù)蘇：
1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意佩戴防護(hù)面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍， 直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、棄上清，沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸，接種至T25培養(yǎng)瓶，放于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4、第二天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項(xiàng)：有些細(xì)胞貼壁不牢，在運(yùn)輸過程中容易發(fā)生細(xì)胞脫落，這是正?，F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過渡培養(yǎng)（后期對比培養(yǎng)），沉淀加入胰酶1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心，棄上清，加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個T25），補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞ncm460，售后條款：
1）細(xì)胞出現(xiàn)問題，可重發(fā)的情況有哪些？判定標(biāo)準(zhǔn)是什么？
1. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)；
2. 細(xì)胞污染問題，請?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時內(nèi)，給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，核實(shí)后重發(fā)；
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時后，干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，（需提供真實(shí)清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片），重發(fā)；
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時候并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
5. 細(xì)胞活性問題，請?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，核實(shí)后予重發(fā)；
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請拍照，3天未告知的，視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題時照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的，并跟技術(shù)人員溝通的，由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的，重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費(fèi)重發(fā)。
2）細(xì)胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
1. 客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
3. 非本庫推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
歡迎新老客戶咨詢訂購：人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞ncm460
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| GT1238C | NCIH929 | 人骨髓瘤細(xì)胞NCIH929 | 2500 | 1640+10%FBS+0.05mMβ-Me（巰基乙醇）+1%P/S |
| GT1239C | NCIN87 | 人胃腺癌細(xì)胞NCIN87 | 1500 | 1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉貼壁 |
| GT1240C | ncm460 | 人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞ncm460 | 3000 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1241C | NK92 | 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞NK92 | 3000 | MEMα+0.2mMInositol（肌醇）+0.1mMβ-mercaptoethanol（β巰基乙醇）β+0.02mMFolicAcid（葉酸）+100-200U/mLrecombinantIL-2白介素+12.5%HS(HYCLONE馬血清）+12.5%FBS+1%P/S |
| GT1242C | NK92MI | 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞NK92MI | 3000 | MEMα+肌醇0.2mM+β-巰基乙醇0.1mM+葉酸0.02mM+馬血清12.5%+FBS12.5%+P/S1% |
| GT1243C | NOZ | 人膽囊癌細(xì)胞NOZ | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1244C | NP69 | 人鼻咽黏膜上皮細(xì)胞NP69 | 2500 | 角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)體系（BW-010） |
| GT1245C | NPCHK1 | 人鼻咽癌細(xì)胞系NPCHK1 | 2500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1246C | Nthyori31 | 人甲狀腺正常細(xì)胞Nthyori31 | 2000 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1247C | OCM1A | 人眼膜絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞OCM1A | 1800 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1248C | ONS76 | 人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞ONS76 | 12000 | 1640+10%FBS日本JCRB引進(jìn)價格3萬成本基本全國沒有 |
| GT1249C | OSRC2 | 人腎癌細(xì)胞OSRC2 | 1500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1250C | OVCAR3 | 人卵巢腺癌細(xì)胞OVCAR3 | 1800 | 1640（含NaHCO31.5g/L)+20%FBS+0.01mg/ml胰島素+1%PS |
| GT1251C | P53R | 人結(jié)直腸癌細(xì)胞P53R | 1500 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1252C | Panc0327 | 人胰腺癌細(xì)胞Panc03.27 | 1500 | 1640+15%FBS+0.01mg/mL胰島素+1%p/s |
| GT1253C | Panc0504 | 人胰腺癌上皮細(xì)胞Panc05.04 | 1800 | 1640+15%FBS+0.01mg/ml人重組胰島素貼壁+1%P/S |
| GT1254C | Panc1005 | 人胰腺癌細(xì)胞Panc10.05 | 1800 | 1640+15%FBS+0.01mg/ml胰島素+1%P/S |
| GT1255C | PANC1 | 人胰腺癌細(xì)胞PANC1 | 1800 | DMEM+15%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%P/S |
| GT1256C | PATU8988t | 人胰腺癌細(xì)胞PATU8988t | 1500 | DMEM+5%FBS+5%HS(馬血清)+1%L-谷氨酰胺+1%P/S貼壁 |
| GT1257C | PATU8988S | 人胰腺癌細(xì)胞PATU8988S | 1800 | DMEM+5%FBS+5%HS（馬血清）+1%L-谷氨酰胺+1%P/S |
| GT1258C | PC3 | 人前列腺癌PC3 | 1500 | F12K+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1259C | pc9 | 人肺腺癌細(xì)胞pc9 | 1500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁少量懸浮 |
| GT1260C | PC9gr | 人肺癌細(xì)胞耐吉非替尼PC9/GR | 99999 | 暫不出售，狀態(tài)比較差藥性太強(qiáng) |
| GT1261C | PL45 | 人胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞PL45 | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1262C | PLCPRF5 | 人肝癌細(xì)胞PLCPRF5 | 1500 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1263C | QSG770 | 人正常肝細(xì)胞QSG770 | 1500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
關(guān)鍵字： 人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞ncm460;細(xì)胞ncm460;人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞;ATCC細(xì)胞;ATCC官網(wǎng);
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