淫羊藿在中國(guó)和東亞地區(qū)享有盛譽(yù),因?yàn)辄S酮衍生物含量高,包括淫羊藿苷、表皮美素A、表美素B和epimedin C,以下簡(jiǎn)稱為生物活性成分,已被廣泛用于治療多種疾病。到目前為止,生物活性成分生物合成的分子機(jī)制尚不清楚。方法與結(jié)果:本研究考察了光脅迫(24 h光照)對(duì)淫羊藿中生物活性成分積累和類黃酮基因表達(dá)的影響。在光脅迫下,結(jié)構(gòu)基因CHS1、CHI1、F3H、FLS、DFR1、DFR2和ANS顯著上調(diào),CHS2和F3′H顯著下調(diào)。對(duì)于轉(zhuǎn)錄因子,淫羊藿MYB7和TT8的表達(dá)增加,而淫羊藿GL3、MYBF和TTG1的表達(dá)降低。此外,在光脅迫下,生物活性成分含量顯著降低。結(jié)論:我們的結(jié)果表明,生物活性化合物的減少可能歸因于晚期基因(DFRs和ANS)的轉(zhuǎn)錄本增加到比早期基因(FLS和CHS1)更高的水平。
黃酮類化合物是淫羊藿的主要活性成分,主要包括淫羊藿苷、表皮美素A、表皮孟定B、表皮孟定C和包火苷?,F(xiàn)代藥理研究表明,淫羊藿黃酮具有明顯的抗骨質(zhì)疏松作用。 為了獲得更好的吸收,口服給藥后需要腸道酶和腸道細(xì)菌轉(zhuǎn)化為次生糖苷[1]。然而,腸道酶和腸道細(xì)菌不穩(wěn)定,可能受到種族、年齡、飲食和藥物的影響[2]。在體外篩選有效、安全的水解酶并將其添加到淫羊藿黃酮制劑中,可以促進(jìn)淫羊藿類黃酮的口服吸收,提高其生物利用度,提高其療效。方法與結(jié)果:本研究旨在篩選有效、安全的水解酶,研究影響淫羊藿類黃酮仿生酶水解的不同因素,優(yōu)化構(gòu)建新型仿生酶解給藥給藥體系的反應(yīng)條件。為模擬體內(nèi)環(huán)境,設(shè)定溫度為37°C,選用人工腸液和胃液作為緩沖溶液。以淫羊藿類黃酮轉(zhuǎn)化為指標(biāo),研究了酶的種類、酶與底物的比例、底物濃度、反應(yīng)時(shí)間、胰酶的影響。結(jié)論:人工腸液中蝸牛酶對(duì)淫羊藿類黃酮的轉(zhuǎn)化率最高,酶解產(chǎn)物與腸道代謝產(chǎn)物一致。此外,主要黃酮類化合物可在2~6 h內(nèi)完全轉(zhuǎn)化為次生糖苷或苷元。
方法與結(jié)果:采用微波輔助萃取、大孔樹脂和制備型HPLC相結(jié)合,開發(fā)了一種高效、可行的Epimedin A、Epimedin B、Epimedin C和淫羊藿苷富集分離方法。WDX-5大孔樹脂對(duì)表敏素A、B、C和淫羊藿藿的回收率分別為96.2%、97.0%、98.2%和97.1%,優(yōu)于實(shí)驗(yàn)中使用的其他大孔樹脂。結(jié)果,從6.0 g粗Herba Epimedii中提取了epimedins A(5.1 mg)、Epimedin B(15.3 mg)、Epimedin C(7.6 mg)和淫羊藿苷(14.3 mg),回收率分別為70.8%、68.9%、66.7%和95.3%。結(jié)論:本研究開發(fā)的方法可為草本黃酮類化合物的富集和分離提供科學(xué)參考。
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王玲