人肺腺癌細胞NCIH1437,培養(yǎng)條件具體詳情可以咨詢我司客服
凍存條件 | 無血清凍存液(貨號:C7001)。 |
傳代方法 | 第一次建議1:2傳代 | 傳代情況 | 2天換液 |
備注 | 建議同時購買完培,同時購買非常優(yōu)惠 |
細胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細胞的最好辦法。收到細胞用75%酒精噴灑整個細胞瓶,消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴格無菌操作,將細胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),前三天照片是重要售后依據(jù),不提供照片默認收到狀態(tài)良好。(換液后將瓶蓋擰松)
人肺腺癌細胞NCIH1437,培養(yǎng)步驟
a、細胞傳代:如果未超過80%匯合度時,將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,留5ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);如果細胞密度超80%,即可進行傳代培養(yǎng),傳代具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,使之完全脫落后吸出,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細胞懸液按1:2的比例進行分瓶傳代(兩個T25瓶),補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入到37℃、5%CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細胞凍存:
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心 5min;
3、 棄上清,沉淀細胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液(貨號:C7001),混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要將細胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,則需在-80℃冰箱 中存放24小時以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細胞復(fù)蘇:
1、從液氮中取出細胞凍存管(注意佩戴防護面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍, 直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2、將凍存管中的細胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3、棄上清,沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸,接種至T25培養(yǎng)瓶,放于37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4、第二天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項:有些細胞貼壁不牢,在運輸過程中容易發(fā)生細胞脫落,這是正常現(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm離心5min,收集上清作過渡培養(yǎng)(后期對比培養(yǎng)),沉淀加入胰酶1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化1-2分鐘后,加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,棄上清,加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代(兩個T25),補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
人肺腺癌細胞NCIH1437,售后條款:
1)細胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標準是什么?
1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā);
2. 細胞污染問題,請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi),給我們提出真實的實驗結(jié)果,核實后重發(fā);
3. 常溫發(fā)貨的細胞靜置24小時后,干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇后24小時后,絕大多數(shù)細胞未存活,(需提供真實清晰的細胞狀態(tài)照片),重發(fā);
4. 干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細胞靜置4小時候并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
5. 細胞活性問題,請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,核實后予重發(fā);
6. 細胞收到當天以及第2,3天請拍照,3天未告知的,視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現(xiàn)問題時照片以及細胞相關(guān)操作的詳細步驟的,并跟技術(shù)人員溝通的,由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的,重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔責(zé)任的由雙方進行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費重發(fā)。
2)細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
1. 客戶造成細胞污染,不重發(fā);
2. 客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3. 非本庫推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4. 細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
5. 細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
6. 細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
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GT1192C | ME180 | 人子宮頸表皮癌細胞ME180 | 1500 | MACOY'S5A+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1193C | MEG01 | 人巨核細胞白血病細胞MEG01 | 2500 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮少量貼壁 |
GT1194C | MET5A | 人膜間皮細胞MET5A | 1800 | M199+NaHCO31.5g/L+3.3nMEGF+400nM氫化可的松+20mMHEPES++1%ITS(10ug/mL胰島素;轉(zhuǎn)鐵蛋白5.5ug/mL;5ng/mL硒)+10%FBS+1%PS |
GT1195C | MG63 | 人骨肉瘤細胞MG63 | 1500 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1196C | MGC803 | 人胃癌細胞MGC803 | 1500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1197C | MHCC97H | 人高轉(zhuǎn)移性肝癌細胞MHCC97H | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1198C | MHCC97L | 人高轉(zhuǎn)移性肝癌細胞MHCC97L | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1199C | MIAPACA2 | 人胰腺癌細胞MIAPACA2 | 1500 | DMEM+10%FBS+2.5%馬血清+1%P/S半貼 |
GT1200C | MKN28 | 人胃腺癌細胞MKN28 | 1500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
GT1201C | MKN45 | 人胃腺癌細胞MKN45 | 1500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁不牢 |
GT1202C | MM1R | 人多發(fā)性骨髓瘤細胞漿細胞骨髓瘤MM.1R | 1800 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮+貼壁 |
GT1203C | MM1S | 人IgA-?骨髓瘤細胞漿細胞骨髓瘤MM.1S | 1800 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮+貼壁 |
GT1204C | MOLT4 | 人急性淋巴母細胞白血病細胞MOLT4 | 1500 | 1640(含NAHCO31.5g/L)+10%FBS+1%PS懸浮 |
GT1205C | MonoMac6 | 人急性單核細胞白血病細胞MonoMac6 | 3000 | 1640+10%FBS+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+10μg/ml胰島素+1%PS懸浮生長 |
GT1206C | MRC5 | 人胚肺成纖維細胞MRC5 | 1800 | MEM+10%FBS+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1%L-谷氨酰胺+1%P/S貼壁 |
GT1207C | MS751 | 人子宮頸表皮癌細胞MS751 | 1500 | 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%PS貼壁生長 |
GT1208C | MT2 | 人白血病細胞MT2 | 7500 | 1640+10%FBS++1%P/S懸浮 |
GT1209C | MUM2B | 人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞MUM2B | 1800 | 1640+10%FBS+20mMhepes+1%P/S貼壁 |
GT1210C | MV411 | 人慢性骨髓單核細胞性白血病MV411 | 1500 | IMDM+10%FBS |
GT1211C | NALM6 | 人前B急性淋巴細胞白血病細胞NALM6 | 1500 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮 |
GT1212C | NCCIT | 人畸胎癌細胞NCCIT | 1500 | 1640(含NaHCO31.5g/L)+10%FBS+1%PS貼壁 |
GT1213C | NCIH1299 | 人非小細胞肺癌細胞NCIH1299 | 1500 | 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%(10mM)HEPES+1%丙酮酸鈉+1%P/S貼壁 |
GT1214C | NCIH1395 | 人肺腺癌細胞NCIH1395 | 1500 | 1640+10%FBS+1%P/S+1%丙酮酸鈉+1%L-谷氨酰胺貼壁 |
GT1215C | NCIH1437 | 人肺腺癌細胞NCIH1437 | 1500 | 1640+10%FBS+1%丙酮酸鈉+1%hepes貼壁 |
關(guān)鍵字: 人肺腺癌細胞NCIH1437;人肺腺癌細胞NCIH1437;人肺腺癌細胞NCIH1437;ATCC細胞;ATCC官網(wǎng);
上海晶風(fēng)生物科技有限公司擁有一個蓬勃朝氣的年輕團隊,是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域,提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細胞學(xué)等 。旗下?lián)碛小熬эL(fēng)生物”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)享有一定的聲譽,深得新老客戶厚愛。本著“服務(wù)、誠信、進取”的精神,堅持溝通你我,創(chuàng)新服務(wù),為國內(nèi)外廣大用戶提供產(chǎn)品和服務(wù)。