方法和結(jié)果:采用3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物(MTT)、堿性磷酸酶(ALP)活性和油紅O法檢測(cè)染料木黃酮、黃豆苷元和黃豆黃素對(duì)原代小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞(MSCs)成骨和成脂分化以及原代小鼠成脂分化的影響。結(jié)果表明,黃豆苷元、染料木黃酮和黃豆黃素濃度在1 × 10?8mol/L至1×10?5 mol/L時(shí)可促進(jìn)MSCs和成骨細(xì)胞的增殖;染料木黃酮、黃豆苷元和黃豆黃素在適當(dāng)濃度如17β-雌二醇時(shí)促進(jìn)成骨分化,抑制MSCs的成骨分化,抑制成骨細(xì)胞的脂肪細(xì)胞轉(zhuǎn)分化。結(jié)論:染料木黃酮、黃豆苷元和黃豆素調(diào)節(jié)間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨和成脂譜系的雙重分化過(guò)程,以及原代成骨細(xì)胞向脂肪細(xì)胞譜系的轉(zhuǎn)分過(guò)程,引起譜系向成骨細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。它們對(duì)骨骼的保護(hù)作用可能是通過(guò)逆轉(zhuǎn)脂肪生成介導(dǎo)的,這可能促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖、分化和礦化,并使脂肪細(xì)胞分泌較少的細(xì)胞因子,從而促進(jìn)破骨細(xì)胞的形成和活化。此外,研究結(jié)果還表明,染料木黃酮、黃豆苷元和黃豆黃素可能有助于預(yù)防類固醇誘導(dǎo)的骨壞死的發(fā)展。
方法和結(jié)果:我們研究了大豆苷元和甘日豆素混合物(分別是黃豆苷元和黃豆黃素的糖苷類異黃酮)對(duì)高脂飲食 (HF) 喂養(yǎng)的 C57BL/6J 小鼠體重、血脂水平、糖尿病標(biāo)志物和代謝的影響 92 天。將小鼠分為基礎(chǔ)飲食組(CON)、HF組和HF聯(lián)合異黃酮混合物組(HFISO)。結(jié)果顯示,與HF組相比,HFISO組小鼠的體重和脂肪組織明顯降低。HFISO組的血糖、血清HbA1c和血清胰島素水平也較低。此外,HFISO組小鼠肝臟GSH水平較高,血清8-羥基-2'-脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)水平較低。結(jié)論:結(jié)果表明,大豆苷和黃豆素對(duì)氧化應(yīng)激的調(diào)節(jié)與脂肪組織的抑制和糖尿病的進(jìn)展密切相關(guān)。
強(qiáng)烈和反復(fù)的紫外線照射在皮膚上會(huì)導(dǎo)致皮膚老化,其特征是皺紋、松弛、色素沉著和松弛。大量研究表明,基質(zhì)金屬蛋白酶與皮膚老化有關(guān),并作為各種類型膠原蛋白的降解酶發(fā)揮作用。方法和結(jié)果:在這里,我們?cè)噲D評(píng)估甘油素(4'-羥基-6-甲氧基-異黃酮-7-D-葡萄糖苷)對(duì)紫外線照射的人真皮成纖維細(xì)胞皮膚老化的有效性和作用機(jī)制。特別關(guān)注通過(guò)3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物、Western blot和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)在細(xì)胞裂解物或培養(yǎng)基中降解真皮中原I型膠原的Matrix metalloproteinase-1(MMP-1)的表達(dá)。我們的結(jié)果表明,甘氨酸提高了人真皮成纖維細(xì)胞的活力,并緩解了紫外線照射引起的MMP-1表達(dá)。此外,I型膠原的合成增加,紫外線誘導(dǎo)的ERK/JNK/p38磷酸化以劑量依賴性方式降低。綜上所述,我們證明了黃豆素處理通過(guò)抑制 MMP-1 和通過(guò) ERK/JNK/P38 下調(diào)增加膠原蛋白對(duì)皮膚老化具有保護(hù)作用,這可能通過(guò)抑制 ERK、JNK 和 p38 絲裂原活化蛋白激酶介導(dǎo)。結(jié)論:我們認(rèn)為Glycitin是治療皮膚老化的潛在藥物。
來(lái)自Sulfolobus solfataricus的重組β-葡萄糖苷酶對(duì)異黃酮的比活性為:大豆苷>甘油素>genistin>丙二?;鞍?gt;丙二酰大豆苷>丙二??s水素。該酶對(duì)大豆苷的水解活性在pH 5.5和90°C時(shí)最高,半衰期為18 h,K (m)為0.5 mM,k (cat)為2532 s(-1)。該酶在1 h后將1 mM大豆苷元轉(zhuǎn)化為1 mM 大豆苷元,摩爾產(chǎn)量為100%,生產(chǎn)率為1 mM h(-1)。在β-葡萄糖苷酶中,大豆鏈球菌β糖苷酶在大豆苷水解中的熱穩(wěn)定性、k(cat)、k(cat)/K(m)、轉(zhuǎn)化率和生產(chǎn)率最高。
從甘草中分離出異黃酮Glycitin,對(duì)α-葡萄糖苷酶有一定的抑制作用。該化合物是首次從甘草中分離出來(lái)。體外測(cè)試了該化合物對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制活性,對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制效果良好,IC50為0.5646 mg·mL-1,優(yōu)于位置對(duì)照阿卡波糖。動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,甘油素的抑制作用為非競(jìng)爭(zhēng)性抑制,Kmis常數(shù)為8.1571 mol·L-1.Kiis值為1.318 mg·mL-1,采用Dixon方程計(jì)算。
細(xì)胞系:骨髓干細(xì)胞 (BMSC)濃度:0.01、0.5、1、5 和 10 μM孵育時(shí)間: 7 天方法:將 BMSC(1-2×106 個(gè)細(xì)胞或每孔 1-2×104 個(gè)細(xì)胞)在 6 孔或 96 孔培養(yǎng)板中在含有 5% CO2 的氣氛中在 37°C 下培養(yǎng)過(guò)夜。 將豆豆素以終濃度 0.01 添加到孔中, 0.5、1、5 和 10 μM,培養(yǎng) 7 天。在 6 孔培養(yǎng)板中培養(yǎng)的細(xì)胞中,使用 Oil Red O 染色測(cè)定 BMSC,并通過(guò) 510 nm 的光學(xué)顯微鏡觀察。將BMSCs使用5%預(yù)冷的多聚甲醛在4°C下固定30分鐘,并在室溫下用0.6%(w / v)油紅O溶液染色15分鐘。用油紅O染色的細(xì)胞用水(3×5分鐘)洗滌以除去未結(jié)合的染料,并將培養(yǎng)皿用1ml異丙醇染色10分鐘。在 96 孔培養(yǎng)板中培養(yǎng)的細(xì)胞中,通過(guò) MTT 測(cè)定法測(cè)定 BMSC。向每個(gè)孔中加入總共20μlMTT(5g / l)并培養(yǎng)4小時(shí)。除去上清液,向每個(gè)孔中加入200μl二甲基亞砜15分鐘。使用微孔板分光光度計(jì)在 570 nm 處測(cè)量光密度 (OD)。增殖率的計(jì)算方法為:OD處理/OD控制×100%。
動(dòng)物模型:雌性Sprague-Dawley大鼠配方:懸浮在含有1%羥丙基纖維素的水中 劑量:25、50或100 mg/kg/d給藥:p.o.
湖北萃園生物科技有限公司
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王玲